黑曲霉脂肪酶Lip A的异源表达与酶学性质分析

脂肪酶在油脂分解和脂质合成方面具有广泛应用,是一种很有前途的生物催化剂。该研究对来源于黑曲霉的脂肪酶Lip A进行了异源表达及催化特性研究。结果表明,该重组脂肪酶的最适温度为50℃,最适pH为8.0,并且在40~60℃和pH 5.0~8.0有较好的稳定性。该酶对有机试剂有较好的耐受性,金属离子Ca^(2+)和Mg^(2+)对脂肪酶水解活性有促进作用,Fe^(3+)、Zn^(2+)和Cu^(2+)严重抑制该酶活性。反应动力学参数表明,对硝基苯酚乙酸酯是脂肪酶Lip A的最适底物,其反应Km为(0.228±0.05)mmol/L,催化常数Kcat为(0.023±0.001)s-1。生物信息学分析表明,脂肪酶Lip A是abH23同源家族Rhizomucor mihei脂肪酶中的一员。黑曲霉脂肪酶Lip A具有催化乳酸和乙醇生成乳酸乙酯特性,为其在酿造领域的应用奠定了基础。