流式细胞术检测食管癌细胞DNA含量的临床意义

目的了解食管癌细胞DNA指数(DI)、S期细胞百分率(SPF)、细胞增殖指数(PI)的临床意义。方法应用流式细胞仪检测64例食管癌手术标本的癌细胞和距癌远端食管切缘粘膜细胞DI、SPF、PI值,并结合随访资料进行临床病理分析。结果根据DI值,研究对象分为二倍体组(0.90～1.10),亚二倍体组(1.11～1.20)和异倍体组(>1.20),分别占53.1%(34/64),21.9%(14/64),25.0%(16/34)。异倍体癌细胞DI、SPF、PI值高于二倍体组(P<0.01)。食管癌异倍体组I～II期病例占18.8%(3/16),低于二倍体组52.9%(18/34)(P<0.05)。食管癌异倍体组无淋巴结转移病例占25.0%(4/16),低于二倍体组55.9%(19/34)(P<0.05)。异倍体组与亚二倍体组同时SPF>10%的患者中无淋巴结转移例数占29.4%(5/17),低于二倍体组无淋巴结转移例数52.9%(18/34),有统计学差异(P<0.05)。结论食管癌细胞DI值与临床分期、淋巴结转移密切相关。与食管癌患者生存无显著相关,同时癌细胞的SPF值与淋巴结转移密切相关。

术前消化道恶性肿瘤患者外周血Th1/Th2细胞外因子漂移分析

目的探讨术前消化道肿瘤患者血清中Th1/Th2细胞因子的漂移情况。方法收集食管癌患者163例,胃癌患者24例,肠癌患者80例,另选取70例健康体检者(对照组)进行试验。流式细胞小球微阵列术(CBA)检测两组血清中Th1类细胞因子[干扰素(IFN-)、肿瘤坏死因子-(TNF-)、白介素-2(IL-2)]与Th2类细胞因子[(白介素-10(IL-10)、白介素-5(IL-5)、白介素-4(IL-4)]的水平。结果食管癌组的IL-5水平与对照组差异有统计学意义(<0.05);胃癌组的IFN-水平与对照组差异有统计学意义(<0.05),IL-4水平与对照组差异有统计学意义(<0.05);肠癌组的IL-5水平与对照组差异有统计学意义(<0.05),IL-4水平与对照组差异有统计学意义(<0.05)。食管癌和肠癌患者为Th2上漂,胃癌患者为Th1、Th2双上漂。结论分析细胞因子漂移变化特点,以了解患者Th1/Th2类细胞因子的免疫调节功能状况,能为术前消化道肿瘤患者的免疫治疗提供依据。

食管癌细胞中c-erbB-2与P-gp表达的相关性

目的 探讨食管癌细胞c erbB 2与多药耐药性相关性及其临床意义。方法 用免疫组化方法检测癌细胞c erbB 2和用流式细胞术检测了 4 6例食管癌手术标本中癌细胞P 糖蛋白 (P gp)表达水平 ,并进行相关性分析。 结果 食管癌中c erbB 2表达阳性 12 / 4 6例 (2 6 1% ) ;P gp表达阳性 2 8/ 4 6例 (6 0 9% )。食管癌淋巴结转移情况与c erbB 2和P gp表达比较发现 ,在c erbB 2阳性时淋巴结有转移 (31 0 9%± 5 33% )与无转移 (8 0 4 %± 3 0 3% )组的P gp表达比较差异有显著性(P =0 0 0 73) ,而在c erbB 2阴性时淋巴结转移情况与P gp表达无相关性。食管癌临床分期与c erbB 2和P gp表达比较发现 ,在c erbB 2阳性时 ,Ⅲ～Ⅳ期 (33 6 8%± 5 5 1% )与Ⅱ期 (9 30 %± 2 78% )组P gp表达比较 ,差异有显著性 (P =0 0 0 2 7) ,而在c erbB 2阴性时临床分期与P gp表达无相关性。食管癌肿瘤大小、肿瘤分化程度与c erbB 2和P gp表达均无相关性。结论 在c erbB 2表达阳性时食管癌中有淋巴结转移、临床Ⅲ～Ⅳ期患者与P gp表达升高有相关性 ,提示双阳性时肿瘤患者预后较差。但在c erbB 2表达阴性时食管癌有淋巴结转移、临床分期与P

外周血IL-2水平状态与淋巴细胞亚群比例的关系在乳腺良恶性肿瘤之间的区别

目的:分析外周血白细胞介素2(IL-2)水平与淋巴细胞亚群比例的关系在乳腺良恶性肿瘤患者之间的区别及临床意义。方法:用流式荧光免疫微球分析技术检测46例乳腺癌及41例乳腺增生症伴乳腺纤维腺瘤形成患者外周血Th1/Th2细胞因子水平,用流式荧光免疫标记技术检测患者外周血CD25+IL-2受体细胞(CD25+IL-2R)、CD3+总T淋巴细胞(CD3+T)、CD4+辅助T辅助细胞(CD4+TH)、CD8+杀伤/抑制T细胞(CD8+TCS)、CD56+NK细胞(CD56+NK)和CD19+总B淋巴细胞(CD19+B)比例。结果:外周血IL-2水平和淋巴细胞亚群比例在乳腺良恶性肿瘤患者之间差异无统计学意义,P>0.05;在乳腺癌中,IL-2水平在检测线以下组(IL-2=0)与检测线以上组(IL-2>0)比较,CD25+IL-2R细胞、CD4+TH细胞和CD56+NK细胞比例(%)差异有统计学意义,与IL-2水平呈负相关;在乳腺良性肿瘤中,IL-2水平在检测线以下组(IL-2=0)与检测线以上组(IL-2>0)比较,CD19+B淋巴细胞比例差异有统计学意义(P=0.05),与IL-2水平呈负相关。结论:乳腺癌患者外周血IL-2水平状态与IL-2-R细胞、Th细胞、NK细胞比例呈负相关,乳腺良性肿瘤患者外周血IL-2水平状态与总B淋巴细胞比例呈负相关。

毛兰素诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡的实验研究

[目的]研究毛兰素诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡的机制。[方法]MTT法检测毛兰素对人胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制作用,Annexin-Ⅴ/PI双染色法流式细胞仪检测细胞凋亡率,PI染色法流式细胞仪定量检测细胞周期分布变化,同时比色法检测细胞caspase-3活性变化。[结果]毛兰素能明显抑制胃癌细胞SGC-7901增殖,且呈浓度依赖关系,48hIC50值为0.056μg/ml;毛兰素能诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡且呈时间和浓度依赖性,使细胞周期阻滞于S期,但未见caspase-3激活。[结论]毛兰素能诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡,可能与使细胞周期阻滞于S期有关,但未见caspase-3激活。

卵巢恶性肿瘤手术及化疗前后外周血免疫细胞亚群的检测

目的：探讨卵巢恶性肿瘤手术及化疗前后外周血免疫细胞亚群的改变及临床意义。方法：采用单克隆抗体和流式细胞仪对208例卵巢恶性肿瘤手术前后、化疗前后和200位正常人对照组进行外周血免疫细胞亚群动态检测并比较活性。结果：肿瘤组手术前CD3、CD4、CD4／CD8和NK显著低于对照组，P值分别为0．000、0．000、0．000和0．009。手术后较手术前IL-2和CD3升高，P值分剐为0．000和0．000。化疗后较化疗前CD3、CD4和CD4／CD8升高，P值均为0．000；NK下降，P=0．009。Ⅲ～Ⅳ期较Ⅰ～Ⅱ期CD3、CD4、CD4／CD8和NK下降，P值分别为0．003、0．000、0．000和0．000。不同细胞分化程度术前各项指标差异无统计学意义，P〉0．05。结论：卵巢恶性肿瘤患者细胞免疫功能低下，手术创伤可导致免疫力下降。疾病分期晚者免疫力差。手术、化疗后由于肿瘤负荷、抑制因子减少免疫力逐渐上升。

中药长必安复方浸膏溶液对人盲肠腺癌细胞系HCe-8693作用的体外研究

目的:探讨中药长必安对体外培养的人盲肠未分化腺癌细胞系(HCe一8693)的影响及其机制,并为临床使用该药治疗大肠癌提供理论依据。方法:用长必安复方浸膏溶液对HCe-8693细胞进行了体外实验,观察了不同浓度的中药对HCe-8693细胞生长、细胞集落形成率、细胞增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响。结果:中药长必安对HCe-8693有明显的抑制作用。作用随浓度增加而增强,并以联合用药组对细胞的抑制作用为最明显。用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的结果表明,该中药主要是阻滞细胞周期中G_2+M时相细胞。细胞凋亡现象也随中药浓度增高而凋亡率升高。结论:中药长必安能抑制人肠癌细胞的增殖,并能诱导肠癌细胞凋亡。当中药长必安与氟脲嘧啶(5-FU)联合用药时效果更佳,显示了中药长必安协同并增强了5-FU的抗肠癌作用。

肿瘤患者外周血粘附分子检测的临床意义

目的 研究正常人外周血(PB)中粘附分子(CD44)水平及肿瘤患者PB中CD44水平的临床意义。 方法 用流式细胞术检测32例正常人、21例非肿瘤患者和184例肿瘤患者PB中CD44水平和免疫细胞亚群,并进行统计学比较。 结果 正常人PB中CD44水平为(4897±246)%,正常人PB中CD44水平在年龄、性别上无统计学差异。18例非肿瘤患者(4917±317)%与正常人比较差异无显著性。良性肿瘤患者(6189±303)%与正常人比较有非常显著性差异(P<001),恶性肿瘤未转移患者(6311±209)%、恶性肿瘤有局部转移患者(6331±179)%、晚期或复发患者(7172±171)%、恶性淋巴瘤(6945±314)%、脑肿瘤(7580±581)%与正常人比较均有非常显著性差异(P<0001)。晚期或复发组与良性肿瘤组、恶性未转移组、恶性局部转移组比较均有非常显著性差异(P<001),与恶性淋巴瘤、脑肿瘤比较无显著性差异(P>005)。3例结核患者有2例CD44水平较高(71%和73%)。 结论 肿瘤患者PB中CD44水平升高可提示肿瘤复发或属于晚期病人,可能存在远处转移。

食管癌细胞中粘附分子CD44表达及其临床意义

目的:探讨CD44粘附分子在食管癌细胞中的表达情况及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测65例食管癌细胞和食管切缘粘膜细胞中的CD44表达率,进行临床病理分析和统计学比较。结果:食管癌细胞的CD44表达率明显高于食管切缘粘膜细胞(P<0.001),中低分化食管癌细胞的CD44表达率高于高分化食管癌细胞(P<0.05),伴有淋巴结转移的食管癌细胞CD44表达率高于无淋巴结转移的食管癌细胞(P<0.05),Ⅲ～Ⅳ期食管癌细胞的CD44表达率高于Ⅱ期食管癌细胞(P<0.05)。结论:检测食管癌细胞的CD44表达水平,可为临床提供判断食管癌患者临床分期和预后的参考指标。

食管癌P-gp和P27表达水平及对生存的影响

目的:研究食管癌细胞多药耐药性和细胞周期调控因子表达水平及对患者生存期的影响。方法:用免疫组化方法检测了104例有随访资料的食管癌手术标本中癌细胞P-糖蛋白(P-gp)和细胞周期调控因子(P27)表达水平,并进行临床病理分析。结果:104例食管癌P-gp表达阴性70例(67.3%);阳性表达34例,其中轻度表达6例(5.7%)、中度表达18例(17.3%)、重度表达10例(9.6%)。P27表达阴性34例(32.7%);阳性表达70例,其中轻度表达7例(6.7%)、中度表达42例(40.4%)、重度表达21例(20.2%)。在生存3年以上组P-gp表达阳性占17.5%(10例),而3年内死亡组P-gp表达阳性占53.3%(24例),两组比较差异有非常显著性(P<0.0001)。P-gp过表达与癌细胞恶性生物学行为和死亡率成正相关。生存3年以上组P27表达阳性占75.8%(44例),而在3年内死亡组P27表达阳性占56.5%(26例),两组比较差异有显著性(P<0.05)。P27过表达与癌细胞恶性生物学行为和死亡率呈负相关。肿瘤的分化程度在生存组与死亡组比较差异有显著性(P<0.05)。肿瘤的浸润深度在生存3年以上组浸润全层仅占53.4%(31例),而在3年内死亡组浸润全层占82.6%(38例),两组比较差异有非常显著性(P<0.01)。淋巴结有无转移的生存组与死亡组比较差异有显著性(P<0.05)。临床分期在生存组与死亡组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:P-gp过表达与癌细胞恶性生物学行为和死亡率成正相关。P27过表达与癌细胞恶性生物学行为和死亡率呈负相关。检测P-gp和P27表达水平可为临床提供选择化疗方案的参考依据。肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期是影响食管癌患者生存的重要因素。

中药长必安对人大肠癌细胞体外作用的研究

目的:探讨中药长必安(简称长必安)抗人大肠癌细胞的作用机制。方法:采用血清药理学方法,设长必安低、中、高浓度组,氟脲嘧啶(5-FU)作为阳性对照组和联合用药(长必安加5-FU)组,与我所自建的两株人大肠癌细胞系,观察了中药长必安的抗肠癌作用。结果:长必安对肠癌细胞有抑制生长和杀伤作用,其程度随长必安浓度的增高而增强。当长必安与5-FU 联合用药时对大肠癌细胞的杀伤作用更强,显示了长必安协同并增强了5-FU 的抗肿瘤作用,长必安主要对G_2+M 期细胞有阻滞作用,并能诱导细胞凋亡。结论:长必安对肠癌细胞有抑制生长和杀伤作用,长必安能协同并增强5-FU 的抗肿瘤作用。

胃癌细胞增殖与P-gp表达的相关性研究

目的了解胃癌细胞增殖和P-糖蛋白(P-gp)表达水平的临床意义。方法采用流式细胞术(FCM)检测95例胃癌手术标本P-gp、DNA指数(DI)、S期细胞百分率(SPF)和细胞增殖指数(PI),结合临床病理资料进行相关性分析。结果胃癌P-gp表达阴性39例(41.1%);P-gp表达阳性有56例(58.9%),其中轻、中度表达有29例(30.5%),重度表达有27例(28.4%)。95例胃癌中非整倍体肿瘤48例(50.5%),非整倍体肿瘤SPF和PI显著高于二倍体肿瘤(P<0.01),非整倍体肿瘤P-gp表达低于二倍体肿瘤,但差异无统计学意义。胃癌低分化组与中分化组的肿瘤倍体例数比较有非常显著性差异(P<0.01);胃癌中-低分化组与中分化组的肿瘤倍体例数比较有非常显著性差异(P<0.01)。以胃癌发生部位、肿瘤大小、临床分期和有无淋巴结转移进行分组比较SPF、PI、P-gp和倍体关系,均无显著性差异。结论用FCM检测胃癌P-gp表达水平和DNA倍体可为临床选择适当的化疗方案提供参考依据。

乳腺良、恶性肿瘤患者血清Th1/Th2细胞因子的比较

[目的]探讨乳腺良、恶性肿瘤患者血清Th1/Th2细胞因子是否存在差异及其临床意义。[方法]用流式荧光免疫微球分析技术(flowfluorenscenceimmunmicrobeadsassay,FFIA)检测60例乳腺癌患者及40例乳腺良性肿瘤患者血清Th1、Th2细胞因子水平。Th1型细胞因子包括:IL-2、TNF-α、IFN-γ;Th2型细胞因子包括:IL-4、IL-5、IL-10。[结果]乳腺良、恶性肿瘤患者血清Th1/Th2细胞因子水平差异无显著性(P>0.05)。[结论]与乳腺良性肿瘤比较,乳腺癌患者血清Th1/Th2细胞因子FFIA检测未发现Th1向Th2的偏移,临床意义有限。

胃癌组织中c-erbB-2与P-gp表达的相关性研究

目的了解胃癌组织中c-erbB-2表达与多药耐药的相关性及其临床意义。方法采用免疫组化方法检测了98例胃癌组织中c-erbB-2表达,应用流式细胞术(FCM)检测癌细胞P-糖蛋白(P-gp)水平,并对其进行相关性分析。结果胃癌组织中c-erbB-2阳性表达33例,阳性率33.67%;P-gp阳性表达58例,阳性率59.18%。在c-erbB-2表达阴性的病例累及2～3个部位的癌比累及1个部位癌的P-gp表达增多,两组比较有显著性差异(P=0.035)。当c-erbB-2和P-gp表达双阳性时,P-gp表达增多与双阴性组比较有非常显著性差异(P<0.001);当c-erbB-2或P-gp表达单阳性时,P-g表达增多与双阴性组比较有非常显著性差异(P<0.001);胃癌c-erbB-2和P-gp表达与患者年龄、性别、临床分期、胃癌分化程度和3年生存情况分析,均无统计学意义。结论同时检测胃癌c-erbB-2和P-gp表达水平,可为胃癌的综合治疗及化疗药物选择提供临床参考依据。但是不能用来判断胃癌患者预后。

毛兰素对胃癌细胞SGC-7901端粒酶活性的影响

目的探讨毛兰素对胃癌细胞端粒酶活性的影响。方法MTT法检测毛兰素对人胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制作用,AnnexinⅤ/PI双染色法流式细胞仪检测细胞凋亡率,TRAP实时荧光定量PCR检测端粒酶活性。结果毛兰素能抑制胃癌细胞SGC-7901增值,48小时IC50值为0.056μg/ml;毛兰素抑制胃腺癌SGC-790细胞端粒酶活性早于诱导凋亡,且都表现为时间和浓度依赖性。结论毛兰素能诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡,可能与其对端粒酶活性的抑制有关。

乳腺良 恶性肿瘤患者血清Th1/Th2细胞因子中IL-2特点

目的分析乳腺良、恶性肿瘤患者血清Th1/Th2细胞因子中IL-2的特点及其意义。方法用流式荧光免疫微球分析技术(Flow Fluorenscence Immunmicrobeads Assay,FFIA)检测乳腺良、恶性肿瘤患者血清Th1/Th2细胞因子水平。Th1型细胞因子包括IL-2、TNF-α、IFN-γ,Th2型细胞因子包括IL-4、IL-5、IL-10。结果乳腺良、恶性肿瘤患者血清IL-2水平在检测线以下(IL-2=0)的分别为34.1%(15/44)和42.8%(20/47),明显不同于其他细胞因子。在乳腺良、恶性肿瘤患者中,血清IL-2=0组,IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-10水平均相应较低,与血清IL-2>0组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05)。乳腺恶性肿瘤中,IL-2水平与肿瘤大小及淋巴结转移状态无相关性。结论乳腺良、恶性肿瘤患者血清IL-2水平可能影响IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-10表达,在乳腺恶性肿瘤中IL-2水平状态与肿瘤大小及淋巴结转移状态无相关性。

检测肺癌病人血清中Th1／Th2细胞因子的临床意义

目的 研究肺癌病人血清中Th1／Th2细胞因子水平，为分析肺癌的发生发展状况和临床治疗提供免疫学指标。方法 用流式细胞小球微阵列术(CBA)检测45例肺癌病人血清中Th1／Th2细胞因子水平，以70例正常人为对照。结果 45例肺癌病人血清中Th1细胞因子水平分别为：IFN-γ(25．1±18．1)pg/mL、IL-2(1．58±1．69)pg／mL；Th2细胞因子水平分别为：IL-10(4．12±2．22)pg/mL、I-一5(3．21±1．48)pg／mL、IL-4(4．72±2．72)pg／mL；Th1细胞因子IL-2与Th2细胞因子IL-10比值为0．48±0．53。与正常相比，肺癌病人血清中Th2细胞因子IL-5、IL-4均升高，差异有显著性，P＜0．01，IL-10略有升高，但差异无显著性；Th1细胞因子IFN-γ升高、IL-2则明显降低，差异均有显著性，P＜0．01；Th1细胞因子IL-2与Th2细胞因子IL-10比值明显下降，差异有显著性，P＜0．01。肺癌患者各组织类型、TNM分期之间细胞因子表达水平差异均无显著性。结论 肺癌病人血清中Th1／Th2比例失调，表现为Th2细胞因子明显升高，Th1细胞因子IL-2降低，提示肺癌病人体液免疫功能亢进，以IL-2介导的细胞免疫功能受抑制。IFN—γ在肺癌病人血清中明显升高，可能在肺癌的发生、发展中扮演了双重角色，既有促进抗肿瘤的作用，又与肿瘤的浸润转移相关。

食管癌细胞P-糖蛋白与CD44表达的相关性研究

目的了解食管癌细胞P -糖蛋白 (P-gp)表达与粘附分子 (CD44)表达水平的相关性及其临床意义。方法用流式细胞术 (FCM)检测了70例食管癌手术标本中癌细胞和食管切缘正常黏膜细胞P - gp和CD44表达水平 ,并进行临床病理分析。结果70例食管癌标本P -gp表达阳性细胞<25 %有27例 (38.6% ) ,在25%～40%有11例 (15.7 % ) ,在41 %～60 %有14例 (20 % ) ,>60 %有18例 (25.7% )。肿瘤直径>4cm食管癌中 ,25例P - gp 阳性组与19例P - gp 阴性组的CD44表达比较 ,差异有显著性意义 (P<0.05) ,高 -中分化食管癌患者中 ,22例P -gp阳性组与17例P-gp阴性组的CD44表达比较 ,差异有显著性意义 (P<0.05) ,有淋巴结转移的食管癌患者中 ,27例P - gp 阳性组与11例P - gp阴性组的CD44表达比较 ,差异有显著性意义(P<0.05)。P -gp和CD44表达双阳性组 ,临床III-IV期比例明显高于非双阳性组 ,差异有显著性意义 (P<0.05)。结论食管癌细胞P - gp阳性和CD44高表达与食管癌进展和转移密切相关 ,双阳性病人预后可能较差。

乳腺癌患者手术前后外周血免疫细胞亚群FCM检测分析

目的 :探讨乳腺癌患者手术前后免疫功能状态变化及临床意义。方法 :手术前后 3～ 6d抽取外周静脉血 ,流式细胞术 (FCM )检测CD+ 3 总T淋巴细胞、CD+ 4 辅助T细胞、CD+ 8杀伤 /抑制T细胞、CD+ 4 /CD+ 8比值、CD+ 56NK细胞、CD+ 19总B淋巴细胞、CD+ 2 5IL 2受体细胞比例。结果 :乳腺癌术后外周静脉血CD+ 3 总T淋巴细胞、CD+ 4 辅助T细胞、CD+ 2 5IL 2受体细胞比例较术前显著增高 ,CD+ 56NK细胞比例显著下降 ,CD+ 8杀伤 /抑制T细胞、CD+ 4 /CD+ 8比值、CD+ 19总B淋巴细胞变化差异无显著性。结论 :乳腺癌术后机体处于正性免调节状态 ,表现在以T淋巴细胞介导的细胞免疫反应为主 。