基于ITS2序列鉴定中药材金沸草、旋覆花及其近缘混伪品

目的:应用ITS2序列鉴定中药材金沸草、旋覆花及其近缘种混伪品,以确保药材质量,保障临床安全用药。方法:通过对金沸草、旋覆花等药材的3个基原物种条叶旋覆花、旋覆花和欧亚旋覆花及其同属近缘物种进行DNA提取、PCR扩增ITS2序列并双向测序,用CodonCode Aligner对测序峰图进行拼接后,用MEGA5.0软件进行相关数据分析,并构建NJ系统聚类树以直观反映鉴定结果。结果:各基原物种ITS2序列变异位点稳定,其种内平均K2P距离均远小于各自药材以及同属近缘混伪品的种间平均K2P距离;基于ITS2序列的NJ树可以将金沸草和旋覆花药材与同属其它近缘混伪品明显区分开。结论:ITS2序列可准确鉴别中药材金沸草和旋覆花及其同属近缘混伪品。

远志药材及其混伪品的DNA条形码鉴定

目的:对中药材远志及其混伪品进行分子鉴定,保障药材质量及用药安全。方法:对46份样品进行DNA提取,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其psbA-trnH序列并双向测序,应用CodonCode Aligner V3.7.1对测序峰图校对拼接,去除低质量区和引物区,得到psbA-trnH序列,用MEGA 6.0对序列进行比对分析,基于K2P遗传距离构建系统聚类树。结果:通过相似性搜索法能准确鉴别远志及其混伪品,远志两个基原的种内最大K2P距离分别为0.004和0,均小于其与混伪品的种间最小K2P遗传距离(0.010和0.005),基于psbA-trnH序列的系统发育树可将远志药材及其混伪品明显区分开。结论:psbA-trnH序列能有效鉴别远志药材及其混伪品,为中药材的质量控制提供新方法。

基于ITS2序列鉴定南北葶苈子药材及其混伪品

目的:利用ITS2序列对多基原药材葶苈子及其混伪品进行分子鉴定,以保证药材质量及临床疗效。方法:提取46份葶苈子药材及其混伪品的DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序列并双向测序,应用CodonCode Aligner v 4.25对测序峰图进行校对拼接,并去除低质量序列及引物区,得到ITS2序列。用MEGA 6.0软件计算物种种内和种间Kimura 2-parameter(K2P)遗传距离,分析变异位点并构建邻接(NJ)系统聚类树,综合应用相似性搜索法、最近距离法以及NJ系统发育树等进行鉴定分析。结果:葶苈子的基原植物播娘蒿和独行菜的种内最大K2P遗传距离分别为0.021和0.010,均小于其与混伪品之间的种间最小K2P遗传距离;NJ树结果显示播娘蒿和独行菜各自聚为一支,表现出良好的单系性,均可与混伪品明显区分开。结论:以上几种鉴定方法分析结果表明,ITS2序列能准确鉴别南北葶苈子药材与混伪品,为保障临床安全用药提供了新的技术手段。

基于ITS2条形码序列鉴定中药材佩兰及其混伪品

目的:对中药材佩兰及其混伪品进行ITS2条形码鉴定,以确保该药材的质量以及临床疗效。方法:提取佩兰的DNA,利用PCR技术扩增其ITS2序列,双向测序,所得序列经过CodonCodeAligner拼接后,用软件MEGA5进行相关数据分析,计算其种内、种间遗传距离,并构建系统发育树。结果:佩兰药材的ITS2序列长度为218 bp;佩兰种内最大K2P距离为0.009,与混伪品种间最小K2P距离为0.024。ITS2序列的NJ系统聚类树可明显区分佩兰药材及其混伪品,表现出良好的单系性。结论:ITS2条形码序列能够成功鉴定中药材佩兰与其混伪品,为保障临床安全用药提供了新的技术方法。

细小种子类毒性药材天仙子的DNA条形码鉴定

目的:毒性中药的误用滥用对人类健康造成了严重危害。本研究应用DNA条形码技术对细小种子类毒性药材天仙子及其混淆品进行鉴定,为中药材的安全使用提供保障。方法:使用试剂盒提取61份样本的总DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序列并双向测序,应用Codon Code Aligner v 4.25对测序峰图进行校对拼接,去除低质量序列及引物区获得ITS2序列。用MEGA 6.0软件计算物种种内和种间Kimura2-Parameter(K2P)遗传距离,分析变异位点并构建邻接(NJ)系统聚类树。结果:天仙子的基原植物莨菪种内最大K2P遗传距离为0.005,远小于其与混淆品之间的种间最小K2P遗传距离(0.360);NJ树结果显示莨菪独自聚为一支,表现出良好的单系性,与混淆品明显区分开。结论:ITS2序列能准确鉴别毒性药材天仙子及其混淆品,为保障临床用药的安全提供了有效的技术手段。

不同产地及不同药用部位大叶蛇葡萄中蛇葡萄素和杨梅苷的含量测定

目的:建立RP-HPLC同时测定不同产地、不同药用部位大叶蛇葡萄中蛇葡萄素和杨梅苷含量的方法。方法:大叶蛇葡萄样品先用石油醚超声脱脂,再用甲醇超声提取;分析柱选用Angilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液进行洗脱(20∶80,v/v),柱温25℃,流速1.0 mL·min-1,检测波长254nm。结果:蛇葡萄素在16.6~415.0μg·mL-1与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为98.25%,RSD=1.14%(n=6);杨梅苷在1.0~25.5μg·mL-1与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.999 5),平均回收率为98.19%,RSD=1.16%(n=6)。结论:蛇葡萄素和杨梅苷成分因产地和药用部位不同,含量差异较大。该方法操作简便、可靠,可为大叶蛇葡萄的质量控制和开发利用提供实验依据。

酸枣仁的DNA条形码鉴定研究

目的:采用psbA-trnH序列对药食同源药材酸枣仁进行鉴定。方法:提取酸枣仁药材及其混伪品的DNA,对psbA-trnH序列进行扩增和双向测序分析。将拼接后序列进行多序列比对分析,计算物种的种内、种间kimura 2-parameter(K2P)遗传距离,并构建系统聚类树。结果:酸枣仁药材的psbA-trnH序列比对后长度为336 bp;酸枣仁的种内最大K2P遗传距离为0.017,小于酸枣仁与混伪品的最小种间K2P遗传距离;基于psbA-trnH序列构建的NJ树表现出良好单系性,酸枣仁与混伪品明显区分开。结论:采用psbA-trnH序列可有效地鉴定药食同源药材酸枣仁。

高中语文学习生活化浅析

长久以来,我国语文教学都脱离实际,抓不住现实,使得学生回到过去,却不是现在,这样的现象就会对语文学习的实效性产生直接的影响。有人这样说过：＂没有对广阔社会生活的关心,就无法学习好语文。＂这不仅仅是一种概念,同时也是对语文教学脱离社会生活实际的一种反思。一、学生学习生活化《学会生存》一书指出：＂中学教育的趋势就是将技巧、理论与实践相互结合起来,能够将体力劳动与脑力劳动相互融合,学校就不能与生活相互脱节,

超高压技术在沙棘保鲜中的应用研究

目的:通过比较超高压处理前后沙棘鲜品中菌落总数及总黄酮、异鼠李素含量的变化,考察超高压技术在沙棘保鲜中应用的可行性。方法:经不同压力、时间和温度超高压处理后,测定沙棘样品的菌落总数、总黄酮、异鼠李素含量,确定最佳超高压条件。结果:沙棘的最佳超高压处理条件为400MPa、15min,室温。在此条件下处理后的沙棘样品,霉菌及菌落总数小于10CFU·g^(-1),总黄酮和异鼠李素含量显著增加;在室温保存6个月后,霉菌未检出,菌落总数未超过100CFU·g^(-1),总黄酮和异鼠李素含量未见明显变化。结论:超高压技术不但能明显延长沙棘在室温下的保鲜期,而且对总黄酮和异鼠李素的含量不会产生影响,是一种经济、可行、具有应用前景的保鲜技术。

基于ITS2和psbA-trnH序列对细小种子类药材车前子的鉴定比较

为考察ITS2序列和psbA-trnH序列对车前子药材及其常见混伪品的鉴定能力,该研究对车前子2个基原物种及7种混伪品共71份样本进行了研究。采用MEGA 5.1对获得的ITS2和psbA-trnH进行序列比对,计算种内和种间kimura2-parameter(K2P)遗传距离,并构建系统发育树。结果显示,车前和平车前的ITS2序列长度分别为199,200 bp;两者的ITS2序列种内最大K2P遗传距离均小于与混伪品的最小种间K2P遗传距离;基于ITS2序列构建的NJ树中,车前、平车前及其混伪品都表现出良好单系性,都能相互明显区分。表明ITS2序列能将车前子药材与混伪品进行很好的区分。车前和平车前的psbA-trnH序列长度均为340 bp,两者的psbA-trnH序列种内最大K2P遗传距离小于与混伪品的最小种间K2P遗传距离;基于psbA-trnH序列构建的NJ树结果显示,除大车前外,车前子药材与其余混伪品可以明显区分。因此,ITS2序列作为DNA条形码,车前子及其混伪品具有良好的鉴别能力,对保障车前子用药安全具有重要意义。

基于ITS2序列鉴别牡丹皮药材及其混伪品

该研究应用ITS2序列鉴别牡丹皮药材及其混伪品,以期探索牡丹皮药材准确鉴别的新方法。提取牡丹皮及其混伪品的DNA,目标片段经PCR扩增后测序,通过CodonCode Aligner V3.7.1对测序序列进行质量分析和拼接,基于MEGA5.0中的K2P模型计算牡丹皮与其混伪品的种内、种间遗传距离及构建系统聚类树。牡丹皮ITS2序列长度为227 bp,种内最大K2P距离为0,它与各混伪品的种间最小K2P距离为0.041,种间平均K2P距离为0.222。由NJ树可知:不同产地来源的牡丹皮药材个体聚为一支,自展支持率为99%,呈现出明显的单系性,能很好地与其混伪品芍药、川赤芍、白鲜皮、朱砂根区分开来。应用ITS2序列可以准确鉴别牡丹皮药材及其混伪品,该方法可以作为传统鉴别方法的有效补充。

ITS2序列鉴定多基原药材老鹳草

目的应用ITS2序列检测市场收集的多基原药材老鹳草,为规范药材市场管理提供分子依据。方法收集多基原药材老鹳草的基原物种牻牛儿苗、老鹳草和野老鹳草及其近缘混伪品,通过实验获取其ITS2序列,结合Gen Bank下载的序列共计28个物种82条序列,进行序列比对验证、最近距离法和系统邻接(NJ)树分析,建立基于ITS2序列的老鹳草药材DNA条形码鉴定技术方法;运用该方法检测市场随机收集的18份老鹳草药材样品,经序列比对结合以上方法建立的系统邻接(NJ)树确定其物种基原,以判定其市场真伪。结果 ITS2序列能将老鹳草药材的3个基原物种及其近缘混伪品很好地区分开;18份市场收集的老鹳草药材ITS2序列鉴定结果表明,其中16份为正品,2份为混伪品。结论该研究建立了基于ITS2序列的多基原药材老鹳草DNA条形码鉴定技术方法,实现了对市场随机收集的老鹳草药材物种基原的真伪判定,为多基原药材鉴定难题提供了参考方法。