人肝癌细胞p53基因的表达及其对细小病毒H-1的敏感性

本文利用单链构象多态性分析,17号染色体短臂等位基因杂合性分析,Northern印迹,免疫沉淀,p53基因第7外显子酶切等技术检测了两个中国人肝癌细胞系SMMC-7721,YY-8103和一个自发转化的人肝细胞系L-02的p53基因结构与表达。实验表明,这三个细胞系中没有出现17号染色体短臂等位基因杂合性缺失,第4—9外显子也没发生突变,但其mRNA和蛋白表达水平很低。利用MTT比色分析法研究了这三个细胞系和其他已知p53基因背景的八个人肝癌细胞系(QGY-7703、PLC/PRF/5、Huh-7、Hep3B、FOCUS、Tong/ HCC、SK-Hep-1、HepG2)对自主性细小病毒H-1的敏感性。除HepG2细胞外,其他十个细胞系p53基因的结构和/或表达都不正常。经H-1感染(moi=20)后,其敏感性均高于HepG2细胞。本研究初步表明了p53基因结构或表达的不正常可能导致人肝癌或转化细胞对H-1的敏感性的提高。

对大鼠PC12细胞用于定量测定神经生长因子活性两种方案的评价

建株的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤ＰＣ１２细胞，在神经生长因子ＮＧＦ的作用下，会长出神经突起．这一现象被用于神经生长因子的活性测定．但就定量测定而言，目前已报道的方法、方案、包括判定阳性细胞的标准，均有一定差异，而我国也尚未建立起对这一重要分子活性的标准测定法．通过比较两种不同的方案，提示高浓度的神经生长因子先行对细胞进行长时间的预处理并非为测定所必需；同时提出了比较简便可行的准则，包括判定阳性细胞的标准，对方法的不足也进行了讨论．

细小病毒H-1用于肿瘤治疗安全性的初步评估

目的 对细小病毒H1用于临床的安全性作初步评估。方法 本文用Ames试验、哺乳动物细胞染色体畸变试验、小鼠骨髓细胞微核试验、过敏试验和热原试验对H1用于肿瘤治疗的临床安全性进行了检测。结果 上述所有试验都呈阴性。同时,小鼠对H1的最大耐受量大于5×1011空斑形成单位kg体重,相当于假定的人的临床剂量的2500倍。对H1的宿主NB324K细胞,进行了软琼脂集落试验和裸小鼠体内成瘤试验,其结果也呈阴性。结论 细小病毒H1对肿瘤治疗是安全的。

Ha-ras和Ki-ras癌基因转染和细胞对小鼠细小病毒杀伤敏感性的相关性(英文)

为研究Ha－ras和Ki－ras癌基因转染和细胞对小鼠细小病毒（MVM）杀伤敏感性间的关系，两个细胞株，即Ki－ras癌基因转化细胞株DT和Ha－ras癌基因转化细胞株REF4-3，被用来作为研究材料．体外细胞集落形成率和细胞在裸小鼠体内的成瘤能力测定显示，和对照细胞NIH／3T3相比，REF4－3和DT对MVM的杀伤作用更敏感．同时，DNA杂交和蛋白免疫沉淀实验结果也显示，在REF-3和DT细胞中，无论是MVM的DNA增殖能力还是其NS－1蛋白的表达能力，均较在其对照组NIH／3T3细胞中高很多．FACA测定也显示，在感染MVM30h后，S期细胞的比例在REF4－3和DT细胞中都有增加，而在NIH／3T3细胞中却略微减少．通过PCR方法也可发现，在受到MVM抑制的REF-3肿瘤中仍可检测到MVM的DNA．