糖尿病视网膜Mǖller细胞病理改变的体内外研究

目的研究糖尿病视网膜M櫣ller细胞的病理改变。方法用链脲菌素(STZ)腹腔注射建立大鼠糖尿病模型,3个月后观察视网膜M櫣ller细胞超微结构的变化。行免疫组织化学染色,在激光共聚焦显微镜下观察视网膜M櫣ller细胞GFAP、VEGF表达的改变;纯化培养出生5～7d(SD)乳鼠的M櫣ller细胞,在其中加入糖基化终末产物(AGEs)2500μg/mL,培养24h后,用MTT方法检测细胞活性。结果3个月后电镜观察发现糖尿病鼠视网膜M櫣ller细胞突起有损伤表现,微血管内皮细胞、周细胞未见病理改变;正常鼠视网膜VEGF染色阴性,视网膜内界膜下、神经节细胞层有GFAP染色;糖尿病鼠除视网膜内界膜下、神经节细胞层有GFAP染色外,其余各层也可见丝条状贯穿于内外界膜之间的GFAP染色,在上述部位有VEGF及GFAP的共表达。培养24h后,2500μg/mL质量浓度的AGEs对M櫣ller细胞活性有显著促进作用。结论反应性胶质化增生可能是糖尿病早期M櫣ller细胞的主要病理改变,它所引起的M櫣ller细胞结构和功能改变应在糖尿病视网膜病变(DR)的发生发展中起重要作用。AGEs可能是DR中视网膜M櫣ller细胞反应性胶质化增生的重要致病因素。

实验性早期糖尿病鼠视网膜神经组织病理改变

目的研究实验性早期糖尿病鼠视网膜神经组织病理改变。方法用链脲菌素(streptozotocin,STZ)建立大鼠糖尿病模型。3个月后,观察糖尿病鼠视网膜超微结构变化;在视网膜铺片、切片上,用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记技术(TdT-mediated x-dutp nick end labeling,TUNEL)检测视网膜神经节细胞凋亡数目的变化;作眼球冰冻切片,行免疫组织化学染色,在激光共聚焦显微镜下观察视网膜 Müller 细胞、胶质纤维酸性蛋白(Glial Fibriliary Acidic Protein,GFAP)、血管内皮生长因子(vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)表达的改变。结果①3个月后,糖尿病鼠凋亡的视网膜神经节细胞数目较明显增加,阳性细胞位于血管外;②电镜观察发现糖尿病鼠视网膜感光细胞外节排列紊乱、Müller 细胞突起消失、神经节细胞有核染色质固缩等细胞凋亡的特征,但微血管内皮细胞、周细胞未见超微结构的变化;③糖尿病鼠视网膜 Müller 细胞有 GFAP、VEGF 的共表达。结论①糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy,DR)的病理改变除微血管外,还应包括视网膜神经组织;②糖尿病早期,视网膜神经组织的病理改变包括:Müller 细胞反应性胶质化增生、神经节细胞凋亡加速、感光细胞外节排列紊乱等,其中反应性胶质化增生的 Müller 细胞所分泌的 VEGF 可促进 DR 微血管病变的发生发展。

上巩膜静脉结扎联合应用5-Fu建立大鼠慢性高眼压模型

目的建立一种稳定、持久的大鼠慢性高眼压模型,为青光眼视神经损伤及保护机制的研究提供基础资料。方法雄性SD大鼠(300±20 g)65只,分为改良实验组60只,经结扎上巩膜静脉联合术后球结膜下注射5-Fu;对照实验组5只,单独结扎上巩膜静脉。观察改良实验组模型建立后1周、4周、6周1、0周视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)数量的变化情况。结果改良实验组可诱导较长时间(>10周)稳定高眼压,眼压升高1周4、周、6周、10周后,视网膜神经节细胞的存活率分别为:90.16%,83.50%,75.01%,62.37%;但对照实验组眼压升高仅维持2周左右。结论本模型具有操作简单,重复性好,成模率高,可稳定维持较长时间等优点,是较为理想的大鼠慢性高眼压模型。

慢性高眼压大鼠视网膜胶质细胞TNF-α及其受体的表达

目的:通过研究大鼠慢性高眼压模型视网膜胶质细胞TNF-α及其受体的表达,探索胶质细胞在青光眼视网膜神经节细胞损伤中的作用机制。方法:用结扎上巩膜静脉联合术后球结膜下注射5-Fu的方法建立大鼠慢性高眼压模型。在模型建立后1月,做眼球冰冻切片,行免疫组织化学染色,在激光共聚焦显微镜下观察视网膜TNF-α-GFAP、TNF-α-OX42、TNFR-1-GFAP以及TNFR-1-NeuN的双标染色情况。结果:结扎上巩膜静脉联合术后结膜下注射5-Fu可诱导较长时间稳定高眼压,4周内6只高眼压眼眼压均大于22mmHg;正常大鼠视网膜未见明显TNF-α以及TNF-R1阳性染色,1个月高眼压大鼠TNF-α在视网膜的表达高于正常对照组,并且有TNF-α-GFAP、TNF-α-OX42的共表达;在慢性高眼压情况下,TNF-R1在视网膜内层的表达也高于正常对照组,并且在视网膜内层有TNF-R1与GFAP的共表达,但TNF-R1与神经节细胞层NeuN(神经元特异性核蛋白)没有共表达。结论:在慢性高眼压情况中,活化的视网膜胶质细胞来源的TNF-α可能在神经节细胞损伤中发挥重要作用。

抗血管内皮生长因子药物与青光眼的手术治疗

玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）是近10年来眼科领域的重大进展之一,其初始主要用于治疗湿性年龄相关性黄斑变性（age-related macular degeneration,AMD）,由于其独特的药理作用,抗VEGF药物对于湿性AMD的临床治疗作用已得到广泛认可,是目前AMD的主导治疗方法。

提前接受光照对小鼠视网膜TH和bFGF表达的影响

目的在通过手术使小鼠提前睁眼接受光照,并成功诱发近视的基础上,进一步研究TH和bFGF在视网膜中的表达变化,以探讨早产近视的发病机理。方法实验用新生第4d的C57BL/6J小鼠,通过手术分离单侧上、下眼睑,使之提前睁眼并接受正常光照,在第14d检查两眼屈光力,应用RT-PCR和免疫组化方法,检测视网膜中bFGF和TH的表达。结果提前接受光照能诱导形成-9.77±0.09D的相对近视。RT-PCR结果显示提前光照小鼠视网膜TH和bFGFmRNA含量明显减少(t值分别为4.316和12.189,P<0.01)。免疫组织化学显示TH免疫阳性反应主要分布在节细胞层、内网层和内核层,bFGF免疫阳性反应主要分布在内网层及其两侧的部分节细胞和内核层细胞,另在内网层和视锥视杆层也有微弱表达。免疫组织化学染色显示提前光照小鼠视网膜中TH和bFGF的表达量明显下降。结论研究表明新生小鼠提前光照后,其视网膜TH和bFGF的表达都明显下降,提示TH和bFGF与早产近视的形成有密切关系。

Vogt-小柳-原田综合征误诊为原发性急性闭角型青光眼1例

本文报道Vogt-小柳-原田综合征（Vogt—Koyanagi—Harada syndrome．VKH）误诊为原发性急性闭角型青光眼1例，并结合相关文献对其诊断及鉴别诊断介绍如下。

东濮凹陷古潜山致密砂岩油气层测井识别方法

为有效识别和评价以低孔低渗为特征的古潜山致密砂岩油气层,在油藏地质特征及投产资料约束下,总结出各类致密砂岩储层的测井响应特征,形成了Vp/Vs—DTS交会图、仿可动流体孔隙度、裂缝—地层配置关系及地层精细对比等4种油气层有效识别方法。分区块、分层系、分储集孔隙类型建立了油气水层判别标准,提高了测井对致密砂岩油气层的识别能力,使得测井解释符合率提升至95.5%,有效解决了制约中原油田致密砂岩油气勘探的技术"瓶颈"问题。

东濮凹陷薄储层测井评价方法研究

根据东濮凹陷薄储层的地质特点,引进并研制了一些高分辨率的测井仪器,如高分辨率自然伽马、静自然电位、高分辨率声波及阵列感应等,结合分析岩心资料,研究了一套薄储层评价方法,即用高分辨率伽马和静自然电位识别岩性、高分辨率声波及补偿密度和补偿中子识别物性、阵列感应识别电性等,实现薄储层的定性识别,再结合优选曲线、制作交会图版、小波校正等方法实现薄储层的精细评价,并在12口井中得到应用,试油结果证明薄储层的评价精度较高。

引探教学法初学思考题的设计

引探教学法自1983年春创立至今，经过十几年的探索锤炼，已日臻成熟完善。其基本待征是以思考题为教学主线，以自学课本为基础，自我探究为教学核心。运用引探教学法教学，要想使学生能够主动的适应教师的指导与帮助，老师就要设计好学生的初学(预习)，再学思考题，这是备课中的一个重要内容，是上好每堂课的关键。因此，思考题的设计，是引探教学实施成功的重要环节。那么，如何设计思考题呢?

关于对小学推行素质教育的几点思考

中共中央、国务院于1999年6月13日发布了《深化教育改革全面推进素质教育的决定》。这是在世纪之交，根据形势发展的需要，针对我国教育存在的弊端，所作出的重大决策，是指导今后我国教育事业发展的纲领性文件，具有长远而重要的意义。那么如何进一步全面推行素质教育?邓平同志早就说过：“教育要从娃娃抓起”。

关于小学语文阅读教学中实施全面素质教育的探索与实践

素质教育是深化改革基础教育的重要举措,素质教育旨在全部学生的发展教育,每个学生全面发展,学生身心健康地发展。在小学语文阅读教学中实施全面素质教育,能够提升学生的语文学习能力,加强语文学习的自主性和积极性,促进学生道德品行的修养,达到素质教育的目标。

引导深度数学学习,提升数学核心素养

在核心素养理念下,引导学生进行深度数学学习十分重要,学生只有在深度化数学学习的过程中,才能促进自身数学核心素养的提升。基于此背景,本文对引导"自我导航",促进深度参与,引导自主探究,促进深度建构,引导总结归纳,促进深度反思的策略进行了探究。

煤层气解释方法及应用

本文针对煤层气藏的特点,分析煤层结构,确定煤层组分,研究适合这一区块的煤层气测井解释评价方法,建立煤层气解释模型,计算煤层气储层的固定碳、灰分、挥发物、含气量、孔隙度和渗透率等储层参数。

不断奋斗的七旬老人——记湖南省老年科技精英杨友安

听说湘潭市霞城电工有限公司拥有先进的生产设备和技术力量,美国一著名跨国公司驻岳阳子公司的代表,专程来到公司,洽谈生产高性能复合涂层双玻璃电磁材料的事宜。此事发生在2005年初的一天。

慢性高眼压大鼠视网膜神经胶质细胞组织病理学改变

目的 研究青光眼视网膜神经胶质细胞组织病理学改变及其在青光眼视网膜神经节细胞损伤中的作用机制。方法 对照实验研究。选用造模成功的慢性高眼压雄性SD大鼠72只，眼压〉22mmHg（1mmHg=0．133kPa）。右眼为慢性高眼压眼，左眼为假手术对照眼。根据慢性高眼压模型建立的时间（手术结束时开始计算），将实验鼠分为6组（2、12h，1d，1、4、8周），每组12只鼠。正常组SD大鼠12只，平均眼压12．56mmHg。分别取实验各组（慢性高眼压）、假手术组及正常组大鼠4只眼球，冰冻切片行胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫组织化学染色，在激光共焦显微镜下观察视网膜星形胶质细胞及Mtiller细胞的GFAP表达情况；分别取实验各组（慢性高眼压）和正常组大鼠4只眼球，在视网膜铺片上进行GFAP免疫组织化学染色，进行星形胶质细胞计数并观察其形态；分别取实验各组（慢性高眼压）、假手术组及正常大鼠4只眼球的鼻侧半视网膜，在视网膜铺片上行小胶质细胞标记物OX42免疫组织化学染色，进行小胶质细胞计数并观察其形态；取剩余的颞侧中周部视网膜，半薄切片行甲苯胺蓝染色并进行Miiller细胞计数。对不同时间点慢性高眼压组与正常组大鼠细胞表达数量进行比较，采用单因素多水平设计定量资料的方差分析。结果 慢性高眼压模型建立后2h，即有活化的小胶质细胞出现；1d后小胶质细胞的数量开始增加，为（327．40±68．32）个／mm^2；1周后小胶质细胞的数量达到高峰，为（965．06±86．63）个／mm2，与正常组小胶质细胞数量比较，差异有统计学意义（F=196．56，P〈0．01）；其后小胶质细胞数量逐渐减少。慢性高眼压模型建立后12h，星形胶质细胞及Miiller细胞开始呈现活化状态；4周时两种细胞的活化程度达到高峰，以后活化程度逐渐下降，且活化的星形胶质细胞在结构上出现明显异常，表现为星形胶质细胞突起变得粗短、僵硬，胞体的星型结构破坏；但慢性高眼压组视网膜星形胶质细胞及Miiller细胞数量与正常组相比，差异均无统计学意义（F=1．36，1．89；均P〉0.05）。结论 在慢性高眼压条件下，小皎质细胞可能是视网膜最早发生病理学改变的组织；活化的星形胶质细胞可出现明显的形态和结构变化，其结果不仅将加速神经节细胞的损伤，同时也会形成不利于神经节细胞轴突再生的视网膜微环境。

神经胶质细胞和青光眼视神经病变

青光眼是以视网膜神经节细胞凋亡、视野缺损、视盘生理凹陷扩大为特征的视神经慢性退行性疾病。迄今对青光眼视神经病变的发生机制尚不十分清楚，但是在视神经损伤抑或修复中，视网膜神经胶质细胞均起着至关重要的作用，是目前青光眼领域研究的热点。因此，有必要就神经胶质细胞在青光眼视乳头组织结构重塑、视网膜神经节细胞凋亡、青光眼性免疫反应中的作用等相关研究进展予以综述。

大鼠慢性高眼压模型视网膜神经节细胞谷氨酸受体2表达的研究

目的探讨青光眼视网膜神经节细胞(RGC)选择性损伤机制。方法用结扎上巩膜静脉联合术后球结膜下注射5-氟尿嘧啶的方法建立大鼠慢性高眼压模型。模型建立后1周、1个月,在视网膜铺片上行免疫组织化学染色,在激光共聚焦显微镜下观察视网膜谷氨酸受体(GluR)2以及神经丝蛋白(NF)-68的表达情况。结果结扎上巩膜静脉联合术后球结膜下注射5-氟尿嘧啶可诱导较长时间稳定高眼压,1个月内12只高眼压眼眼压均大于22 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)。在正常对照组及高眼压组,大、中、小直径的 RGC 均可表达 NF-68,但 NF-68在大直径的神经节细胞的表达更为明显。在正常对照组,大鼠大 RGC 均缺乏 GluR2的表达,而中、小直径 RGC 大都可表达 GluR2;高眼压1周以及1个月组,中、小直径 RGC GluR2的表达没有明显变化;高眼压1周,NF-68阳性的大直径的 RGC 仍缺乏 GluR2的表达;但到高眼压1个月,残存 NF-68阳性的大直径的 RGC 开始表达GluR2。结论大 RGC 对高眼压的易损性可能与其特异性缺乏 GluR2表达有关。