温州地区鼠类肝毛细线虫流行学和生物学研究

目的 :了解温州地区鼠体肝毛细线虫的感染情况 ,为肝毛细线虫病防治提供科学依据 ,并探讨肝毛细线虫幼虫经皮肤和经腹腔注射感染小白鼠的可行性。方法 :从温州境内部分地区收集鼠体以检查肝毛细线虫虫卵 ,分离虫卵并培养成幼虫作感染小白鼠试验。结果 :温州地区鼠及臭 毛细线虫总感染率是 18.3% ,不同鼠种和栖居范围不同的鼠体感染率不同 ,鼠体感染率和感染度随鼠体年龄增大而增高 (强 )。肝毛细线虫幼虫经皮肤和经腹腔注射感染小白鼠获得成功。结论 :温州地区各种鼠体均有肝毛细线虫感染 。

脉孢菌纤溶酶的纯化和性质初步研究

应用超滤、盐析、凝胶过滤和疏水相互作用层析对脉孢菌产纤溶酶初步纯化后,活性电泳证实获得单一的纤溶活性组分.对该纤溶组分的基本酶学性质作了进一步的研究,结果表明该纤溶酶的最适作用温度和最适pH分别是46℃和7.8,在40℃以下和pH6.2～7.8时稳定,该纤溶酶具有直接和间接的纤溶活性.

树状多节孢原生质体的制备和再生

研究了酶系组成、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂、pH值、培养基成分、培养方式、预处理、保护剂等因素对紫杉醇产生菌树状多节孢原生质体制备和再生的影响 .结果表明 :将树状多节孢在PDA液体培养基中静止培养 2～3d ,离心收集菌体 ,用 pH 5 .5～ 6 .0的 0 .7mol/L的NaCl配制成的含有 3%纤维素酶、2 %蜗牛酶和 1%溶菌酶的复合酶 ,30℃恒温酶解 9h ,原生质体制备率最高。但是考虑到原生质体的再生 ,以酶解 7h左右为宜 .获得的原生质体经过纯化 ,用 0 .7mol/LNaCl配制的PDA再生培养基进行双层平板培养法再生 ,原生质体的再生率最高 .本研究为以后通过原生质体诱变、转化、融合构建紫杉醇工程菌株奠定了基础 .图 3表 9参

树状多节孢发酵生产紫杉醇工艺条件的初步研究

研究了树状多节孢HQD33内生真菌融合子TPF-1摇瓶发酵工艺条件,进行了2.8L和10L通用式机械搅拌罐的发酵试验。结果表明,HQD33适宜发酵工艺条件是:发酵时间16～18d,培养基中蔗糖、苯丙氨酸、醋酸钠、酪氨酸、2,4-二氯苯氧乙酸和亚油酸的加量分别为10g/L、1mg/L、1.5g/L、15mg/L、5mg/L和15mg/L,摇瓶装量为150ml/500ml,在此条件下摇瓶发酵液中紫杉醇平均含量为448.52 g/L; 2.8L和10L罐发酵液中紫杉醇含量达406.95和395.12g/L(平均值)。

紫杉醇产生菌HQD33的鉴定

通过对紫杉醇产生菌HQD33的群体形态和菌丝、分生孢子梗、产孢细胞、分生孢子等个体形态的研究 ,确定了HQD33的分类地位 ,为树状多节孢。

温州福寿螺体内广州管圆线虫幼虫分布情况的研究

目的了解温州福寿螺体内广州管圆线虫幼虫的分布情况，为防治提供依据。方法人工消化３６１只福寿螺。结果福寿螺感染率为６９．４％。幼虫在螺体内分布依次为腮６１．３％，肾１６．３５％，消化道１２．６２％，肌肉９．９３％，肝０．７％。结论福寿螺内脏及肌肉中幼虫感染率均高于国内其他疫螺。

ELISA法检测广州管圆线虫感染实验大鼠血清抗体

目的 探讨ＥＬＩＳＡ法检测广州管圆线虫血清抗体的可行性，从而为广州管圆线虫病的免疫诊断提供实验依据。方法 用雌性成虫粗抗原作ＥＬＩＳＡ检测不同时期实验大鼠血清抗体，并选用四种对照血清，以比较该法的特异性。结果 大鼠血清抗体在感染后２０ｄ 适宜检测，４０ｄ 左右达最高峰，８０ｄ 仍维持阳性检测水平。ＥＬＩＳＡ 法对旋毛虫抗体阳性血清、犬弓蛔虫抗体阳性血清、肺吸虫抗体阳性血清和日本血吸虫抗体阳性血清的假阳性率分别是２０－０％ 、１０－０ ％ 、０％ 和０％ 。结论 ＥＬＩＳＡ法用于检测广州管圆线虫血清具有较高的敏感性和特异性。大鼠血清抗体的最佳检测时间是在感染后３０ ～５０ｄ。

温州福寿螺体内首次发现广州管园线虫幼虫

温州福寿螺体内首次发现广州管园线虫幼虫潘长旺邢文鸾梁韶辉黄慧聪凌洪博刘启真郑晓云金永国温州医学院寄生虫学教研室（３２５００３）易维平、林宝楚温州市卫生防疫站广州管园线虫（Ａｎｇｉｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓｃａｎｔｏｎｅｎｓｉｓ）寄生于野鼠及褐家鼠肺部血管...

温州地区鼠体广州管圆线虫的感染情况

目的 :了解温州地区广州管圆线虫终宿主感染情况 ,为本地区广州管圆线虫防治工作提供参考依据。方法 :剖检温州各地捕获之鼠 2 0 6 9只。结果 :鼠平均感染率为 15 .3% ,褐家鼠、黄毛鼠、黄胸鼠感染率分别为 2 0 .4%、6 .0 %、4.6 %。结论 :温州地区鼠类广泛感染广州管圆线虫 ,其中褐家鼠是最主要的终末宿主 。

广州管圆线虫感染小鼠后在其体内分布及小鼠组织病理学实验观察

为观察广州管圆线虫感染小鼠后在小鼠体内的分布及对小鼠的致病作用 ,以广州管圆线虫第三期幼虫人工感染实验小鼠 ,分批处死后 ,镜检并记录各部位虫体 ,同时进行组织病理学观察。结果感染不同时间后 ,小鼠肝、心、肺、脑、脊髓、肾、眼球、肌肉等部位均发现有幼虫寄生 ,其中脑、脊髓是广州管圆线虫的主要寄生部位。虫体寄生部位因虫体的机械作用和炎症反应而受损。

产纤溶酶菌株根霉12^#的诱变育种及固态发酵培养基的优化

以产纤溶酶的菌株根霉 12 # 为出发菌株 ,对其进行紫外线 氯化锂复合诱变 ,筛选到74株制霉素抗性突变株。所有抗性突变株经进一步固态发酵筛选 ,获得了 4株稳定高产纤溶酶的正突变株 ,其纤溶酶产量分别比出发菌株提高 3 2 9%、2 1 5 %、2 2 3 %和 18 0 %。以其中的 1株为菌种 ,研究了固态发酵产生纤溶酶的培养基组成。采用单因素试验、均匀设计方法对固态发酵培养基的碳源、氮源、碳氮比、初始pH、加水量、无机盐加量进行了优化。结果表明 ,实验范围内根霉 12 # 固态发酵产生纤溶酶的适宜培养基组成为 :m (麸皮 )∶m (豆粕 )=1∶2 ,初始 pH5 0 ,加水量 0 75mL/g物料 ,MnSO4·H2 O和 (NH4) 2 SO4加量分别为 0 2 5 %和1 42 % (对物料 )。优化条件下的固态发酵纤溶酶产量平均达 744 5 7U/g物料。

广州管圆线虫的抗原定位研究

目的 为广州管圆线虫抗原的分离、纯化及广州管圆线虫病的免疫诊断等提供实验依据。 方法 运用间接荧光抗体试验 (IFAT)和免疫金银染色试验 (IGSS)对广州管圆线虫的抗原定位进行研究。 结果 在 IFAT中 ,广州管圆线虫的肠管壁、子宫内虫卵的卵细胞、卵巢和皮层具有特异性荧光 ,提示这些器官具有抗原性。而在 IGSS中 ,广州管圆线虫的抗原定位器官只有肠管壁、子宫内虫卵的卵细胞和卵巢 ,而不包括皮层。 结论 虫体的肠管壁是主要的抗原定位器官 ,虫体子宫内虫卵和卵巢亦显示有抗原性 ,这些器官中的抗原与感染宿主的免疫密切相关。

产纤溶酶菌株根霉12#的诱变育种

以产纤溶酶的华根霉12＃为出发菌株,对其进行紫外线-氯化锂复合诱变,筛选到74株制霉素抗性突变株。所有抗性突变株经进一步固体发酵筛选,获得了4株稳定高产纤溶酶的正突变株,其纤溶酶产量分别比出发菌株提高32.9%、21.5%、22.3%和18.0%。

温州地区广州管圆线虫病的研究

目的 :阐明温州地区 1997年 10～ 11月暴发流行“酸脑”的病因 ,并为该病的防治提供科学依据。方法 :分析患者发病过程及临床症状 ,针对性开展温州地区广州管圆线虫病流行学调查 ,同时用免疫学试验作临床辅助诊断。结果 :温州存在广州管圆线虫的自然疫源地 ,主要中间宿主 (福寿螺 )及终末宿主的感染率分别为 6 9.4 %和 19.5 % ;患者皮内试验及间接荧光抗体试验阳性率分别为 10 0 %和 90 .6 % ,ELISA法用于检测广州管圆线虫血清具有较高的敏感性和特异性。结论 :确定温州地区此次爆发流行的“酸脑”为广州管圆线虫病 ,温州地区为广州管圆线虫病流行区。

广州管圆线虫成虫可溶性抗原诱导小鼠保护性免疫的研究

目的 探讨广州管圆线虫成虫可溶性抗原诱导小鼠的保护性免疫 ,为广州管圆线虫病的免疫预防研究提供科学依据。方法 以广州管圆线虫成虫可溶性抗原隔周腹腔注射免疫小鼠 1次 ,共 3次 ,末次免疫 1w后 ,用 30 0条广州管圆线虫第三期幼虫感染每鼠 ,攻击感染 4w后解剖每鼠检获虫体 ,计算减虫率 ,并观察、测量检获虫体形态、大小。此外 ,还检测了小鼠体内血清特异性抗体IgG和血液嗜酸性粒细胞含量。 结果 免疫组小鼠与对照组比较 ,有极显著的减虫效果 (P <0 .0 1) ,80 0 μg、40 0 μg和 2 0 0 μg免疫原组小鼠的减虫率分别是 44 .0 %、42 .6 %和 18.7%。免疫组小鼠体内检获的虫体比对照组要少。免疫组小鼠血清抗体水平及血液嗜酸性粒细胞绝对值均高于对照组 (P <0 .0 1)。

根霉12号固体发酵产生纤溶酶工艺条件的研究

研究了根霉12号固体发酵产生纤溶酶的工艺条件。采用单因素试验、均匀设计方法对固体发酵培养基的碳源、氮源、碳氮比、初始pH、加水量、无机盐加量进行了优化;采用正交试验对发酵时间、接种量进行了研究。结果表明,实验范围内根霉12固体发酵产纤溶酶的适宜培养基组成为:麸皮∶豆粕=1∶2,初始pH5.0,加水量0.75ml/g物料, MnSO4H2O和 (NH4)2SO4加量分别为0.25%和 1.42%(对物料)。适宜培养条件为接种量107个孢子/g物料,培养时间72h。优化条件下的纤溶酶产量平均达791.81u/g物料。

ELISA法诊断实验性大鼠肝毛细线虫病

目的 :实验研究肝毛细线虫对大鼠的血清抗体水平的影响 ,为人体肝毛细线虫病的免疫诊断提供科学依据。方法 :捕获阳性鼠分离肝毛细线虫虫卵 ,将虫卵培养至感染期 ,感染大白鼠。制作虫卵可溶性抗原 ,用ELISA法对大鼠体内血清抗体作动态检测 ,并选用 5种对照血清作比较 ,以观察该法的特异性。结果 :大鼠在感染 4周后可全部阳性检出 ,该法对大鼠旋毛虫、日本血吸虫、犬弓蛔虫、广州管圆线虫和肺吸虫抗体阳性血清分别有 2 /10、2 /10、2 /10、1/10和 0的假阳性。结论 :ELISA法具有较高的敏感性和特异性 ,适用于检测肝毛细线虫感染。

Rhizopus chinensis 12^#发酵产生纤溶酶的分离提纯

分离自南方小酒药的华根霉12#(Rhizopuschinensis12#)以豆粕和麸皮为原料固体发酵可产生多种纤溶活性组分.采用饱和度40%～70%的硫酸铵溶液分步盐析、OctylSepharoseFastFlow疏水层析、Q SepharoseHighPerformance离子交换层析和SephacrylS 100凝胶层析方法对活性组分进行分离提纯,得到电泳纯的纤溶酶.SDS PAGE方法测定该酶相对分子质量为18000,凝胶过滤方法测定相对分子质量为16600,表明该酶由单亚基组成.

ELISA法检测人体广州管圆线虫血清抗体的研究

１９９７年１０－１１月，温州市暴发流行以剧烈头痛、恶心、呕吐、低热等为主要症状的嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎（简称“酸脑”）［１］。流行病学调查表明，其中有１８例患者在发病前１０－１５天在温州某饭店聚餐，并生吃含有广州管圆线虫幼虫的福寿螺，另有７例也主诉...