甲氧杀虫酯的药效、毒性及生物降解的研究——Ⅰ.甲氧杀虫酯的药效、降解和对酯酶的影响

甲氧杀虫酯是在研究三氯杀虫酯类似物的化学结构与生物活性关系中所发现的一种对蚊(淡色库蚊KT_(50)=3.22分,埃及伊蚊KT_(50)=1.77分)、家蝇(LD_(50)=0.31ug/只)药效较好的新品种。经试验,它对连续染毒20天的小白鼠血清的乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶活性无抑制作用。凝胶电泳法证明,其对小白鼠血清和肝组织(包括离体组织)酯酶活性亦无影响。离体鼠肝细胞降解试验表明,45分钟降解72.5%,90分钟可降解93%,这表明该化合物极易生物降解。

细胞色素P450酶系循环催化的新途径

细胞色素P45 0酶系的循环催化反应需要电子供体NADPH或NADH等辅助因子系统 ,因此它在实际应用中受到制约。用电极电解或锌粉作电子供体取代NADPH辅助因子可以获得与NADPH相似的底物转换率。此外 ,还讨论了P45 0的“定向进化”产生的突变体在无NADPH等辅助因子存在下 ,通过“过氧化物途径”使底物羟基化。

有机磷化合物的结构与迟发性神经毒性关系的研究

有机磷化合物（包括Ⅰ型和Ⅱ型）对人和其它脊椎动物诱导迟发性神经毒性，日益引起人们的关切。此类化合物种类繁多，结构各异。那么，哪些可能产生迟发性神经毒性？本文就此问题论述了该类化合物的结构与迟发性神经毒性的关系。

苍白杆菌B2对甲基对硫磷降解途径研究

采用薄层层析、紫外吸收光谱以及气谱-质谱联用的方法分析了苍白杆菌Ochrobacterumsp.B2降解甲基对硫磷的中间产物。结果表明,B2水解甲基对硫磷产生对硝基苯酚(PNP),PNP通过产生4-硝基邻苯二酚(4-nitrocatechol,4-NC)和1,2,4-苯三酚(1,2,4-benzenetriol)的途径进一步代谢。苍白杆菌B2可以以PNP和4-NC为碳源生长,在菌的初始OD600值为0.02时,B2可在48h内将50mg/L的PNP完全降解,在60h内,将30mg/L的4-NC完全降解。

吡虫啉在萝卜及土壤中的残留动态

用高效液相色谱法(HPLC)测定了吡虫啉在萝卜、萝卜叶片及其栽培土壤中的残留动态和最终残留量。结果表明:吡虫啉在萝卜、萝卜叶片和萝卜田土壤中的半衰期分别为5.65d(萝卜)、3.70d(萝卜叶片)和10.88d(土壤)。所测得的吡虫啉在萝卜中的最终残留量的最大值为0.075mg/kg。此值大大低于FAO规定的吡虫啉在十字花科蔬菜作物上的最低限量标准。

棉铃虫6龄幼虫中肠与脂肪体微粒体P450酶系的比较

报道了棉铃虫 6龄幼虫中肠和脂肪体微粒体P45 0酶系的组成与加单氧酶活性。与脂肪体微粒体相比 ,中肠微粒体具有更高的细胞色素P45 0、细胞色素b5和NADPH -细胞色素P45 0还原酶含量 ,表现出较高的艾氏剂环氧化酶和对 -硝基苯甲醚O -脱甲基酶活性。SDS PAGE电泳显示 ,中肠与脂肪体微粒体介于P45 0分子量范围内 (4 5～ 6 0kDa)的蛋白图谱有所不同 ,反映出中肠和脂肪体微粒体蛋白组成存在差异。通过对 -硝基苯甲醚O -脱甲基酶的动力学分析发现脂肪体微粒体的对 -硝基苯甲醚O -脱甲基酶对底物有更强的亲和性 ,表明不同组织来源的P45 0同功酶存在质的不同。

杀虫药剂的神经毒理学研究进展

大多数杀虫药剂都具有较强的神经毒性 ,它们对神经系统的作用靶标不同。有机磷类杀虫剂不仅抑制乙酰胆碱酯酶活性和乙酰胆碱受体功能 ,影响乙酰胆碱的释放 ,而且还具有非胆碱能毒性 ,有些有机磷杀虫剂还能引发迟发性神经毒性。新烟碱类杀虫剂作为烟碱型乙酰胆碱受体 (nAChR)的激动剂 ,作用于该类受体的α亚基 ;它对昆虫的毒性比对哺乳动物的毒性大得多 ,乃是因为它对昆虫和哺乳动物nAChR的作用位点不同。拟除虫菊酯类杀虫剂主要作用于神经细胞钠通道 ,引起持续开放 ,导致传导阻滞 ;该类杀虫剂也可抑制钙通道。另外 ,这类杀虫剂还干扰谷氨酸递质和多巴胺神经元递质的释放。拟除虫菊酯类杀虫剂对昆虫的选择毒性很可能是因为昆虫神经元的钠通道结构与哺乳动物的不同。阿维菌素类杀虫剂主要作用于γ 氨基丁酸 (GABA)受体 ,它能促进GABA的释放 ,增强GABA与GABA受体的结合 ,使氯离子内流增加 ,导致突触后膜超级化。由于这类杀虫剂难以穿透脊椎动物的血脑屏障而与中枢神经系统的GABA受体结合 ,故该类杀虫剂对脊椎动物的毒性远低于对昆虫的毒性。多杀菌素类杀虫剂可与中枢神经系统的nAChR作用 ,引起ACh长时间释放 ,此外 ,这类杀虫剂还可作用于昆虫的GABA受体 ,改变GABA门控氯通道的功能。

梨果及土壤中亚胺唑及其代谢物的气相色谱分析

介绍了杀菌剂亚胺唑及其代谢物ＩＢＣ－０１在梨果实及土壤样品内的提取、净化方法以及气相色谱的分析测定方法。保留时间：亚胺唑为３８．３６ｍｉｎ，ＩＢＣ－０１为１７．０１ｍｉｎ。变异系数：亚胺唑为０．４５％～１５．５３％，ＩＢＣ－０１为３．０３％～９．５２％。回收率：亚胺唑为８８．２８％～９８．５％，ＩＢＣ－０１为８４．９８％～９８．１３％。

昆虫细胞色素P450研究的一些新进展

报道了有关细胞色素P45 0研究的一些新发现。果蝇和冈比亚按蚊基因组测序的完成 ,使人类对昆虫P45 0的多样性有一完整的概念 ,已查明果蝇和冈比亚按蚊基因组中分别含有 90种和 1 1 1种P45 0基因。P45 0介导的果蝇对DDT的抗性被证明是Cyp6g1基因超量表达的结果。昆虫可以窃听植物分子信号 (水杨酸、茉莉酮酸 ) ,通过P45 0的诱导机制增强自身对植物防御物质的反防御能力。从分子水平上鉴定了 2个参与蜕皮素合成的线粒体P45 0基因。细胞色素P45 0在昆虫信息素降解中的作用得到鉴定。

昆虫细胞色素P450基因的表达与调控及P450介导抗性的分子机制

本文综述了在杀虫剂抗性中起重要作用的 P4 50酶系研究的最新进展。内容包括 :细胞色素 P4 50酶系基因及其基因的表达与调控 ,P4 50介导抗性的分子基础。细胞色素 P4 50表达表现出发育期、组织、品系特异性及可诱导性。 P4 50表达的调控机制复杂 ,可能受顺式调控元件 (如 CYP6 B1)或反式作用因子 (如CYP6 A1)或顺式、反式因子的共同调控 (如 CYP6 D1)。调控可能涉及转录增强的转录机制或 m RNA稳定性增加的转录后机制。 P4 50的超量表达是 P4 50酶系介导抗性的主要机制 ,P4

四种去垢剂对棉铃虫微粒体细胞色素P450的增溶与变性作用

为分离纯化棉铃虫的细胞色素P4 5 0 ,比较了 4种去垢剂对棉铃虫微粒体P4 5 0的增溶与变性作用。结果表明 :CHAPS( 3_[( 3_cholamidopropyl)_dimethylammonio]_1_propanesulfonate)能有效地增溶中肠和脂肪体微粒体P4 5 0 ,而LubrolPX(聚氧乙烯十二烷基乙醇醚 )、Emulgen 91 1 (聚氧乙烯壬基苯酚醚 )和胆酸钠的增溶效果较差 ;CHAPS对中肠和脂肪体微粒体P4 5 0的最适增溶浓度分别为 0 5 %和 0 5 %～ 0 8% ;终浓度为 0 5 %时 ,4种去垢剂对中肠和脂肪体微粒体P4 5

棉铃虫中肠微粒体P450的分离纯化

为深入研究棉铃虫Helicoverpaarmigera细胞色素P450的结构与功能,需要分离不同型的P450蛋白。作者建立了适用于棉铃虫中肠微粒体P450的纯化方法,包括聚乙二醇8000(PEG8000)沉淀、高效疏水作用色谱(HPHIC)和高效离子交换色谱(HPIEC)等连续分离步骤。SDS_PAGE(银染)显示,棉铃虫中肠微粒体经以上步骤分离纯化后,在含P450的馏分中检测出分子量分别为58kD、47kD、56kD和45kD的4条蛋白带。P450的回收率为14.3%,比含量提高了39倍。

溴氰菊酯对不同品系家蝇脑突触体膜蛋白磷酸化及ATP酶活性的影响

以敏感品系家蝇和溴氰菊酯抗性品系家蝇（ＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａＬ．）为材料，研究和比较了神经毒剂溴氰菊酯对其脑突触体蛋白磷酸化作用的影响。结果表明，浓度为１０－５ｍｏｌ／Ｌ溴氰菊酯抑制了敏感品系家蝇脑突触体蛋白磷酸化作用，而对抗性品系家蝇脑突触体蛋白磷酸化作用无明显影响。若反应体系中加入２５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ的ｃＡＭＰ显著激活了敏感品系家蝇脑突触体蛋白磷酸化水平，但是当０６ｍｍｏｌ／ＬＣａ２＋或０６ｍｍｏｌ／ＬＣａ２＋加１０－５ｍｏｌ／Ｌ钙调蛋白时明显增强了抗性品系家蝇脑突触体蛋白磷酸化水平，甚至超过了其对敏感品系的作用水平。此外，还发现不同浓度的溴氰菊酯可抑制突触膜上的Ｎａ／ＫＡＴＰ酶和ＣａＡＴＰ酶活力，浓度越高抑制作用也越大。

棉铃虫幼虫加单氧酶活性的组织分布

棉铃虫 ( H elicoverpa armigera) 6龄幼虫不同组织的加单氧酶活性的测定结果显示 ,对 -硝基苯甲醚 O-脱甲基酶主要分布于外来物质的入口部位 ,以中肠和脂肪体的活性较高 ,在前肠、后肠和马氏管等组织中有相对较低的活性 ,而在体壁和精巢中未检测到 O-脱甲基作用。体壁表现一定的艾氏剂环氧化作用 ,但其活性不及中肠的 1 0 %,内源性抑制剂被证明并非体壁低加单氧酶活性的主要原因。不同组织生物量的差异及其动态变化 。

聚乙二醇8000对棉铃虫微粒体蛋白沉淀作用的研究

为建立棉铃虫Helicoverpa armigera微粒体P450的分离纯化方案,比较了不同浓度下聚乙二醇8000(PEG8000)对棉铃虫幼虫中肠和脂肪体微粒体蛋白的沉淀作用.结果表明,终浓度为8.0×104 mg/L的PEG8000可以使中肠和脂肪体微粒体蛋白的78%沉淀下来,其中包含的细胞色素P450分别占中肠和脂肪体P450总量的28%和34%.SDS-PAGE显示,中肠微粒体经8.0×104 mg/L的PEG8000沉淀后,被沉淀蛋白的分子质量主要集中在14.1 ～ 40 kD和66 ～97 kD范围内.

有机磷酸酯诱导迟发性神经毒性及其对神经毒性酯酶（NTE）活性影响的动态研究

以成年产卵来航母鸡为试验动物，研究了三甲基苯基磷酸酯（Ｔｒｉ－ｏ－ＣｒｅｓｙｌＰｈｏｓ－ｐｈａｔｅ，ＴＯＣＰ）诱导的迟发性神经毒性．试验发现，母鸡口服ＴＯＣＰ（７５０ｍｇ／ｋｇ）后，经过大约８－１０ｄ的潜伏期开始出现中毒症状，其表现为以步态失调为主要特征的运动障碍呈进行性加重，至第２１ｄ开始便发展为瘫痪，对鸡脑神经病损靶标酯酶（ＮｅｕｒｏｐａｔｈｙＴａｒｇｅｔＥｎｚｙｍｅ，ＮＴＥ）活性的测定表明，有机械诱导的迟发性神经毒性（Ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ＩｎｄｕｃｅｄＤｅｌａｙｅｄＰｏｌｙｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ，ＯＰＩＤＰ）与ＮＴＥ活性抑制之间的关系不平行，其毒性症状的轻重与ＮＴＥ活性被抑制的强弱也不呈正相关，很可能，在给药后２４ｈ，体内ＯＰＩＤＰ已被触发，此外，实验观察到给予ＴＯＣＰ后被试鸡的体重明显下降。