不同来源蜈蚣核苷类成分的UHPLC-QQQ MS分析与评价

目的:建立蜈蚣中核苷类成分的UHPLC-QQQ MS检测方法,并对结果进行分析与评价。方法:采用UHPLC-QQQ MS法同时测定4个省份(安徽、江苏、浙江、湖北)33批蜈蚣样品中的23个核苷类成分,并对结果进行主成分分析(PCA)。结果:蜈蚣中含有丰富的核苷类成分,不同样品核苷类成分含量差异较大,次黄嘌呤的平均含量最高,2′-脱氧腺苷的平均含量最低,S25号样品的核苷总含量最高,S32号样品的核苷总含量最低。PCA结果显示33批蜈蚣样品聚为4类,相同省份蜈蚣样品品质接近,不同省份蜈蚣品质存在差异,提示地域生态环境与蜈蚣品质差异密切相关。综合评价结果显示安徽蜈蚣得分较高,故从核苷类成分角度考虑,安徽蜈蚣的品质较好。结论:该研究建立的蜈蚣中核苷类成分的分析与评价方法可为蜈蚣的质量评价和基础研究提供参考。

黄芩汤对非酒精性脂肪肝大鼠肠道菌群的影响

目的研究黄芩汤对非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肠道菌群的影响。方法将大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(多烯磷脂胆碱,8 mg/kg)组及黄芩汤低、高剂量(5、20 g/kg)组,采用高脂饮食饲喂9周造模。ig给药5周后,采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血脂和肝功能相关指标;采用HE染色法分析各组大鼠肝脏组织病理变化;采用16S rRNA测序技术分析各组大鼠肠道菌群变化。结果与模型组比较,黄芩汤低、高剂量组大鼠体质量明显降低(P<0.05、0.01),血脂指标总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(lowdensitylipoproteincholesterol,LDL-C)和转氨酶指标丙氨酸氨基转移酶(alaninetransaminase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)明显降低(P<0.01),血脂指标高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoproteincholesterol,HDL-C)明显升高(P<0.01),肝细胞脂肪变性与气球样变得到纠正,炎细胞浸润减少。16S rRNA测序结果显示,模型组大鼠肠道菌群较空白组发生变化;黄芩汤低、高剂量组大鼠肠道菌群较模型组sobs、heip和Shannon指数明显提升(P<0.05、0.01);在门和属水平上,黄芩汤高剂量组大鼠肠道菌群较模型组unclassified-f-Lachnospiraceae、布劳特氏菌属Blautia、Eubacterium coprostanoligenesgroup和瘤胃球菌属Ruminococcus丰度明显升高(P<0.05、0.01),放线菌门(Actinobacteria)、乳杆菌属Lactobacillus和双歧杆菌属Bifidobacterium丰度明显降低(P<0.05、0.01)。黄芩汤高剂量组较模型组明显上调京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)和直系同源簇(clusters of orthologous groups,COG)富集的功能水平(P<0.05、0.01)。结论黄芩汤可能通过改善NAFLD大鼠肠道菌群失调发挥对NAFLD的治疗作用。

野黄芩苷调控Wnt/β-catenin信号通路对结肠癌细胞迁移和侵袭的影响

目的观察野黄芩苷(Scu)对人结肠癌细胞迁移和侵袭的影响及相关作用机制。方法采用CCK8法检测40、80、120、160、200、240、280μmol·L^(-1)Scu对人结肠癌SW480和HCT116细胞以及人肾皮质近曲小管上皮HK-2细胞活力的影响,计算半数抑制浓度(IC50)值。采用细胞划痕实验、Transwell细胞迁移和小室侵袭实验检测Scu对SW480和HCT116细胞迁移和侵袭的影响,Western blot法检测50、100、150μmol·L^(-1)Scu对SW480细胞迁移、侵袭、上皮-间质转化(EMT)和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响。结果120、160、200、240、280μmol·L^(-1)Scu显著抑制SW480和HCT116细胞的活力(P<0.01),作用24 h后的IC50值分别为157.7和179.2μmol·L^(-1)。与空白组比较,50、100、150μmol·L^(-1)Scu组SW480和HCT116细胞划痕宽度均增大,迁移细胞数和侵袭细胞数减少(P<0.05),基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、N-钙黏合素(cadherin)、波形蛋白(vimentin)和snail蛋白表达显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.01),β-catenin、c-myc、周期蛋白(cyclin)D1和存活蛋白(survivin)表达显著降低(P<0.05)。结论Scu可抑制结肠癌细胞活力、迁移、侵袭和EMT进程,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。