海带渣中岩藻黄素的酶法提取工艺研究

岩藻黄素是海洋藻类特有的一种叶黄素物质,具有强抗氧化活性,在缓解视疲劳、抗衰老、预防心血管疾病等方面具有巨大的开发利用价值。本文以海带加工企业提取海藻胶后的海带渣为原料,以纤维素酶、果胶酶及其组成的复合酶(纤维素酶+果胶酶)为工具酶,采用生物酶法破壁技术,研究加酶量、p H、时间、温度等因素对岩藻黄素提取的影响。结果表明:与传统提取方法相比(得率为0.034%),经酶法破壁处理,纤维素酶处理组的岩藻黄素得率为0.046%,果胶酶处理组得率为0.124%,复合酶处理组得率为0.137%。最终选定果胶酶法为岩藻黄素提取的最佳方法,工艺条件为:果胶酶加酶量20000U·kg-1,酶解p H5.0,酶解温度60℃,酶解时间90min,得率为0.124%。该提取方法具有得率高、绿色环保等优势,为利用海藻岩藻黄素开发高附加值药物、功能食品提供了技术支持。

低分子量岩藻聚糖酶法制备工艺

为了获得分子量集中,生物活性显著的岩藻低聚糖片断,该试验从九孔鲍肝胰腺中分离纯化出岩藻聚糖裂解酶裂解岩藻聚糖。通过等电点法、硫酸铵分布盐析法及Sephadex G-150柱分离纯化出2种底物酶(岩藻聚糖酶、α-L-岩藻糖苷酶),同时采用黏度和还原糖法作为酶活的评价指标评价酶的作用特点。结果表明:等电点法中pH值4.5、5.0时的沉淀物酶活最高,且pH值4.5的沉淀物在硫酸铵质量分数为30%时分离纯化出岩藻聚糖酶,而pH值5.0的沉淀物在硫酸铵质量分数40%时分离纯化出α-L-岩藻糖苷酶。此种工艺方法能得到2种岩藻聚糖裂解酶,底物降解率为8%～15%,获得硫酸基团破坏性小的低分子量岩藻聚糖。因此,九孔鲍岩藻聚糖裂解酶可作为酶法制备低分子量岩藻聚糖的工具酶,具有重要的开发应用价值。

低分子量岩藻聚糖制备工艺及其抗菌活性的研究

采用超声波辅助过氧化氢的方法降解岩藻聚糖,采用膜分离制备分子量>50 ku和<50 ku 2个组分的低分子量岩藻聚糖组分,并以未降解的岩藻聚糖为对照测定其抗菌活性。通过多糖降解率、硫酸基团保留率和抗菌生物学活性的比较研究证明,超声波辅助降解2 h时的降解效果较好,此时的水解率为30.73%,硫酸基团保留率在24.71%,抑菌圈直径为25 mm。此条件下所制备的低分子量岩藻聚糖具有较好的理化性质及抗菌生物学活性。

硫酸酯化对测定多糖分子量的干扰性研究

硫酸酯化赋予了多糖独特的抗病毒、抗凝血等生物活性,但其活性严格受控于分子量大小。然而,用于检测硫酸多糖分子量的方法仍然采用葡聚糖为标准品,必然出现对活性硫酸多糖分子量的误判。本文通过对比标准葡聚糖和葡聚糖硫酸酯的特征粘性参数,观察两种多糖的流变力学差异性;并采用改良Mark-Houwink-Sakurada(MHS)模型和常规柱层析技术探讨硫酸酯化对多糖分子量测定的干扰性。结果发现:葡聚糖与葡聚糖硫酸酯表现出不同的流体力学性质,葡聚糖浓度与比浓粘度关系式斜率为正,而葡聚糖硫酸酯浓度与其比浓粘度关系式斜率为负;改良MHS模型发现,两种多糖的DB方程式特性常数出现明显差异;凝胶柱层析分析发现,如果采用葡聚糖为标准品,葡聚糖硫酸酯的分子量会远大于其真实值。以上结果说明,硫酸酯化会对多糖的流变特性产生影响,是造成常规检测方法误判硫酸多糖分子量的根本原因。