AKT2基因的过表达抑制H_2O_2诱导的乳腺癌细胞凋亡

研究AKT2基因对H2O2诱导的乳腺癌细胞凋亡的影响.RT-PCR扩增人AKT2基因全长cDNA序列后克隆入pcDNA3.1/myc-His(-)A质粒中,构建AKT2基因的真核表达载体(野生型,WT-AKT2);应用QuikChange定点诱变,制备AKT2激酶活性丧失的负性表达载体(DN-AKT2).WT-AKT2和DN-AKT2分别转染人乳腺癌MCF-7细胞,新霉素筛选稳定转染细胞克隆;设计并合成针对人AKT2基因2个不同部位的siRNA片段,转染入同样的细胞.通过TUNEL和DNA ladder测定,研究转染AKT2基因及AKT2 siRNA前后细胞对H2O2诱导凋亡的抵抗作用.测序鉴定证实,WT-AKT2和DN-AKT2表达载体构建成功.Western印迹结果显示,WT-AKT2和DN-AKT2基因在MCF-7细胞中表达良好,而AKT2 siRNA则可有效地抑制AKT2的表达;TUNEL和DNA ladder测定结果表明,WT-AKT2表达上调的稳定克隆组,可显著提高MCF-7细胞对H2O2诱导的凋亡的抵抗作用(转染DN-AKT2具相反作用).经H2O2作用后,其凋亡细胞数显著低于空载体稳定转染克隆及未转染亲代细胞的,差异具有统计学意义(P<0.05),而后两者之间差异无统计学意义(P>0.05).AKT2抑制乳腺癌细胞对H2O2诱导凋亡的作用可被AKT2 siRNA和PI3K/AKT信号途径抑制剂wortmannin所阻断.内源性的结果进一步证明了AKT2的功能.本研究表明,AKT2能够抑制H2O2诱导的MCF-7人乳腺癌细胞凋亡,可能成为乳腺癌治疗的靶点之一,并为研究乳腺癌细胞抵抗活性氧诱导的细胞凋亡的分子机制奠定了基础.

D、L-甘油醛对27项常规生化项目检测的影响

目的研究新型血糖保护剂D、L-甘油醛对27项常规生化检测的影响及其机制,初探用血糖管检测常规生化的可行性。方法病人血清30份,每份配成含甘油醛高低浓度(最终甘油醛含量为5mmol/L、2mmol/L)的血清及1份加有同体积水的血清为对照。在3台生化分析仪上分别用不同的试剂、方法检测27项常规生化。用肌酐检测的3种方法:苦味酸速率法及2种酶法(酶紫外法及酶偶联Trinder显色法)来讨论此种影响的机理。结果甘油醛含量为5mmol/L,对Ure、TP、Alb、Glu、ALP、D-Bil、apoAⅠ、apoB、K+检测与对照组没有差异(P>0.05)。而对Cr、UA、ALT、γGT、ChE、T-Bil、CK、HDL-C、CK-MB、LDH、HBDH、Ch、TC、Na+、Cl-、Ca2+、iP检测有显著性差异(P<0.05)。甘油醛含量为2mmol/L,对T-Bil、UA、TG、Cr测定仍有显著性差异。结论甘油醛具有还原性,对Cr、UA、ALT、γGT、ChE、T-Bil、CK、CK-MB、LDH、HBDH、TC、TG、Na+、Cl-、Ca2+、iP检测有干扰。干扰与甘油醛的含量有关,含量愈低干扰愈小。干扰与检测方法有关,选择适当的检测方法可避免干扰,初步达到用血糖管同时检测生化项目的目的。

远距离外出采血对红细胞保存质量的影响

目的比较远距离外出采血对红细胞保存质量的影响。方法 20份街头献血屋采集的血液采集后置2～6℃冰箱存放,2 h后分离出红细胞悬液放入2～6℃冰箱贮存,为对照组;20份外出采血血液采集后置室温30～33℃1～2 h,18～22℃路程4 h后分离出红细胞悬液放入2～6℃冰箱贮存为实验组(远距离采血组)。在保存期内每隔3 d检测两组血液红细胞ATP,血浆游离血红蛋白(FHb),棘形红细胞率,细胞外液K+浓度。结果 4个检测值在各时间点的变化都存在非常显著性差异(P<0.01)。随着储存时间的延长实验组的红细胞ATP含量下降的幅度逐渐大于对照组,d 34实验组红细胞ATP值为1.78±0.22 umol/g.Hb,但两组间的变化未见统计学差异(P>0.05)。实验组FHb浓度及棘形红细胞率的升高随时间的变化明显大于对照组,两组间对比有统计学差异(P<0.05)。细胞外液K+浓度在d1的均值两组间差异有统计学意义(P<0.05),且随着储存时间的延长而明显升高,但2组间的差异不显著(P>0.05)。结论因血液受采血后温度、振动及时间等的综合作用,远距离外出采血会影响保存期后期的红细胞质量,应尽早使用。

血糖测定前误差的影响因素及解决方法探讨

目的：探讨糖酵解引起的离体血糖下降所造成的血糖分析前误差的主要影响因素及解决方法。方法：随机抽取30例志愿者血标本，观察在4℃、25℃、37℃条件下血糖随时间（0h、2h、4h、6h、8h）下降速度；调查40例门诊患者因分析前误差造成的血糖测定偏差；分析普通玻璃管及各种真空采血管（加糖酵解抑制剂、促凝剂、促凝剂＋分离胶）及血标本处理方式在减少离体血糖下降的作用。结果：4℃放置8h未离心标本，血糖平均下降1．01mmol／L；而在37℃，血糖平均下降5．07mmol／L。40例门诊患者由分析前误差造成的血糖测定平均降低（0．652±0．351）mmol／L，容易造成糖尿病的误漏诊；氟化钠在前1～2h抑制效果差；甘油醛抑制剂能保持血糖8h基本不下降；30例促凝剂管采血后尽早离心（15min），离心后放置4h平均血糖下降（0．113±0．031）mmol／L。结论：离体血糖的下降速度与血标本采集处理方式、温度、放置时间、管洁度密切相关；采用加促凝剂的真空管采血且及早离心、加甘油醛为血糖抑制剂的方法能较好地解决离体血糖下降引起的分析前误差问题。

对建设用地使用权分层设立的几点思考——从轨道交通建设、地铁经过我家门口想到

随着经济社会的不断发展，现代城市正在向立体化方向发展，作为城市立体化发展的重要组成部分的地下空间开发利用是必不可少的。《物权法》确立了建设用地使用权分层设立制度。但是，建设用地使用权分层设立还存在权利冲突解决规则缺乏可操作性等缺陷。为此，笔者结合工作实际，提出了应当建立统一科学的登记制度、健全权利冲突的解决机制等建议。

对土地招标拍卖挂牌出让方式中引入勾地制度的思考

2006年5月31日,国土资源部下发了《招标拍卖挂牌出让国有土地使用权规范(试行)》(以下简称《规范》),在第5.4条提到一项新的勾地制度,即"有条件的地方",可以建立用地预申请制度.……

血浆置换治疗产后完全型Ⅰ型爆发型HELLP综合征合并急性肾衰竭1例

患者女，28岁，足月妊娠入院待产。产前无妊高症病理体征。顺产3h后突发抽搐，全身皮肤中度黄染、下肢凹陷性水肿：牙关紧闭、反复间歇性抽搐、双眼上翻、口唇青紫、烦渴、躁动、意识模糊。

浅析土地(不动产)登记机关的审查义务及其责任

随着土地（不动产）交易日益活跃、登记数量与日俱增，以及权利人法律意识的不断增强，土地（不动产）登记机关越来越成为行政复议的申请对象或者行政诉讼的被告。深圳规划国土局因登记错误被判赔偿870万元后，土地（不动产）登记机关被判令赔偿已不足为鲜。为进一步提高土地（不动产）登记的公信力，登记错了就要赔偿理应成为土地（不动产）登记的一种发展趋势。但由谁赔偿，怎样赔偿，应该引起思考。作为一名从事国土资源交易登记工作多年的基层工作者，笔者就土地（不动产）登记机关的审查义务及其责任谈以下粗浅认识：

外周血有核红细胞数量与新生儿缺氧的相关性研究

目的探讨新生儿外周血有核红细胞(NRBC)数量与新生儿缺氧的关系,为评价新生儿围产期缺氧提供实验依据。方法随机选取130例临床诊断为缺氧的新生儿(足月窒息儿35例,新生儿呼吸窘迫综合征35例,早产儿30例)为窒息组,同期母儿无异常情况的足月新生儿30例作为对照组,用XE-2100全自动分析仪检测其NRBC百分比和绝对值。结果窒息组、新生儿呼吸窘迫综合征组、早产儿组NRBC的数量均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血NRBC的数量可作为新生儿缺氧诊断与评估的参考指标,早产儿外周血NRBC的数量较足月儿高。

MyD88基因真核表达载体的构建及表达

目的:构建人髓样分化因子88(MyD88)基因编码区序列(cDNA)的真核表达载体,观察其在GES-1细胞中的表达.方法:从健康人外周血单个核细胞中提取总RNA,应用RT-PCR方法扩增MyD88基因cDNA全长序列,经NheI和KpnI酶切位点,插入到pcDNA3.1/myc-His(-)A质粒中,构建成MyD88基因的真核表达载体;用脂质体Lipo-fectamine2000将其转染入人胃黏膜细胞株GES-1细胞中,Western Blot检测其在GES-1细胞中的表达.结果:重组载体经酶切鉴定和测序证实目的基因正确无误;Western Blot结果显示MyD88基因在GES-1细胞具有良好的表达.结论:成功构建了pcDNA3.1/myc-His(-)A-MyD88真核表达载体,并在GES-1细胞中进行了表达,为进一步研究MyD88的结构和功能奠定了基础.

广东省某核电站放射工作人员眼底及影像学职业健康体检结果分析

目的探讨放射因素暴露对广东某核电站的放射工作人员健康的影响情况,为提高核电工作场所的防护意识,加强职业健康监测管理,完善核辐射卫生应急救援处理提供依据。方法选取某核电站1797例放射工作人员为研究对象,比较不同年龄、性别、接触危害因素后核电站放射工作人员的眼底、肝脏、肾脏、甲状腺等疾病的发生情况。结果男性肝脏、胆囊超声异常率32.2%、9.3%,高于女性的19.3%、2.0%,女性甲状腺超声异常率19.3%高于男性的10.8%,差异有统计学意义(P<0.05)。两个年龄段的眼底、肝脏的异常率均居前列,其中36~60岁肝脏超声的异常率、肺部DR胸片异常率以及男性前列腺超声异常率均高于20~35岁,差异有统计学意义(P<0.05)。接触三种及以下及三种以上危害因素的眼底、肝脏、甲状腺、胆囊的异常率均占比较高;其中接触三种危害因素以下的工作人员肾脏、甲状腺及男性前列腺超声异常率均高于接触三种以上危害因素的放射工作人员,差异有统计学意义(P<0.05)。结论长期低剂量的职业性核辐射对放射工作人员的健康有一定影响,需进一步加强核电站工作场所的防护及放射工作人员的健康监测与管理,有助于预防核辐射事故的发生以及核辐射事件卫生应急救援处理能力的提高。

代谢综合征与血清促甲状腺激素水平关系的研究

目的:研究代谢综合征(MS)及其组分患者的血清促甲状腺激素(TSH)水平,是否应该在MS人群中筛查TSH提供理论依据。方法:对1 399例受检者进行询问病史、体格检查并采集空腹血检测血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及TSH、游离的四碘甲腺原氨酸(FT4)、游离的三碘甲状腺氨酸(FT3)水平;比较MS组及其各组分与非MS组血清TSH水平。结果:MS患病率为18.9%,MS患者的血清TSH水平明显高于非MS者(P<0.01),MS组中超重或肥胖、高血压、高TG血清TSH水平高于相应指标的正常者(P<0.01)。结论:MS及其组分患者的血清TSH水平增高,临床应注意其血清TSH水平。

直接数字化X线摄影技术在诊断职业性尘肺病中的应用价值分析

目的探讨分析直接数字化X线摄影(DR)技术在诊断职业性尘肺病中的应用价值。方法选取2017年9月~2018年9月于我所进行检查的工作中经常接触矽尘的93例从业人员作为本研究的受检者,对所有受检者均同时采用直接数字化X线摄影技术和高千伏X线摄影技术进行胸部检查,比较两种摄影方法所得胸片的质量,并对分布于肺区小阴影的数目、阴影密集度以及职业性尘肺病的疾病分期等的一致性进行分析。结果DR检查的胸片质量等级分布情况高于HKV检查,差异有统计学意义(P<0.05)。93例受检者中,共有肺区558个,其中DR、HKV两种检查的肺区小阴影数目分别为334个(59.86%,334/558)、289个(51.79%,289/558),两组差异无统计学意义(P>0.05)。DR检查的胸片小阴影总密集度分布等级要高于HKV检查,差异有统计学意义(P<0.05)。DR检查的职业性尘肺病的阳性率为19.35%,高于HKV的8.60%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论运用DR摄影技术拍摄职业性尘肺胸片图像质量更好,小阴影密集度的检出率更高,有助于提高尘肺病的检出率并明确其诊断与分期,减少漏诊误诊几率,且降低受检者辐射剂量,值得临床深入推广应用。

高中英语教学单元内容重组的尝试和思考

自从采用人教版新版英语教材以来，高中英语教学改革取得了一定的成绩，但还存在许多问题。教师们在教学中普遍认为本教材词汇量大、阅读篇幅大、练习繁多、听力设计难度大，学生无法完全依照教材内容学习。那么，我们应如何结合学生的实际情况，在新课标理论指导下实施英语教学改革呢？笔者深入学习新课程标准理论，仔细分析教材、学生，大胆地对教材单元内容进行重组尝试，在教学实践中拾取了一些心得，以求教同仁。

数字X线摄影技术在江门市无机粉尘作业人员健康检查中的应用价值

目的探讨数字X线摄影(DR)技术在江门市无机粉尘作业人员健康检查中的应用价值。方法选取2018年1~6月在我院进行健康检查的41名无机粉尘作业人员作为研究对象,均采取传统高千伏摄影技术和DR摄影技术两种方法进行检测。比较两种方法的胸片影像质量、尘肺病检出率。结果DR胸片的拍摄质量情况优于传统高千伏胸片,差异有统计学意义(P<0.05)。DR胸片的优片率高于传统高千伏胸片,差异有统计学意义(P<0.05)。DR胸片的尘肺病检出率高于传统高千伏胸片,差异有统计学意义(P<0.05)。DR胸片诊断的尘肺病等级情况优于传统高千伏胸片,差异有统计学意义(P<0.05)。结论DR胸片可用于粉尘作业人员健康检查,具有良好的临床价值。

破解派遣员工管理困局 着力提升窗口服务质量

不动产涉及到千家万户,既是人民群众关注的热点,也是政府相关领域改革的重点。通过不动产统一登记可以提高权利人的产权意识,实现信息互通共享,消除“信息孤岛”,明确物权归属,避免产权交叉重叠,切实保护权利人的合法权利。我国不动产登记工作尚处于初始阶段,除了不动产登记过程中的业务法律问题探究外,如何培育不动产登记工作人员队伍、加强队伍建设与管理,对于促进人力资源高效利用,保障不动产工作有效推进,确保《不动产登记暂行条例》和《不动产登记暂行条例实施细则》顺利实施具有重要意义。本文以宁波不动产登记服务中心为例,就如何改革管理考核机制、稳定派遣员工队伍、提升派遣员工的服务质量进行分析研究。

睡前口服二甲双胍降低空腹血糖的有效性和耐受性观察

目的:探讨空腹血糖(FBG)控制不佳的2型糖尿病患者给予睡前口服盐酸二甲双胍对降低FBG的有效性和耐受性。方法:36例患者在原有治疗不变的基础上给予睡前口服盐酸二甲双胍500mg,服药后不进食,测定加药后次日晨、1周及3个月的FBG、PBG2h及HbA1c水平。结果:患者服药1周后FBG和PBG2h水平较服药前均明显降低(P<0.05),3个月后HbA1c亦较加药前明显下降(P<0.05)。结论:对FBG控制不佳的2型糖尿病患者在睡前加服盐酸二甲双胍500mg,能有效降低患者FBG、PBG2h和HbA1c水平(P<0.05);而且没有出现明显的不良作用。