艳山姜中槲皮素含量的高效液相色谱法测定

目的建立反相高效液相色谱法测定艳山姜药材中槲皮素的含量。方法采用C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇-0.4%磷酸(35∶65)为流动相,流速为1 ml.min-1;检测波长为371 nm;柱温为25℃。结果槲皮素浓度在10.3～103μg.ml-1之间线性关系良好,r=0.999 8,平均回收率为98.4%(RSD=0.77%)。结论此法简便,准确、重复性好,可用于艳山姜药材的质量控制。

HPLC测定艳山姜中的去甲氧基醉椒素

目的采用HPLC测定艳山姜中的去甲氧基醉椒素。方法色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水-乙腈(80∶20),流速为1 mL.min-1,检测波长345 nm,柱温25℃。结果去甲氧基醉椒素0.408～2.040μg与峰面积的线性关系良好(r=0.9993);平均回收率为99.15%(RSD=1.20%)。结论所用方法简便、准确,重复性好,可作为艳山姜药材的质量控制方法。

松油烯-4-醇通过调控KLF4/NF-κB信号通路抑制高糖诱导的VSMCs增殖作用研究

研究松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖(HG)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的抑制作用,以及对Krüppel样因子4(Krüpple-like factor 4,KLF4)表达和NF-κB信号通路的影响。预先给予T4O预孵育2 h后,加入HG共孵育48 h诱导VSMCs损伤模型。MTT法检测VSMCs增殖;流式细胞仪检测细胞周期;划痕实验检测细胞迁移率;ELISA法检测VSMCs上清液中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;Western blot检测增殖细胞核抗原PCNA、周期相关蛋白Cyclin D1,以及KLF4和炎症相关蛋白NF-κB p-p65、IL-1β和IL-18的表达水平。siRNA-KLF4转染实现KLF4在VSMCs的沉默表达,观察T4O对HG诱导VSMCs细胞周期及上述蛋白表达水平的影响。结果显示,与HG组比较,不同剂量的T4O干预给药可明显抑制HG诱导的VSMCs增殖,增加G1期细胞百分比、降低S期细胞百分比,抑制细胞迁移能力,下调HG诱导的PCNA和Cyclin D1蛋白表达水平;同时,下调KLF4蛋白表达和NF-κB p-p65/NF-κB p65、IL-1β和IL-18的表达水平,降低炎症因子IL-6和TNF-α的分泌与释放;沉默KLF4可实现KLF4的低表达,与si-NC+HG组比较,siKLF4+HG组可降低S期细胞百分比,增加G1期细胞百分比,下调PCNA、Cyclin D1、KLF4蛋白表达水平及抑制NF-κB信号通路的激活,沉默KLF4与T4O共处理后可进一步促进上述指标的变化。上述结果表明,T4O对HG诱导的VSMCs增殖具有抑制作用,其作用可能与下调KLF4的水平,抑制NF-κB信号的激活有关。