兽医硕士临床实践的收获与思考

为了强化全日制兽医硕士的临床专业知识,西南大学荣昌校区制定了较为详细的兽医硕士临床实习方案,对兽医硕士的培养方向和培养目标作出了明确要求。部分兽医硕士通过在动物医院和动物疾病快速诊断中心实习,使自己的理论知识得到应用、验证和强化,同时学习到了丰富的兽医临床经验,提升了自己的职业素养。

复方参芩对犬细小病毒致心肌组织Bcl-2和Bax mRNA的影响

为了探讨复方参芩对犬细小病毒致犬心肌组织Bcl-2和Bax基因表达的影响,将丹参、黄芩、甘草等中药配伍并制备成为复方参芩针剂,人工感染犬细小病毒建立模型;将犬分为空白对照组、模型组、黄芪多糖组、复方参芩组;给药7d后,接种病毒,观察各组犬临床症状,取心肌组织,电镜观察心脏组织超微结构变化,采用荧光实时定量PCR法检测Bcl-2和Bax mRNA表达。结果表明,模型组犬死亡率高,心肌组织结构损伤严重,与空白对照组比较,心肌组织细胞Bcl-2mRNA表达下调(P<0.05),Bax mRNA表达增加(P<0.01)。复方参芩组犬存活率较高,心肌组织损伤轻,与模型组相比,心肌组织细胞Bax mRNA表达下调(P<0.01),Bcl-2mRNA表达上调(P<0.01)。通过本试验证明复方参芩可通过上调犬心肌组织细胞Bcl-2mRNA表达,下调Bax mRNA的表达,抑制细小病毒引起的心肌细胞凋亡,保护犬心肌组织免受细小病毒损害。

复方苦芩对感染猪传染性胃肠炎病毒的PK-15细胞中Bcl-2/BAXmRNA转录的影响

【目的】探讨中药复方苦芩对感染猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)的猪肾细胞(PK-15)中凋亡基因Bcl-2/BAX mRNA转录的影响。【方法】体外扩增TGEV,用TGEV感染PK-15细胞的模型进行体外试验研究,试验中设有复方苦芩组、空白组、模型组及黄芪多糖组,在测定了病毒半数感染细胞量(TCID50),复方苦芩及黄芪多糖药液对PK-15细胞的最大无毒浓度后,制作细胞爬片采用瑞士染色法染色观察PK-15细胞的形态变化;按试剂盒操作提取各试验组RNA并及时反转录为cDNA,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中Bcl-2和BAX mRNA转录情况。【结果】与空白组相比,模型组的PK-15细胞发生了明显的细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),细胞变细长,细胞间成网状,细胞核着色较浅,出现核浓缩、固缩、碎裂等现象;与模型组比,复方苦芩组与黄芪多糖组细胞病变得到改善,而复方苦芩组效果更加明显,大部分细胞核结构清晰,染色质着色均一,少部分细胞核变大或碎裂;与空白组相比,模型组Bcl-2 mRNA转录量减少(P<0.01),复方苦芩组Bcl-2基因转录量增加,为模型组的1.403倍(P<0.01)、黄芪多糖组的1.078倍(P>0.05);与空白组相比,模型组BAX mRNA转录量明显升高,而其他3组BAX基因转录差异不明显(P>0.05),模型组BAX基因转录量为空白组的1.440倍、复方苦芩组1.290倍、黄芪多糖组的1.490倍,差异极显著(P<0.01),复方苦芩组、黄芪多糖组BAX基因转录量分别为空白组的1.116倍、0.966倍,差异不显著(P>0.05);与空白组相比,模型组Bcl-2/BAX mRNA转录比值降低,差异极显著(P<0.01);与模型组相比,复方苦芩组、黄芪多糖组Bcl-2/BAX mRNA转录比值均增加,分别为模型组1.809倍和1.940倍,差异极显著(P<0.01),复方苦芩组Bcl-2/BAX mRNA转录比值分别为空白组的0.749倍(P<0.01)、黄芪多糖组的0.933倍(P>0.05)。【结论】复方苦芩可通过上调PK-15细胞Bcl-2 mRNA转录,下调BAX mRNA的转录,从而抑制TGEV引起的PK-15细胞凋亡。

RP-HPLC法测定术苦芩颗粒中黄芩苷和苦参碱含量

为了建立测定术苦芩颗粒中黄芩苷、苦参碱含量的反相高效液相色谱法,采用Wonda Sil?C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,黄芩苷以甲醇-0.4%磷酸溶液(用三乙胺调节p H值至3.0)(52∶48,V/V)为流动相,检测波长为274 nm。苦参碱以乙腈∶甲醇∶0.2%磷酸溶液(用三乙胺调节p H值至7.0)(22∶13∶65,V/V)为流动相,流速为1.0 m L/min,检测波长220 nm;柱温30℃。术苦芩颗粒中黄芩苷和苦参碱分别在浓度为10μg/m L^150μg/m L和10μg/m L^400μg/m L范围内与峰面积均呈良好线性关系,r=0.99991和r=0.99994,平均加样回收率分别为99.32%和98.37%,其相对标准偏差(RSD)分别为0.625%和1.206%。用上述方法分别测定黄芩苷和苦参碱含量条件简单、稳定、快速,可用于检测术苦芩颗粒的质量控制标准。

复方参芩对防止心肌细胞免受犬细小病毒损伤的保护和抗氧化作用

目的:探讨复方参芩防止心肌细胞免受犬细小病毒损伤的保护和抗氧化作用.方法:培养的乳鼠心肌细胞,加入犬细小病毒液致心肌细胞病毒性氧化损伤,测定乳鼠心肌细胞裂解液中SOD,MDA及用MTT法测定细胞活性,探究复方参芩防止心肌细胞免受犬细小病毒损伤的保护和抗氧化作用.结果:病毒损伤组细胞保护率为70.67%±1.33%,复方参芩高、中、低剂量组细胞保护率分别为83.52%,92.35%,80.72%,与病毒损伤组相比有极显著性差异(p<0.01);病毒损伤组细胞裂解液中SOD活性降低,MDA质量分数增高,而复方参芩组上述指标有所改善,其中SOD活性升高,MDA降低,与模型组相比差异极显著(p<0.01).结论:复方参芩可防止心肌细胞免受犬细小病毒损伤,其机理可能与增强细胞抗氧化作用、减少自由基和脂质过氧化导致的细胞损伤有关.

4种羊蹄药材的薄层鉴别及质量评价研究

羊蹄药用始载于《神农本草经》,为蓼科植物羊蹄的根,资源丰富,广泛分布于我国华东、华中、华南等地区[1]。羊蹄中含有蒽醌类、黄酮类及鞣质等成分[2],蒽醌类物质为其主要活性成分,包括大黄素、大黄酚、大黄素甲醚及它们的甙类衍生物。本品味苦,性寒,具有清热通便、凉血止血、杀虫止痒之功效,用于治疗皮肤病、疥癣、各种出血及炎症[3]。现代药理研究结果表明,羊蹄还具有抗真菌、抗肿瘤、抗病毒和抗氧化及保肝利胆等作用[4]。

口腔黏膜给药系统研究进展

口腔黏膜给药使药物通过颈内静脉直接进入全身循环,避免胃肠道中的酸水解及肝脏首过效应,具有生物利用度高、患者依从性良好的优点。口腔黏膜给药的主要特点是利用生物粘附现象,即生物膜表面与天然或合成聚合物之间的界面分子粘合力现象,延长制剂在生物黏膜表面上的停留时间,以获得更高、更稳定的药物吸收。对口腔黏膜的结构特征、黏膜生物粘附机制、影响黏膜粘附的因素、口腔黏膜剂型设计以及口腔黏膜给药系统的研究进展进行了介绍。

HPLC法测定银黄注射液中绿原酸和黄芩苷含量的研究

银黄注射液是由金银花、黄芪经提取制备而成的复方注射液，具有清热解毒、宣肺燥湿等功效，用于治疗鸡大肠杆菌病，已取得农业部三类新兽药注册证书。现行银黄注射液质量标准中，采用不同的液相色谱条件分别对绿原酸和黄芩苷的含量进行测定，检测耗时较长，影响生产和质量控制的效率。本研究旨在建立能够同时测定银黄注射液中绿原酸和黄芩苷含量的高效液相色谱（HPLC）方法，以提高检测效率，节约测试用试剂。