缺氧诱导因子1α的多态性对食管鳞癌血管生成的影响

目的:血管生成是恶性肿瘤形成与发展中的重要事件,缺氧诱导因子1及其调节的VEGF的表达对食管鳞癌的血管生成和临床病理学特征具有重要的意义。该研究旨在研究缺氧诱导因子1α的常见多态性C1772T对食管鳞癌血管生成的影响,并初步探讨其机制。方法:用PCR-RFLP法研究95例食管鳞癌、104例正常对照的缺氧诱导因子1α的常见多态性C1772T的基因型(突变者经直接测序确认);免疫组化法测定不同基因型肿瘤组织中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、内皮源性生长因子VEGF、微血管密度MVD;比较不同基因型肿瘤的HIF鄄1α、VEGF、CD34(用以标记MVD)的表达差异。结果:在病例和对照中,只发现C/C和C/T两种基因型,食管鳞癌组C1772T的突变率为11.58%(11/95),正常对照组为10.58%(11/104),两组相比没有统计学差异;C/T组和C/C组肿瘤组织相比,HIF鄄1α表达无差异,VEGF的表达上调,MVD明显增加。结论:HIF鄄1α基因单核苷酸多态性C1772T与食管鳞癌的VEGF高表达和增强的血管生成有关。

内镜黏膜下剥离术治疗食管黏膜病变

目的:探讨内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)治疗食管黏膜病变的应用价值。方法:Lugol′s碘染色确定病灶边界,内镜黏膜下剥离术完整剥离病灶并送检。切除成功率、手术时间、手术即刻及短期并发症及其发生率等纳入统计。结果:32例共33处食管黏膜病变接受治疗,30例共31处病变成功完成ESD治疗,ESD成功率93.9%(31/33)。2例患者病灶局部黏膜下注射后抬举不良且难以剥离转行手术治疗。ESD手术时间(自开始标记至完整剥离病变)55～125 min(平均85 min)。所有患者治疗过程中均有少量出血;2例食管黏膜内肿瘤剥离过程中出现皮下气肿,保守治疗成功,ESD穿孔发生率6.3%(2/32)。1例食管黏膜内癌合并皮肌炎的患者术后发生创面感染,术后第3天出现发热胸痛,抗感染治疗后6天恢复正常。成功实施ESD手术的30例患者平均住院8天,人均住院费用1.45万元人民币,术后每月随访1次,随访期3个月,创面基本愈合,无1例病变残留和复发。3例术后创面超过食管2/3周的患者,术后1个月就发生食管狭窄,经过平均2次球囊扩张后狭窄缓解。结论:ESD是治疗食管黏膜病变的有效方法,出血和穿孔是主要的近期并发症,剥离创面超过食管2/3周的患者则容易发生食管狭窄。

纳米控释紫杉醇及其抗肿瘤作用研究

纳米控释紫杉醇不仅毒副反应小 ,而且可实现靶向控释给药 ,成为近年研究的热点 ,部分制剂已进入临床试验阶段。现对合成高分子聚合物纳米粒紫杉醇、固体脂质体纳米粒紫杉醇、天然大分子纳米粒紫杉醇等作一概述 。

磁性纳米粒阿霉素微球制备的初探

目的制备靶向抗癌药物即磁性纳米粒阿霉素白蛋白微球。方法以阿霉素(ADR)、人血清白蛋白(HSA)和纳米Fe3O4为材料,采用乳化高温固化法制备出磁性纳米粒阿霉素白蛋白微球,并利用Hrtem对其包裹结合性能进行了观察,同时采用HPLC法对其载药量进行测试。结果有效载药量为2.35%、表观载药量为3.55%。结论采用乳化高温固化法能制备出磁性纳米粒阿霉素白蛋白微球。

缺氧诱导因子1α、2α和血管内皮生长因子在食管鳞癌中的表达

背景:食管癌是一种常见的消化道恶性肿瘤,血管生成在食管鳞癌的发生、发展中具有重要作用。缺氧诱导因子(HIF)鄄1α、HIF鄄2α是机体对缺氧适应性调节中的重要调控蛋白,在大多数恶性肿瘤中有表达,可通过调节血管内皮生长因子(VEGF)的表达诱导肿瘤血管生成。目的:探讨食管鳞癌组织中HIF鄄1α、HIF鄄2α、VEGF的表达和微血管密度(MVD)之间的关系及其与肿瘤临床病理特征之间的关系。方法:应用免疫组化方法分别检测62例食管鳞癌、40例食管鳞状上皮异型增生和42例正常食管上皮组织中HIF鄄1α、HIF鄄2α、VEGF的表达和MVD值,分析其间的相关性及其与肿瘤临床病理特征之间的相关性。结果:食管鳞癌组织中HIF鄄1α、HIF鄄2α和VEGF的表达较异型增生和正常上皮组织显著增加(P<0.01),MVD值亦显著增高(P<0.01);且HIF鄄1α和VEGF的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和TNM分期呈正相关,HIF鄄1α和HIF鄄2α的表达与VEGF的表达和MVD值呈正相关。结论:HIF鄄1α、HIF鄄2α在食管鳞癌组织中存在一定程度的表达,其可能通过诱导VEGF的表达参与食管鳞癌的血管生成;HIF鄄1α、HIF鄄2α和VEGF的过度表达可能成为判断食管鳞癌生物学行为的重要指标。

环氧合酶-2、血管内皮生长因子和微血管密度与食管鳞癌病理特征的关系

目的:研究食管鳞癌中环氧合酶-2(COX鄄2)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD)与肿瘤病理特征之间的关系。方法:应用免疫组化的方法检测62例食管鳞癌组织、42例正常食管上皮中的COX鄄2、VEGF、CD31的表达,以CD31作为MVD指标,分析它们的表达与肿瘤病理特征之间的关系以及它们三者之间的相互关系。结果:食管鳞癌中COX鄄2和VEGF的表达较正常食管上皮明显增加;COX鄄2、VEGF的表达与MVD值正相关;三者水平与肿瘤TNM分期、浸润深度、淋巴结转移正相关。结论:COX鄄2、VEGF在食管鳞癌组织中高表达,与血管生成关系密切,可能参与了肿瘤生长、浸润和转移,可作为判断食管鳞癌生物学行为的重要指标。

磁性靶向紫杉醇微球制备的初步研究

目的:制备磁性靶向紫杉醇微球。方法:以紫杉醇和纳米Fe_3O_4为材料制备出磁性靶向紫杉醇微球,并利用高分辨透射电子显微镜(HRTEM)观察微球的形貌,同时采用紫外可见分光光度法测定微球的载药量和包封率。结果:磁性靶向紫杉醇微球的载药量为3．013%,包封率为35．26%。结论:通过实验研究制备了磁性紫杉醇微球,具有靶向定位功能,形成一种磁靶向给药系统。

纳米磁性阿霉素人血白蛋白微球的制备与表征

目的:制备用于肿瘤靶向治疗的纳米Fe3O4磁性粒子和磁性阿霉素靶向抗癌微球。方法:采用液相共沉淀法制备纳米Fe3O4颗粒,采用XRD、HRTEM等测试手段对该纳米粉进行表征;随后制备磁性阿霉素白蛋白微球,利用HRTEM对其包裹性能进行表征,同时采用荧光光谱法对其载药量进行测试。结果:纳米Fe3O4磁性粒子的平均粒径为16.3nm,分布宽度为5.8nm;磁性阿霉素微球的有效载药量为2.65%、表观载药量为3.01%。结论:该研究为肿瘤的药物化疗提供了一种新型的方法和材料,即磁性靶向微球定向治疗肿瘤的方法。

胃镜诊断645例胃癌分析

2004年1月～2006年1月本院胃镜室诊断并经胃黏膜活检确诊胃癌645例，结合文献资料，总结分析如下。

胃早癌切除后应随访终身

老李是我的老病人，2014年6月做了第一次胃早癌切除术。老李对医生言听计从，术后3、6、12个月复查胃镜和CT都没有发现异常。2016年5月，老李遵医嘱进行全方位复查。这次除了发现胃窦的疤痕组织以外，在胃窦胃体交界处发现一个凹陷，活检结果又是癌。这次，老李一家紧张不已。

慢性萎缩性胃炎常见问题答疑

1.反复上腹部饱胀不适,多次胃镜检查都提示慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生,这是啥毛病?反复上腹部饱胀不适,伴有嗳气,或者有轻微隐痛,也有患友诉有嘈杂烧心,但反复胃镜检查都只是提示慢性萎缩性胃炎,这其实也说明这样的症状更多只是功能性消化不良,而不是有严重的问题,医生会处方一些促进胃蠕动的药物如吗丁啉,也会用点中成药帮助调理。2.胃镜提示慢性萎缩性胃炎,危险吗?会长胃癌吗?

内镜黏膜剥离术治疗上消化道异位胰腺36例临床观察

目的探讨内镜黏膜剥离术(ESD)在上消化道异位胰腺病理诊断和临床治疗的价值。方法检索2012年1月1日-2014年11月30日在南京大学鼓楼临床医学院住院病例,筛选因异位胰腺住院行ESD的病例,归纳总结出资料完整的病例共36例,全部病例均经术后病理证实为异位胰腺,回顾分析操作过程、标本病理、随访治疗效果及并发症情况。结果 ESD治疗胃异位胰腺34例,十二指肠异位胰腺2例,平均操作时间66 min,平均切下标本大小21.0 mm×16.0 mm,标本完整切除率100.00%。随访并发症中,发热2例、上消化道出血1例、穿孔1例。结论 ESD是目前较先进的微创治疗手段,可完整切除病变组织,获取准确病理学诊断,是异位胰腺安全有效的治疗方法。

内镜下治疗上消化道黏膜下肿瘤426例的临床观察

目的观察经内镜治疗食管、胃和十二指肠的黏膜下肿瘤(SMT)的疗效和安全性以及术后病理组织学诊断情况。方法共入组426例上消化道SMT患者,其中位于食管346例,胃79例,十二指肠1例。经超声内镜诊断SMT位于黏膜肌层284例,黏膜下层87例,固有肌层55例。病变最大直径为0.4～6cm,平均(0.90±0.03)cm。426例SMT中333例行黏膜切除术(EMR),37例行黏膜剥离术(ESD),47例行黏膜挖除术(ESE),9例行全层切除术(EFR)。结果 EMR组中314例完整切除病变,完整切除率为94.3%。ESD组、EFR组均完整切除病灶,完整切除率100.0%。ESE组44例病灶完整切除,完整切除率93.6%(44/47),3例治疗失败转行外科手术。ESD组穿孔和出血各1例,发生率为2.7%;ESE组穿孔2例,出血2例,发生率为4.25%。EFR组为实现病灶完整切除,均将瘤体以及与之相连的固有肌层一并切除,实施主动穿孔,术后完全缝合胃壁缺损。术后病理组织学结果显示平滑肌瘤326例,间质瘤58例,异位胰腺、脂肪瘤、潴留囊肿、颗粒细胞瘤、血管机化、淋巴管瘤、血管瘤和神经鞘瘤共42例。患者术后均随访2年,无一例复发。结论经内镜治疗上消化道SMT安全、有效。

RNA干扰体外抑制人食管鳞癌细胞Eca-109缺氧诱导因子-1α的表达

目的:观察缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对人食管鳞癌细胞系Eca-109中 HIF-1α基因的沉默效应,筛选有效干扰靶点．方法:设计合成干扰缺氧诱导因子-1α RNA 寡核苷酸片段,经退火、连接等步骤克隆至线性化的PGCsi真核表达载体上,测序鉴定．应用LipofectamineTM2000将该质粒分别转染Eca-109细胞和293T细胞,其中Eca-109抗性细胞又经2-4 wk的G418筛选．荧光显微镜评估转染效率,荧光定量RT-PCR检测HIF-1α mRNA表达情况,western blot检测HIF-1α蛋白表达情况．结果:成功构建了3个靶点的重组质粒pGCsi- H1-shHIF,293T细胞平均转染效率为约85．4％, Eca-109细胞的平均转染效率约73．2％．荧光定量RT-PCR和Western blot显示瞬时转染这3种重组质粒的293T细胞和筛选2 wk的Eca-109 细胞HIF-1 α mRNA和蛋白表达均较对照组有不同程度的下降,其中2号和3号靶点的干扰效应尤为明显．在瞬时转染72 h后的293T 细胞中,其抑制率分别达到了78．5％、86．9％ (P=0．000,P=0．000 vs 72 h空白对照组),筛选2 wk的Eca-109细胞中,3号靶点对HIF-1α mRNA的抑制率也达到了69．7％(P=0．000 vs 2 wk空白对照组)．结论:重组质粒pGCsi-shHIF能有效抑制食管鳞癌细胞Eca-109中HIF-1α基因的表达,经不同细胞中的瞬时和稳定转染筛选出了有效干扰靶位．

内镜引导下置放可回收支架治疗食管癌术后良性吻合口狭窄的护理

食管癌术后良性吻合口狭窄的患者因进食困难等不适而痛苦不堪，生活质量低下，既往需要再次手术治疗。随着内镜技术的快速发展，内镜引导下Savary—Gilliard探条扩张或球囊或水囊扩张治疗取得了一定的疗效，但是狭窄复发率高，需要反复治疗。近年本科采用国产镍钛合金可回收食管支架置入代替传统的探条／球囊／水囊扩张法治疗食管癌术后良性吻合口狭窄取得很好的效果，现将内镜引导下可回收支架置入的护理和配合情况报告如下。

老年人早期胃癌内镜黏膜下剥离术后出血危险因素研究

目的探讨老年早期胃癌病人内镜黏膜下剥离术后(ESD)出血的危险因素。方法回顾性分析2010年1月到2015年1月之间年龄≥60岁的418例早期胃癌病例(431处病变),分为ESD术后出血组和未出血组,评估的危险因素包括:病例基本情况、病变相关因素、手术相关因素。结果在本研究中ESD术后出血发生率为38/431(8.8%),多因素分析发现病变直径≥4 cm(OR=2.50;95%CI:1.12~5.58,P=0.026),手术时间≥70 min(OR=2.70;95%CI:1.30~5.80,P=0.008)是老年人ESD术后出血的独立危险因素。结论病变大小和手术时间是老年早期胃癌病人ESD术后出血的独立危险因素,充分行ESD术前评估,最小化手术创面及缩短手术时间以降低术后出血风险。

经口内镜下肌切开术治疗贲门失弛缓症前后食管动力的变化

背景：贲门失弛缓症的治疗目的为降低下食管括约肌压力（LESP），减轻梗阻，改善临床症状。经口内镜下肌切开术（POEM）近年来开始用于贲门失弛缓症的治疗。目的：通过分析手术前后食管动力的变化，评估 POEM治疗贲门失弛缓症的近期疗效。方法：纳入2011年12月～2012年10月在南京鼓楼医院诊断为贲门失弛缓症并接受POEM治疗的39例患者，对其手术前后食管液态测压和近期随访结果进行回顾性分析。结果：38例患者完成POEM和术后3 d 食管测压。术后3 d LESP 较术前显著降低（P ＜0．01），LES 松弛率与术前相比无明显差异。术前和术后3 d 食管体部均表现为蠕动性收缩消失，同步收缩比例增加。术后1个月随访，LESP 仍显著低于术前（P ＜0．05），37例患者吞咽困难明显好转，有效率为94．9％。结论：POEM治疗贲门失弛缓症近期内降低 LESP 和缓解临床症状效果明显，但对恢复食管蠕动功能作用有限。食管测压对贲门失弛缓症术后疗效评估有一定价值。

食管鳞癌细胞系EC-109中缺氧诱导因子-1α的表达意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在食管鳞癌细胞系EC-109中的表达及其意义.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot分别检测HIF-1αmRNA和蛋白在常氧及缺氧状态下在食管鳞癌EC-109细胞中的表达.结果:HIF-1αmRNA在缺氧食管鳞癌EC-109细胞中过表达(P<0.05),在缺氧24h时HIF-1αmRNA表达最高,其后随时间延长表达下降;HIF-1α蛋白水平在缺氧食管鳞癌EC-109细胞中无明显上调(P>0.05).结论:低氧可诱导食管鳞癌EC-109细胞中HIF-1αmRNA的过度表达,缺氧状态下HIF-1α蛋白水平较常氧时无明显增加.

RNA干扰HIF-1α对食管癌细胞株TE13的生物学特性的影响

目的:探讨HIF-1α沉默后对食管癌细胞株TE13的生物学行为的影响.方法:应用倒置荧光显微镜观察HIF-1α的干扰质粒转染食管癌细胞TE13后绿色荧光蛋白的表达;采用Western blot方法检测HIF-1α蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测转染前后细胞增殖能力的变化;Transwell方法检测干扰前后细胞迁移能力的变化;流式细胞术检测干扰前后细胞周期的变化.结果:TE13/12单克隆干扰效果好,Western blot结果显示无HIF-1α表达.HIF-1α被干扰后,细胞增殖能力明显减弱(P<0.05),运动迁移能力显著下降,与未转染的细胞相比穿过人工基底膜的细胞数明显减少(18.2±3.7vs103.8±8.5,P<0.05).与未转染组相比,TE13/12的细胞周期发生变化,G2/M期细胞明显减少(5.99%±1.19%vs20.47%±4.30%,P<0.05),S期增加(64.67%±1.98%vs48.53%±3.89%,P<0.05).结论:RNA干扰可引起TE13中HIF-1α的沉默,而HIF-1α表达下调后食管癌细胞株TE13的增殖与迁移能力均减弱.推测阻断HIF-1α通路有可能成为治疗人食管鳞癌的新靶点.

磁性纳米控释紫杉醇对食管癌Eca109细胞株生长的影响

目的:观察不同浓度磁性纳米控释紫杉醇对食管癌细胞Eca109的影响及与不同化疗药物的对比.方法:取对数生长期的食管癌Eca109细胞作细胞增殖抑制实验,实验组分别给予不同浓度的磁性纳米控释紫杉醇和5-氟尿嘧啶、泰素,同时设立二甲基亚砜(DMSO)和RPMI1640液对照,测定24,48,72h三个时间段的吸光度值,计算抑制率.经不同浓度的磁性纳米控释紫杉醇作用72h后,用电镜观察细胞超微结构,同时用流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡.结果:MTT实验显示磁性纳米控释紫杉醇可抑制食管癌细胞增殖,与5-氟尿嘧啶,泰素相比,具有缓释性(P<0.01);电镜可发现药物作用组细胞核固缩、解聚以及凋亡小体;流式细胞仪检测显示G1峰前有明显的凋亡峰;细胞周期分析提示磁性纳米控释紫杉醇可将Eca109细胞阻滞于G2-M期,且与浓度相关.结论:磁性纳米控释紫杉醇对人食管癌细胞Eca109的生长有明显的抑制作用,使细胞分裂阻滞于G2-M期,并诱导细胞凋亡,且具有缓释效果.