肥大细胞与腧穴

皮肤活检发现肥大细胞密集是经脉腧穴和微针系统针刺靶点的共同特点。肥大细胞与神经纤维、微血管在组织分布毗邻。外界机械或温度等物理刺激可激活肥大细胞,释放多种细胞因子和化学因子,形成局部炎症性内环境,导致周围C神经等结构敏化。敏化的C神经释放P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)。SP激活肥大细胞,CGRP促进局部微血管扩张而渗透性增加,血浆外渗,白细胞浸润,促进周围组织敏化。肥大细胞激活与C神经纤维敏化之间的反复循环持久存在会导致中枢敏化。周围与中枢敏化表现为腧穴区域敏化,包括对温度的敏化和对压痛的敏化,成为针刺和艾灸靶组织的重要特征。

黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠血糖和血脂代谢的影响

目的 :探讨黄连解毒汤对实验性 2型糖尿病大鼠的血糖、血脂代谢的影响 ,并探讨其作用机理。方法 :对照观察黄连解毒汤对实验性 2型糖尿病大鼠总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、载脂蛋白AI(APOAI)、载脂蛋白B(APOB)、口服糖耐量试验 (OGTT)、空腹血糖 (FBG)、血清胰岛素 (INS)、进食及体重的影响。结果 :给予黄连解毒汤干预的 2型糖尿病大鼠 ,其TC、TG、APOB、FBG水平均比模型对照组明显降低 ,而HDL C、APOAI水平显著升高 ,OGTT改善 ,大鼠体重减轻。结论 :黄连解毒汤具有降糖、降脂等作用 ,其作用机理可能与增强胰岛素敏感性及促进胰岛素释放等环节密切相关。

黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠血糖和血脂代谢的影响(英文)

背景:黄连解毒汤是清热解毒代表方,治疗多种非感染性疾病有较好疗效,但实验研究证据尚较缺乏。目的:研究黄连解毒汤对实验性2型糖尿病大鼠的血糖、血脂代谢的影响。设计:随机对照的实验研究。地点、材料和干预:实验在华中科技大学同济医学院实验动物中心清洁级动物实验室进行。实验选用清洁级雄性Wistar大鼠42只,用脲佐菌素配合高脂饲料饲养方法建立2型糖尿病模型,分为黄连解毒汤组、二甲双胍组、模型组各11只,采用相应药物治疗8周,另设9只作为正常对照组。主要观察指标:①治疗4周后每组大鼠口服葡萄糖耐量检测结果。②治疗8周后每组大鼠血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇(highdensitylipoproteincholesterol,HDL-C)、载脂蛋白A1(apolipoproteinA1,ApoA1)、载脂蛋白B(apolipoproteinB,ApoB)、空腹血糖、空腹血清胰岛素、平均日进食量、体质量检测结果。结果:黄连解毒汤组总胆固醇犤(1.91±0.23)mmol/L犦、三酰甘油犤(0.41±0.72)mmol/L犦、ApoB犤(0.37±0.03)mmol/L犦、空腹血糖犤(7.1±0.9)mmol/L犦、进食量犤(19.0±0.7)g犦、大鼠体质量犤(308.7±9.9)g犦低于模型组犤(3.18±0.17),(1.85±0.73),(0.46±0.04),(8.9±1.3)mmol/L,(21.3±1.9),(342.5±20.1)g犦(F=9.6,P<0.05;F=15.2～41.2。

黄连解毒汤与黄连素对2型糖尿病大鼠葡萄糖和脂质代谢影响的比较研究

采用小剂量链脲佐菌素加高脂高热量饲料喂养的方法建立 Wistar大鼠 2型糖尿病模型 ,分别以黄连解毒汤和黄连素片干预性治疗 8周 ,检测血糖和血脂代谢等指标 ;结果表明黄连解毒汤组和黄连素组大鼠总胆固醇、甘油三酯、载脂蛋白 B、空腹血糖水平均比模型组明显降低 ,而高密度脂蛋白 -胆固醇、载脂蛋白 A 水平显著升高 ,口服糖耐量试验改善、大鼠体重减轻 ,但黄连解毒汤和黄连素两组之间各指标无显著性差异。含等量盐酸小檗碱的黄连解毒汤与黄连素片降血糖和调血脂作用强度相近 。

黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠血清炎性介质和标志物水平的影响

目的:探讨黄连解毒汤对实验性2型糖尿病血清部分炎症介质和标志物的影响,并初步讨论其作用机制。方法:以链脲佐菌素(STZ)静脉注射加高脂肪高热卡饮食饲养建立2型糖尿病大鼠模型,对照观察黄连解毒汤对实验性2型糖尿病大鼠治疗前后口服糖耐量实验(OGTT)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、急相反应蛋白C(CRP)一系列指标的影响。结果:给予黄连解毒汤治疗的实验性2型糖尿病大鼠,其血清中FBG、IL-1β、IL-6、TNF-α、CRP的水平比模型对照组明显降低,OGTT显著改善。结论:黄连解毒汤具有降糖、抗炎、改善胰岛素抵抗等作用,其作用机制可能与其改善2型糖尿病的炎症反应程度,改善胰岛素信号传导功能有关。

黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠血管内皮功能的影响

目的:通过观察黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠血管内皮功能的影响,探讨黄连解毒汤对2型糖尿病血管并发症的防治意义及其机制。方法:采用小剂量链脲佐菌尾静脉注射加高糖高热量饲料喂养的方法建立2型糖尿病大鼠模型,将模型动物随机分为模型组、黄连解毒汤组、阿司匹林组,另设正常对照组。药物干预治疗9周后,各组动物进行口服糖耐量实验(OGTT);10周后,观察各组动物体重变化并检测各组空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、空腹血清胰岛素(FINS)值及血清一氧化氮(NO)、血浆内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),von Willebrand因子(vWF)的表达水平。结果:黄连解毒汤组OGTT较模型组改善,体重,TC,TG,ET值均低于模型组(P<0.05),HDL-C和NO值高于模型组(P<0.05);FBG,FINS,AngⅡ,vWF值均显著低于模型组(P<0.01)。与阿司匹林组相比,黄连解毒汤组FBG值显著降低(P<0.05),TG,HDL-C,NO,AngⅡ,vWF的改善情况优于阿司匹林组,但无显著性差异(P>0.05)。结论:黄连解毒汤对2型糖尿病早期出现的血管内皮损伤有良好的保护作用,机制与其降糖、降脂、抗炎、改善胰岛素抵抗及内皮依赖性的舒张血管等作用有关。

小檗碱对高脂血症伴胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢的影响

目的 :观察小檗碱对高脂血症伴胰岛素抵抗 (IR)大鼠糖脂代谢的影响 ,探讨其调脂和改善IR的机理。方法 :通过喂养高脂饲料和小剂量静注链脲佐菌素 (STZ)建立高脂血症伴IR大鼠模型 ,测定各不同处理组血糖、脂、胰岛素水平和脂代谢关键酶活性。结果 :小檗碱组大鼠总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、载脂蛋白B(ApoB)、低密度脂蛋白 胆固醇 (LDL C)、游离脂肪酸 (FFA)均比模型组明显降低 (Ρ <0 .0 5或Ρ <0 .0 1) ,而高密度脂蛋白 胆固醇 (HDL C)、载脂蛋白A(ApoAⅠ )、胰岛素敏感指数 (ISI)显著升高 ;血脂蛋白脂酶 (LPL)活性显著升高 (Ρ <0 .0 5或Ρ <0 .0 1)。结论 :小檗碱可能通过降低血FFA而改善IR ,其调脂功效可能与升高LPL活性有关。

小檗碱对高果糖饲养诱导大鼠胰岛素抵抗和肝脏TNF-α表达的影响

目的研究小檗碱对高果糖饲养诱导胰岛素抵抗大鼠的作用。方法高果糖饲料喂养SD大鼠6wk后,分为3组,模型组,小檗碱组(187.5mg.kg-1.d-1灌服)、二甲双胍组(184mg.kg-1.d-1灌服)作为对照,继续高果糖饮食。实验同时设立正常对照组,普通饮食喂养。4wk后处死大鼠;测定血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数及血脂的变化,用RT-PCR方法观察肝脏TNF-αmRNA的表达。结果模型组胰岛素、胰岛素抵抗指数、游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)及甘油三酯(triglycerides,TG)水平均明显升高;肝脏TNF-αmRNA的表达与正常对照组比较明显升高。小檗碱降低了胰岛素抵抗大鼠的血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数、TG、FFA及TNF-αmRNA的表达。二甲双胍降低了大鼠的血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数及TG。结论小檗碱可以改善胰岛素抵抗,其机制可能包括抑制肝脏TNF-αmR-NA的表达与改善脂代谢紊乱。

小檗碱对高果糖饲养诱导胰岛素抵抗大鼠肝组织HNF-4α表达的影响

目的:探讨小檗碱对高果糖饲养诱导胰岛素抵抗大鼠肝细胞核因子(hepatocyte nuclearfactor-4α,HNF-4α)表达的影响以及其改善胰岛素抵抗的分子机制.方法:高果糖饲料喂养SD大鼠6wk,建立胰岛素抵抗模型;大鼠分为4组:正常对照组(普通饮食)、普通饮食+小檗碱处理组、高果糖饮食组及高果糖饮食+小檗碱组;小檗碱按187.5mg/(kg·d)灌服4wk;测定血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数及甘油三酯的变化;用RT-PCR法及免疫印迹法观察肝脏HNF-4α基因及蛋白的表达.结果:高果糖饮食组胰岛素、胰岛素抵抗指数HOMA及甘油三酯水平较正常对照组均明显升高(均P<0.01),而高果糖饮食+小檗碱组与高果糖饮食组比较上述指标明显下降(51.62±5.68vs64.91±7.87,P<0.01;12.40±1.76vs16.06±3.32,P<0.01;11.16±1.58vs14.46±2.99,P<0.05),小檗碱可促使肝脏表达下降的HNF-4α恢复.结论:小檗碱可改善胰岛素抵抗,其机制可能与促进HNF-4α的表达有关.

小檗碱对HepG2细胞葡萄糖激酶活性及其mRNA表达的影响

目的探讨小檗碱对HepG2细胞葡萄糖激酶活性和基因表达的影响。方法体外培养HepG2细胞,使用不同浓度的小檗碱(0,5,15,45,100μmol.L-1)以及作为阳性对照的生物素[1,2]组作用24h后,检测细胞增殖能力、葡萄糖激酶活性及其mRNA的表达、葡萄糖激酶下级产物糖原含量。结果小檗碱浓度低于5μmol.L-1时对HepG2细胞增殖无明显影响,在15μmol.L-1浓度以上对细胞增殖的抑制作用随浓度增加而加强;葡萄糖激酶的活性随着小檗碱的浓度增加而提高,而且HepG2细胞糖原含量以及葡萄糖激酶mRNA的表达在一定范围内也与小檗碱的浓度呈正相关。结论小檗碱能够提高HepG2细胞葡萄糖激酶的活性和葡萄糖激酶mRNA的表达。

黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠细胞因子IL-4和IL-10水平的影响

目的:探讨黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠血清抗炎细胞因子水平的影响,分析其改善胰岛素抵抗的作用机理。方法:观察黄连解毒汤对实验性2型糖尿病大鼠治疗前后血糖(FBG)、胰岛素(FINS)、血清白介素-4(IL-4)和白介素-10(IL-10)等指标的影响。结果:给予黄连解毒汤治疗的实验性2型糖尿病大鼠,其血清FBG水平显著低于模型组(P<0.01),FINS和模型组比较无显著差异;IL-4和IL-10水平明显高于模型组(均P<0.01)。结论:黄连解毒汤及其主要有效成分小檗碱具有提高2型糖尿病大鼠血清抗炎细胞因子IL-4和IL-10水平的作用,改善其慢性炎性反应和胰岛素抵抗。

胆碱酯酶抑制剂对化学性糖尿病影响的实验研究

目的探讨胆碱酯酶抑制剂对化学性糖尿病的影响。方法用胆碱酯酶抑制剂溴化斯的明对四氧嘧啶所致糖尿病家兔进行治疗观察。结果仅给予溴化斯的明治疗后,血清胆碱酯酶活性、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(GHB)显著下降,而血清胰岛素(insulin)水平明显升高。结论血清胆碱酯酶抑制剂可以促进胰岛素的分泌,降低空腹血糖和糖化血红蛋白。

盐酸小檗碱脂质体的制备方法及质量研究

目的 :制备盐酸小檗碱脂质体 ,并进行质量研究。方法 :通过测定包封率 ,优选盐酸小檗碱脂质体制备工艺 ,观测脂质体粒径和形态特征 ,同时考察其稳定性。结果 :盐酸小檗碱和聚山梨酯 80比例为 1∶0 .4、药脂比为 1∶2 0 ,所得脂质体呈球形或椭圆形 ,粒径范围为 2 .4～ 4 .6 μm ,包封率为39.77% ,RSD为 2 .16 % (n =3)。室温放置 2月 ,脂质体形态特征无明显变化。结论 :本方法制备盐酸小檗碱脂质体稳定可靠。

小檗碱对肝细胞核因子4α表达及葡萄糖激酶活性的影响

目的:观察小檗碱对小鼠原代肝细胞核因子4α(HNF4α)表达及葡萄糖代谢关键酶葡萄糖激酶(GK)活性的影响,探讨小檗碱治疗2型糖尿病的分子机制。方法:采用改良两步灌流法培养小鼠原代肝细胞,用不同浓度的小檗碱(0,1,3,10,30,100μmol.L-1)和1 mmol.L-1二甲双胍干预24 h后,采用RT-PCR方法检测HNF4αmRNA表达;采用Western-blot方法检测HNF4α蛋白的表达,同时检测GK的活性。结果:与阴性对照组相比,小檗碱在10,30,100μmol.L-1时能够明显促进HNF4αmRNA及蛋白的表达,二者同时在30μmol.L-1时达到最大值(HNF4αmRNA相对吸光度为0.48±0.20,蛋白相对吸光度为3.47±0.86,P<0.01);在10,30μmol.L-1时明显上调GK活性,同时在30μmol.L-1时达到最大值(0.080±0.073,P<0.05);而二甲双胍对HNF4αmRNA、蛋白的表达及对GK活性的影响则与阴性对照组无明显差异。结论:小檗碱改善糖代谢的作用可能与其调节肝细胞核因子4α的表达进而调节GK活性有关。

小檗碱对肝细胞核因子6 mRNA表达及葡萄糖激酶活性的影响

目的:观察小檗碱对小鼠原代肝细胞核因子6(HNF6)mRNA表达及葡萄糖代谢关键酶葡萄糖激酶(GK)活性的影响,探讨小檗碱治疗2型糖尿病的分子机制.方法:采用改良两步灌流法培养原代肝细胞,用不同浓度的小檗碱(0,1,3,10,30,100μmol/L)和1 mmol/L二甲双胍干预24 h后,采用MTT比色法观察小檗碱对原代肝细胞增殖的影响:采用RT-PCR方法检测HNF6 mRNA表达,同时检测GK的活性.结果:与阴性对照组相比,1,3,10,30μmol/L的小檗碱均能促进HNF6 mRNA的表达(1.00±0.21,1.11±0.06,1.37±0.10,1.40±0.09 vs 0.68±0.02;P<0.01);当小檗碱为10,30μmol/L时,均可上调GK的活性(0.069±0.082,0.080±0.073 vs 0.009±0.007;P<0.05);二者均在30μmol/L时达到最大值.小檗碱为100μmol/L时HNF6 mRNA的表达、GK的活性与阴性对照组无差异,可能与其抑制肝细胞生长有关.结论:小檗碱改善糖代谢的作用可能与其调节HNF6的表达进而调节GK活性有关.

转基因小鼠胰岛β细胞株胰岛素样生长因子1受体和胰岛素受体表达与小檗碱的干预效应

目的:观察小檗碱对转基因小鼠胰岛β细胞株胰岛素受体和胰岛素样生长因子1受体mRNA表达的影响。方法:实验于2005-09/2006-10在华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所完成。①实验材料:培养NIT-1细胞,在低糖(5.5mmol/L)和高糖(11.1mmol/L)环境下,分别加入0,1,3,10,30μmol/L的小檗碱和1μmol/L的格列苯脲,0μmol/L小檗碱组为空白对照组。②实验评估:培养24h后,采用四甲基偶氮唑盐法检测小檗碱NIT-1细胞增殖抑制作用;逆转录-聚合酶链反应测定NIT-1细胞胰岛素受体和胰岛素样生长因子1受体mRNA表达。结果:①四甲基偶氮唑盐法检测发现,不同浓度小檗碱(1～30μmol/L)与NIT-1细胞作用24h后,小檗碱组吸光度值比空白对照组低,随着小檗碱浓度的增加,吸光度值逐渐从0.356±0.061降低至0.162±0.014,而且在各组之间有显著性差异。②在低糖及高糖环境下,与空白对照组相比,小檗碱能促进NIT-1细胞胰岛素受体mRNA的表达(低糖环境:0.27±0.04,0.49±0.02;高糖环境:0.22±0.04,0.42±0.03;P<0.01),但仍低于格列苯脲组(低糖环境:0.75±0.22;高糖环境:0.78±0.01;P<0.01);而且随着小檗碱浓度的升高,NIT-1细胞胰岛素受体mRNA表达的增加更为明显,分别从0.49±0.02增高至0.68±0.44及从0.42±0.03增高至0.71±0.01。与空白对照组相比,小檗碱组胰岛素样生长因子1受体mRNA的表达无明显改变。结论:小檗碱促进胰岛素分泌,其作用机制可能与促进胰岛β细胞胰岛素受体mRNA表达有关。

从经验到证据的临床针灸医学--现代针灸疗效研究方法探讨(三)

记录由全美中医药学会(ATCMA)、美国中医校友联合会(TCMAAA)联合组织的题为"从经验到证据的临床针灸医学"的学术讨论会上各嘉宾的发言。讨论会起因于王伊明的博文《影响针刺疗效的因素》,各嘉宾探讨了现代针灸疗效研究方法。王德辉认为在针灸临床研究中,应注意选择优势病种、针灸处方正确、针刺手法得当、治疗时间适当、对照选择恰当、多个中心参与、主流机构参与、理想真实并存、再现临床实际、发高质量论文,更好地证明针灸的疗效。冷三华认为针刺信号引起的疗效起主导作用,受针刺产生的信号、针刺信号的传递和中枢功能区的状态3个方面的影响;针刺过程中伴随发生的非针刺信号引起的疗效包括自愈效应、安慰效应和其它效应。巩昌镇分析了针灸临床试验研究证据这一重要动态因素的变化,针灸的临床试验研究、系统评估研究和病例研究报告都出现了持续高速增长,疼痛症状的针灸临床研究占所有研究的38%,中国和美国是针灸研究的领导者,韩国庆熙大学、中国医学科学院、美国哈佛大学发表针灸研究文章数为前3名,针灸研究文章的质量不断提高,针灸临床试验数据带来对针灸临床有指导意义的模型和理论,并希望将来能按照数据、信息、知识、技术发展的基本规律更加丰富临床针灸医学。

从经验到证据的临床针灸医学——现代针灸疗效研究方法探讨(一)

记录由全美中医药学会(ATCMA)、美国中医校友联合会(TCMAAA)联合组织的题为“从经验到证据的临床针灸医学”的学术讨论会上各嘉宾的发言。讨论会起因于王伊明的博文《影响针刺疗效的因素》,各嘉宾探讨了现代针灸疗效研究方法。该部分先由王伊明介绍文章《影响针刺疗效的因素》,分析了影响针刺疗效的“硬因素”与“软因素”,对针灸随机对照试验(RCT)和针刺效果的评估标准提出疑问,提出关于现代针刺研究的几点想法。刘保延强调“针刺之要在于神”,值得高度关注。朱兵认为针灸临床研究的有些结论意义不大,针刺手法不要过于艺术化,针灸效应的机理研究不要过度“脑”化。梁繁荣认为影响针灸临床疗效的十大因素,包括理论指导、辨证诊断、精神心理、选穴处方、操作手法、针灸器具、治疗时机、个体差异、地理环境、季节气候等因素。金观源认为针灸的干预刺激十分微弱,其他信息易干扰针灸治疗信息的输入,针灸的所有效应都是通过促进或强化患者的自愈机制实现,要注意鉴别。李永明详细分析了针灸愈合作用假说、泛穴现象假说、“硬针灸”和“软针灸”的假说。

从经验到证据的临床针灸医学——现代针灸疗效研究方法探讨(二)

记录由全美中医药学会(ATCMA)、美国中医校友联合会(TCMAAA)联合组织的题为“从经验到证据的临床针灸医学”的学术讨论会上各嘉宾的发言。讨论会起因于王伊明的博文《影响针刺疗效的因素》,各嘉宾探讨了现代针灸疗效研究方法。潘卫星认为针灸要与现代科学接轨,实现理论转轨,临床领域接受正确的疗效判定方法,将基础研究成果转化为临床效应。韩松平认为应不断深化对针刺疗法原理的研究和理解,才能不断提高疗效。田海河阐述了针灸面临的挑战和针灸科研设计存在的问题。樊蓥认为应注重“心神”和“形神”在针刺中的应用,分析了针灸师应注重的问题及如何取得“神针”之效果。何崇分析了针灸操作的各个要素,基本过程有4个环节:发现病变之处;确定其病理形式与特点;施以相应的针灸形式;验证机体反应,以决定治疗的持续时间。其中常见的病理形式有5种:神不使、阴阳不和、气血壅盛、经脉阻结、经气不畅。任何影响这四大环节的因素,都应该是针灸疗效的影响因素。