白细胞介素-33/ST2信号通路调控辅助T细胞/调节性T细胞免疫平衡参与慢性阻塞性肺疾病发病机制分析

目的探究基于白细胞介素-33(IL-33)/ST2信号通路激活树突状细胞(DCs)成熟,调控辅助T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫平衡参与小鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病的临床机制。方法选择36只SPF级C57BL/6健康小鼠,随机选取12只作为健康对照组,其余小鼠用于制作COPD模型,采用香烟烟雾刺激和气道内注入脂多糖的方式建立COPD模型,以小鼠肺部压力-容积曲线移动或弹性程度降低为造模成功,将模型小鼠按照随机数字表法分为COPD组(n=12)和IL-33抗体干预组(n=12)。于造模开始第3周时为IL-33抗体组小鼠腹腔注射IL-33抗体,健康对照组和COPD组小鼠注射同等剂量生理盐水,于造模开始第28天在小鼠清醒状态下采集三组小鼠的内眦静脉从血液,使用PBS液冲洗三组小鼠右肺组织并收集支气管肺泡灌洗液(BALF),比较三组小鼠外周血、BALF中DCs、IL-33表达情况差异,采集肺组织甲醛固定后染色处理,光镜下观察肺组织病理变化。结果COPD组小鼠外周血、BALF中Th17/Treg比值均高于健康对照组和IL-33抗体干预组,差异有统计学意义(P<0.05);COPD组小鼠外周血、BALF中DCs成熟标志物CD80、CD86水平均高于健康对照组和IL-33抗体组,主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅱ低于健康对照组和IL-33抗体组,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR分析显示,COPD组小鼠IL-33灰度值高于健康对照组和IL-33抗体干预组,差异有统计学意义(P<0.05);三组小鼠气道炎症病理差异较大。结论调控IL-33/ST2信号通路可以激活DCs细胞成熟,恢复COPD小鼠Th17/Treg平衡,改善COPD小鼠炎症指标水平。

基于调控NF-κB信号通路探讨白藜芦醇影响DCs成熟对恢复COPD小鼠Th17/Treg平衡的作用及机制

目的探索白藜芦醇与核因子(NF)-κB通路的相互关系,及其介导树突细胞(DCs)成熟从而恢复辅助T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)平衡的调控作用与分子机制。方法选用36只小鼠随机分为健康对照组(n=12只)、COPD组(n=12只)和白藜芦醇干预组(n=12只)。建立脂多糖(LPS)+香烟烟雾致敏的小鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型,收集动物外周血、支气管肺泡灌洗液(BALF)、肺组织标本及提取骨髓源性DCs,苏木素-伊红(HE)染色光镜下观察肺组织病理改变,流式细胞术检测外周血、BALF中DCs成熟标志物及Th17/Treg比值,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测DCs中NF-κB的表达。结果3组外周血及BALF中CD80、CD86、TH17/Treg水平比较:COPD组>白藜芦醇干预组>健康对照组(均P<0.05);3组外周血及BALF中MHC-Ⅱ水平比较:健康对照组>白藜芦醇干预组>COPD组(均P<0.05)。健康对照组支气管壁光滑完整,肺组织、气道及血管周围未发现炎症细胞浸润。COPD组气道壁被炎性细胞浸润,细支气管显示出纤毛倒伏、缩短、粘连,其上皮黏液杯状细胞增生,明显出现肺气肿,可见形成的肺大泡。白藜芦醇干预组较COPD组有所改善,炎症细胞浸润减少,肺气肿及肺大泡亦有改善。结论白藜芦醇可抑制NF-κB信号通路而阻断DCs成熟,从而恢复COPD小鼠Th17/Treg的平衡,继而延缓COPD小鼠气道炎症的进展。