5100例体外循环心脏手术后急性肾损伤的围手术期危险因素分析

目的:探讨体外循环心脏手术后急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的发生率及其围手术期危险因素。方法:回顾性分析2003年1月至2007年12月在中南大学湘雅二医院接受体外循环心脏手术的5 100例患者的临床资料,统计术后AKI的发生率,并分析其围手术期危险因素。结果:5 100例患者中有340例发生AKI,总发生率为6.7%。年龄、术前血肌酐水平、术前射血分数、术前β2微球蛋白、血尿酸水平,术中心肺转流时间、大动脉阻断时间及甘露醇使用量为术后AKI发生的相关危险因素,而术前肌酐水平、左室射血分数、血尿酸水平、血β2微球蛋白、术中心肺转流时间、术中大动脉阻断时间为术后AKI发生的独立危险因素。结论:体外循环心脏手术患者术后AKI的发生与多种围手术期危险因素密切相关,提示对于体外循环心脏手术患者应进行更全面的评估与监测,从而预防AKI的发生。

葡萄糖PDS对单层人腹膜间皮跨细胞电阻及迁移修复能力的影响

目的:观察不同浓度葡萄糖PDS(PDS)对单层人腹膜间皮细胞(HPMCs)跨细胞电阻(TER)以及迁移修复能力的影响。方法:用不同葡萄糖浓度PDS(1.5%,2.5%,4.25%)分别与DMEM以1:1比例混合后体外培养HPMCs。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖。使用双池培养皿(transwell)构建HPMCs单层细胞模型。采用TER技术测定PDS对HPMCs通透性的影响。划痕损伤实验观察葡萄糖对HPMCs修复再生能力的影响。结果:不同浓度葡萄糖PDS(1.5%,2.5%,4.25%)干预均可明显地抑制HPMCs的增殖(P<0.05)。TER值随PDS干预时间的延长而逐渐下降,且与葡萄糖浓度呈负相关(P<0.01)。葡萄糖PDS可明显抑制HPMCs迁移修复能力,且与葡萄糖浓度相关。结论:高糖PDS液抑制细胞增殖,降低单层HPMCs的TER值,并抑制HPMCs损伤后迁移修复能力。提示PDS中高糖成分是导致腹透患者腹膜高通透性和超滤衰竭的重要因素。

Smad锚着蛋白在高糖诱导人肾小管上皮细胞细胞外基质沉积中的作用

目的:阐明Smad锚着蛋白(Smad anchor for receptor activation,SARA)在高葡萄糖诱导的人近端肾小管上皮细胞系(HK-2细胞)细胞外基质(ECM)沉积中的作用及分子机制,探讨以SARA为靶点抑制高葡萄糖诱导的HK-2细胞ECM沉积的策略。方法:用高浓度葡萄糖(30 mmol/L D-葡萄糖)刺激HK-2细胞,通过WesternBlot及实时定量PCR(Real-time PCR)检测纤维连接蛋白(FN)和Ⅰ型胶原(ColⅠ),进而检测转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3的表达变化,通过细胞免疫荧光、Western Blot、Real-time PCR检测SARA的表达变化;分别转染全长SARA质粒[SARA(WT)]及敲除SBD结构域的SARA质粒[SARA(dSBD)],检测转染后高糖诱导HK-2细胞FN及ColⅠ表达的变化。结果:Western Blot及Real-time PCR结果显示,30mmol/L D-葡萄糖刺激后,HK-2细胞ColⅠ赁白及mRNA表达呈时间依赖性升高。高糖可诱导TGF-β1、Smad3蛋白及其mRNA表达呈时间依赖性上调;Smad2 mRNA表达呈时间依赖性上调,而其蛋白表达呈时间依赖性下调;高糖可促进Smad2和Smad3磷酸化,但Smad3的活化时间更长。而SARA的蛋白及mRNA表达呈时间依赖性降低,细胞免疫荧光结果亦汪实高糖刺激后SARA表达下降。与高糖组相比。转染SARA(WT)可使HK-2细胞FN和ColⅠ表达下凋;转染SARA(dSBD)对高糖诱导的HK-2细胞FN和ColⅠ表达无明显影响。结论:高糖诱导的HK-2细胞ECM沉积过程中,TGF-β1信号通路活化,SARA的表达下凋;过表达SARA可能通过上调Smad2的蛋白表达,抑制TGF-β1信号传导,从而减少高糖诱导的HK-2细胞ECM分泌。

短发夹结构RNA对人腹膜间皮细胞转化生长因子-β_1表达和超微结构的影响

目的研究靶向转化生长因子-β1(TGF-β1)的短发夹RNA(shRNA)表达载体对腹膜透析液诱导的人腹膜间皮细胞(HPMC)表达TGF-β1的影响,并观察其对HPMC超微结构的影响。方法利用pcDU6质粒构建两个靶向TGF-β1的shRNA真核表达载体pcDU6-A1-A2和pcDU6-B1-B2,使用脂质体介导转染腹膜透析液刺激下的HPMC,采用半定量逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附(ELISA)检测shRNA表达载体对于TGF-β1基因和蛋白质表达水平的抑制效果,使用透射电镜观察HPMC超微结构的改变。结果HPMC暴露于4.25%腹膜透析液中48小时后,其上清中TGF-β1的浓度与对照组相比显著增高分别为(39.71?6.60)pg/105cells和(16.32?2.71)pg/105cells,P<0.01),1.5%腹膜透析液对于TGF-β1蛋白合成无明显影响;而预先转染了shRNA载体的两组与转染pcDU6载体(空载体)的组相比,其由4.25%腹膜透析液诱导的TGF-β1蛋白增高幅度明显减少,分别下降了39.2%和47.2%(P<0.01);两组转染不同的shRNA载体的HPMC之间相比TGF-β1浓度无显著差异,pcDU6载体(空载体)转染组与4.25%腹膜透析液刺激组TGF-β1浓度亦无显著差异。透射电镜显示HPMC暴露于4.25%腹膜透析液可导致细胞扁平、微绒毛减少和线粒体水肿等,而转染shRNA载体组细胞的改变相对较轻。结论pcDU6质粒载体介导的短发夹结构RNA(shRNA)能够明显抑制腹膜透析液刺激下的人腹膜间皮细胞TGF-β1的高表达,并减轻其超微结构的异常,提示shRNA表达载体可能有益于腹膜纤维化的防治。

磷酸钙纳米颗粒介导shRNA抑制腹膜间皮细胞TGF-β_1的表达

目的转化生长因子-β1(TGF-β1)是腹膜纤维化的关键介质之一,在此前的实验中已经制备了靶向TGF-β1的shRNA表达质粒。本研究使用化学修饰的方法制备了一种新型的非病毒载体-磷酸钙纳米颗粒(CPNP),透射电镜和Zeta电位显示其直径23.5～34.5nm,表面电荷为+16.8mV。在本研究中探讨使用CPNP介导转染shRNA质粒,研究其对高糖诱导的人腹膜间皮细胞(HPMC)表达TGF-β1和纤维连接蛋白(FN)的影响。方法shRNA表达质粒或作为对照的空白质粒在磷酸钙纳米颗粒介导下转染体外培育的HPMC,转染后的细胞被高浓度D-glucose(50mmol/L)刺激48h,然后监测TGF-β1和FN的表达。结果HPMC被高浓度葡萄糖刺激48h后其TGF-β1和FN的表达均上调,而使用磷酸钙纳米颗粒介导转染shRNA表达质粒则可明显抑制高糖对TGF-β1和FN的诱导效应。结论鉴于shRNA表达质粒对腹膜间皮细胞TGF-β1的有效抑制和CPNP的载体作用,我们认为联合shRNA表达质粒和CPNP可能成为腹膜纤维化基因治疗极具前景的新方法。

SARA、TGF-β/Smad信号通路与腹膜纤维化的基因治疗

长期腹膜透析可导致腹膜纤维化,其主要特征是间皮细胞剥落和细胞外基质（ECM）的异常积聚所致的腹膜增厚,使腹膜透析效率降低。腹膜纤维化的产生是多种因素作用的结果,多种促纤维化细胞因子具有重要的调节作用,其中作用最为关键的是转化生长因子-β1（TGF-β1）。最近的研究显示,

Troglitazone对高糖和LPS诱导的人肾小球mPGEs蛋白表达的抑制作用

目的 :研究PPAR γ激动剂troglitazone对LPS或高浓度葡萄糖作用的体外培养的人肾小球mPGEs蛋白表达水平的影响。方法 :用LPS或高浓度葡萄糖分别与不同浓度troglitazone作用体外培养的人肾小球 ,ELISA法检测上清液中mPGEs浓度。结果 :LPS(10 μg/ml)或 5 %葡萄糖均可使体外培养的人肾小球mPGEs明显增高。 10～ 2 0nmol/L的troglitazone可明显抑制LPS(10 μg/ml)和 5 %葡萄糖诱导的大鼠系膜细胞mPGEs蛋白表达水平的增高 (P <0 .0 5 )。结论 :LPS和 5 %葡萄糖可诱导体外培养的人肾小球mPGEs蛋白表达水平明显增高 ,PPAR γ激动剂troglita zone可明显抑制两者所诱导的体外培养的人肾小球mPGEs蛋白表达水平的增高。

抗肿瘤坏死因子-α治疗类风湿关节炎致感染风险的Meta分析

目的:通过系统评价3种国内常用抗肿瘤坏死因子-α(TNF-α)生物制剂治疗类风湿关节炎(RA)致结核等感染的风险,以指导临床用药选择,有效减少抗TNF-α生物制剂相关感染事件。方法:采用Meta分析法定量系统评价受体型生物制剂依那西普、单克隆抗体型生物制剂英夫利西单抗、阿达木单抗3种常用抗TNF-α生物制剂治疗RA过程中发生感染、重症感染以及结核感染等的风险。结果:抗TNF-α治疗组与未用抗TNF-α生物制剂的对照组比较,结核风险没有统计学意义上的增高(0.5%vs 0.07%;P=0.27,OR=1.85,95%CI:0.62～5.52),但从临床角度分析,依那西普治疗组1393例,无结核发生报道,而英夫利西单抗2050例,共11例结核报道,阿达木单抗722例,共3例结核报道,提示抗体型抗TNF-α生物制剂治疗相关的结核发生率有增高。抗TNF-α治疗组总感染风险、重症感染风险均高于对照组(P<0.05);不同种类抗TNF-α致感染风险不一,依那西普致感染风险及重症感染风险最低,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而英夫利西单抗及阿达木单抗致感染风险及重症感染风险均显著高于对照组(P<0.05)。高剂量使用抗TNF-α生物制剂致重症感染风险高于对照组(6.0%vs2.8%,P=0.04,OR=1.68,95%C:I1.02～2.78)。结论:单克隆抗体型抗TNF-α生物制剂所致感染风险较受体型抗TNF-α生物制剂高,抗TNF-α治疗相关结核风险值得高度重视,尤其是在高结核感染地区。

糖尿病肾病病理分型最新国际标准的临床应用(附37例回顾性分析)

目的：探讨2010年肾脏病理学会研究委员会发布的最新糖尿病肾病（DN）病理分型标准的临床应用。方法：对肾活检伴有微量白蛋白尿（MAU）或临床蛋白尿（CAU）的37例2型糖尿病患者（T2DM）的病理结果重新阅片及分型,观察肾活检组织病理与各病理分型之间的关系,以及分型与间质小管损害之间的关联,分析新标准的临床应用价值。结果：在37例伴MAU或CAU的糖尿病患者中,按既往标准诊断DN 26例,按新标准重新阅片后诊断DN 32例;32例中Ⅰ型DN 1例（3.1%）,Ⅱa型DN 3例（9.4%）,Ⅱb型DN 2例（6.25%）,Ⅲ型DN 23例（71.9%）,Ⅳ型DN 3例（9.4%）,以Ⅲ型DN为主;按肾小管间质评分标准,在新分型后的32例DN中,1~3分的轻型小管间质病变者12例（37.5%）,4~6分中度病变者15例（46.9%）,7分以上病变较重者5例（15.6%）。结论：最新的DN病理分型标准可提高DN的诊断率,并且更加重视肾小管损伤的意义,有利于糖尿病肾病的早期诊断和防治。

16年腹膜透析的基础和临床研究回顾

总结16年以来中南大学湘雅二医院肾内科腹膜透析的基础与临床研究的经验与成果。在国内率先成功构建了腹膜透析及腹膜纤维化动物模型,分离、鉴定了腹膜间皮细胞;利用细胞、分子生物学方法,系统研究了腹膜透析液的生物相容性、腹膜间皮细胞透析损伤的分子机制与防治措施,观察了促纤维化细胞因子转化生长因子-β1(TGF-β1),结缔组织生长因子(CTGF)及过氧化物酶体增生物激活受体-γ(PPAR-γ)等在腹膜纤维化发病机制中的重要作用,并初步阐明了它们的基因表达调控机制。首次在腹膜透析研究领域中利用纳米载体介导TGF-β1-shRNA与pCTGF-shRNA质粒在腹膜细胞与组织中的表达。在临床研究方面,研究了腹膜透析置管定位新方法、腹膜透析溶质转运特点及其机制、腹膜透析治疗模式及其他并发症的防治。

氧化应激在腹膜纤维化大鼠模型腹膜间皮细胞转分化中的作用(英文)

目的:研究氧化应激在腹膜纤维化大鼠腹膜间皮细胞转分化中的作用;观察抗氧化剂普罗布考的干预效应。方法:采用4.25%高糖腹透液以100mL/kg腹腔注射法复制腹膜纤维化大鼠模型,实验分为正常对照组、生理盐水对照组、腹膜纤维化模型组和普罗布考干预组。4周后行腹膜平衡试验,处死大鼠,准确测量超滤量,检测腹膜功能;取肠系膜组织匀浆后测定氧化应激指标丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;留取壁层腹膜组织行HE及Masson染色,并测量腹膜厚度;采用免疫组织化学和Western印迹检测大鼠壁层腹膜组织腹膜间皮细胞转分化指标E-cadherin蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达。结果:腹膜纤维化模型组大鼠腹膜间皮细胞脱落,与正常对照组比较,壁层腹膜厚度和肠系膜匀浆MDA含量增加(P<0.01),腹腔超滤量和GSH-Px活性降低(P<0.01);转分化指标α-SMA蛋白表达明显上调(P<0.01),E-cadherin蛋白显著下调(P<0.01)。普罗布考干预组间皮细胞基本完好,与纤维化模型组比较,壁层腹膜厚度和肠系膜匀浆MDA含量降低(P<0.01),腹腔超滤量(P<0.05)和GSH-Px活性(P<0.01)上升;腹膜α-SMA蛋白表达明显下调(P<0.01),E-cad-herin蛋白表达明显上调(P<0.01)。结论:氧化应激在高糖腹透液诱导的大鼠腹膜间皮细胞转分化中起一定作用;普罗布考可改善腹膜纤维化大鼠模型腹膜结构和功能,部分逆转腹膜间皮细胞转分化。

腹膜透析流出液中人腹膜间皮细胞的培养及转分化特征

目的建立从腹膜透析(PD)流出液中分离、培养人腹膜间皮细胞(HPMC)的方法,并检测上皮黏附连接蛋白E-cadherin、紧密连接蛋白claudin-1及间充质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。方法从25例持续不卧床腹膜透析(CAPD)患者PD流出液中分离HPMC,并在体外进行原代培养。根据开始透析的时间分为新开管组(10例)和透析半年以上组(15例)。采用倒置相差显微镜、免疫组织化学染色和扫描电镜对培养的细胞进行鉴定;采用实时定量PCR检测细胞E-cadherin、claudin-1及α-SMAmRNA表达。结果 22例患者(新开管组10例,半年以上组12例)PD流出液分离的细胞在体外培养成活,经鉴定均具有HPMC的特征。实时定量PCR结果显示,半年以上组较新开管组分离的HPMC细胞E-cadherin、claudin-1 mRNA表达降低,α-SMA mRNA表达增高(P<0.05),提示出现了间充质细胞转分化(EMT)。结论该研究成功建立了PD流出液分离培养原代HPMC的方法,并证实长期PD患者HPMC存在EMT倾向。该研究的发现为进一步研究腹膜纤维化(PF)和超滤衰竭(UFF)提供了新的方法与实验依据。

去甲斑蝥素不依赖钙调蛋白磷酸酶信号通路抑制高糖刺激肾小管上皮细胞细胞外基质的表达

目的:在证实去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)能减轻糖尿病肾病(DN)大鼠肾间质纤维化和抑制高糖刺激的肾小管上皮细胞细胞外基质表达的基础上,观察NCTD对高糖刺激的肾小管上皮细胞钙调蛋白磷酸酶(calcineurin,CaN)通路的影响,探讨NCTD抗DN肾小管间质纤维化与其抑制CaN的关系。方法:常规培养人肾小管上皮细胞(HK-2),转染CaN siRNA,细胞分五组:(1)正常糖组(D-glucose5.5mmol/L);(2)高糖组(HG,D-glucose30mmol/L);(3)高糖+CaN siRNA组;(4)高糖+CaN siRNA+NCTD(5mg/L)组;(5)高糖+NCTD(5mg/L)组。采用Western-blot、免疫荧光和实时定量PCR,观察NCDT对HK-2细胞CaN/NFAT通路的影响,明确CaN siRNA的干扰效果。采用Western blot,检测NCTD对转染CaN siRNA后的HK-2细胞纤维连接蛋白(FN),胶原蛋白IV(Collagen IV,Col IV)及转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达的影响。结果:高糖可促进HK-2细胞CaNmRNA及蛋白的表达,NCTD可在基因及蛋白水平抑制CaN的表达(P<0.05)。免疫荧光发现CaN下游活化T细胞核因子(NFATc)在正常对照组中存在于胞质,高糖刺激后细胞核内开始表达,高糖刺激30min后发生明显的核转位,NCTD能在一定程度上抑制核转位的发生,并能减少高糖刺激后核内NFATc蛋白的表达。转染CaN siRNA后,高糖刺激后HK-2细胞中CaN mRNA以及蛋白表达均降低,而FN,Col IV以及TGF-β1蛋白水平表达都明显增强(P<0.05)。NCTD可抑制转染CaN siRNA后高糖刺激的HK-2细胞FN,Col IV和TGF-β1的表达。结论:NCTD能下调肾小管上皮细胞CaN表达,阻断CaN/NFATc信号通路;但NCTD抑制高糖刺激后肾小管上皮细胞细胞外基质的表达,与其阻断CaN/NFATc信号通路无关。

痛风喜欢这样的年轻人 你中招了吗

痛风的发病年龄约为45岁,通常年龄大的人比年轻人更易患痛风.但是,近年来由于生活水平普遍提高,很多年轻人营养过剩,缺少运动,痛风正在向低龄化发展.在痛风专病门诊发现,30岁左右的痛风患者很常见,还有部分30岁以下的患者.

去甲斑蝥素抑制单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮-间充质转分化的实验研究

目的:利用单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型,观察去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对肾小管上皮细胞间质转分化的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)和UUO+NCTD治疗组(NCTD组),每组6只。采用单侧(左)输尿管结扎方法,建立梗阻性肾小管间质纤维化大鼠模型,Sham组只游离输尿管而不结扎。术后14d处死动物,取结扎侧肾脏,同时处死Sham组大鼠,取出肾组织。采用免疫组化、Western Blot及RT-PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏蛋白(E-cadherin)与转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的mRNA表达的变化。结果:免疫组化、Western Blot及RT-PCR均显示,与Sham组比较,UUO组肾组织α-SMA和TGF-β1的mRNA表达升高、E-cadherin蛋白和mRNA表达降低(P<0.05);NCTD能抑制UUO大鼠肾组织α-SMA和TGF-β1表达的上调,上调E-cadherin的表达(P<0.05)。结论:NCTD具有抑制UUO大鼠肾小管上皮-间充质转化的作用,该作用可能与抑制TGF-β1的过表达有关。

去甲斑蝥素对TGF-β_1诱导的人近端肾小管细胞上皮细胞转分化及信号蛋白Smad2/3表达的影响

目的探讨去甲斑蝥素对体外人源性肾小管细胞株(HK-2)上皮细胞间质转分化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)以及信号蛋白Smad2/3的影响。方法体外培养HK-2细胞,分为对照组、TGF-β1组和去甲斑蝥素组(NCTD组)。对照组为无血清DMEM培养,TGF-β1组为TGF-β15 ng.mL-1诱导,NCTD组为不同浓度NCTD(0.5、1.0、2.5μg.mL-1)与TGF-β1(5 ng.mL-1)共同作用,各组作用时间48 h。使用半定量RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)与Smad2、Smad3 mRNA表达;采用Western blot检测α-SMA、E-cadherin、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白质表达。结果与对照组相比,TGF-β1组α-SMA mRNA及其蛋白表达明显上调(P<0.05),E-cadherin mRNA及其蛋白表达显著下调(P<0.05);与TGF-β1组相比,NCTD干预组α-SMA mRNA及其蛋白表达明显下调(P<0.05),而E-cadherin mRNA及其蛋白表达显著上调(P<0.05),且均呈剂量依赖性。与对照组相比,TGF-β1组Smad2、Smad3 mRNA和Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达上调(P<0.05);与TGF-β1组比较,NCTD干预组Smad2、Smad3 mRNA和Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达下调(P<0.05),具有剂量依赖关系。结论去甲斑蝥素具有抑制肾小管上皮细胞EMT的作用,该作用可能与其下调信号蛋白Smad2/3的表达有关。

2型糖尿病合并非糖尿病肾病的临床及病理分析

目的:回顾性分析2型糖尿病合并非糖尿病肾病的临床表现及病理特征。方法:回顾性分析2004年1月～2009年12月临床疑为合并非糖尿病肾病的110例2型糖尿病患者的肾活检资料。根据肾活检结果分为单纯糖尿病肾病(DN)组和糖尿病肾病合并非糖尿病肾病(NDRD)组,并对临床和病理资料进行分析。结果:110例2型糖尿病肾病患者中,50例(45.5%)合并非糖尿病肾病。糖尿病肾病合并非糖尿病肾病组蛋白尿、血尿发生率高于单纯糖尿病肾病组,但糖尿病视网膜病变发生率低于单纯糖尿病肾病组。两组年龄、糖尿病病程、高血压、血肌酐和肾小球滤过率差异无统计学意义。所有合并的非糖尿病肾病中,IgA肾病的比率最高为34%,其他依次为膜性肾病22.0%,系膜增殖性肾小球肾炎14%,HBV相关性肾小球肾炎8.0%,微小病变型肾小球肾炎10%,高血压肾小球硬化4.0%,FSGS4.0%,新月体肾小球肾炎2.0%,狼疮性肾炎2.0%。结论:2型糖尿病肾病合并非糖尿病肾病发生率45.5%,IgA肾病最常见。血尿、蛋白尿同时缺乏糖尿病视网膜病变强烈提示合并非糖尿病肾病。对于临床表现不典型的患者,肾活检是一项排除糖尿病肾脏病变的重要手段。

去甲斑蝥素对TGF-β_1诱导的人近端肾小管细胞上皮间质转分化以及转录因子Snail1表达的影响

目的:探讨去甲斑蝥素对体外人源性肾小管细胞株(HK-2)上皮间质转分化以及转录因子Snail1的影响。方法:常规培养HK-2细胞,分为对照组、TGF-β1组、去甲斑蝥素组(NCTD组)。对照组为无血清DMEM培养,TGF-β1组为TGF-β15ng/ml诱导,NCTD组为不同浓度NCTD(0.5、1.0、2.5μg/ml)与TGF-β1(5ng/ml)共同作用,各组作用时间48h。采用RT-PCR、Western blot分别检测α-SMA、E-cadherin与Snail1表达水平的变化。结果:与对照组相比,TGF-β1组α-SMA mRNA和蛋白表达上调(P<0.05),E-cadherin mRNA和蛋白表达下调(P<0.05);与TGF-β1组相比,NCTD干预组α-SMA mRNA和蛋白表达下调(P<0.05),而E-cadherin mRNA和蛋白表达上调(P<0.05),且均呈剂量依赖性。与对照组相比,TGF-β1组Snail1 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05);与TGF-β1组比较,NCTD干预组Snail1 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05),具有一定的剂量依赖关系。结论:去甲斑蝥素具有抑制肾小管上皮细胞EMT的作用,该作用可能与下调转录因子Snail1的表达有关。

SARA在高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中的表达变化

目的:建立高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化模型,检测肾小管上皮细胞转分化过程中Smad锚着蛋白(Smad anchor for receptor activation,SARA)的表达变化。方法:采用Western印迹和实时定量PCR检测细胞波形蛋白(vimentin)、紧密连接蛋白(Zona occludens-1,ZO-1)、SARA蛋白及其mRNA表达水平。结果:30mmol/LD-葡萄糖刺激后,HK-2细胞vimentin蛋白及其mRNA水平呈时间依赖性升高,而ZO-1蛋白及其mRNA水平呈时间依赖性下降,此变化在高糖刺激48h时最为显著。同时,SARA蛋白及其mRNA表达水平呈时间依赖性下降。结论:高糖可诱导HK-2细胞发生转分化,SARA可能作为保护因子参与了这一过程。