HPLC法测定(S)-3-(3,6-二氧-2-哌嗪)丙酸、焦谷氨酸和环-(甘氨酰谷氨酰胺)含量的方法

目的:建立测定复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中有关物质含量的高效液相色谱法。方法:采用InertSustain AQ-C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱,以0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(pH值=2.1)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为205 nm,柱温为18℃,进样量为50μL。结果:在选定的色谱条件下,(S)-3-(3,6-二氧-2-哌嗪)丙酸、环-(甘氨酰谷氨酰胺)峰和焦谷氨酸峰与各自相邻色谱峰可以分离;(S)-3-(3,6-二氧-2-哌嗪)丙酸、环-(甘氨酰谷氨酰胺)和焦谷氨酸的进样量与其峰面积呈线性关系良好(r>0.999);精密度试验中3种杂质含量的RSD均小于1.0%;(S)-3-(3,6-二氧-2-哌嗪)丙酸、环-(甘氨酰谷氨酰胺)和焦谷氨酸的定量限分别为0.85ng、0.29ng和0.28ng,检测限分别为0.25ng、0.095ng和0.05ng;回收率均在98%~102%。样品通过过柱洗脱的方式进行收集,通过洗脱曲线验证,确定其可以完全有效的洗脱杂质。结论:该方法专属性强,结果准确,灵敏度高,可用于复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中有关物质的测定,适用于产品质量控制。

柱前衍生化液相法测定盐酸法舒地尔注射液中高哌嗪含量

建立用Waters AccQ-Tag柱前衍生法,高效液相法测定盐酸法舒地尔注射液中高哌嗪含量的方法。方法:采用Venusil MP C18(4.6mm×250mm, 5μm)为色谱柱,0.02 mol/L三水合乙酸钠(pH=5.0):乙腈梯度洗脱,进样量10 μL,流速为1.0 mL/min,检测波长为248 nm,柱温30℃。结果:高哌嗪与其它物质分离度良好,在0.1224~2.449 μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9982,平均回收率均在95~104%之间,检测限达到11 ng/mL。结论:柱前衍生化HPLC方法操作简单,灵敏度高,能够快速准确测定盐酸法舒地尔注射液中高哌嗪的含量。