兔感染日本血吸虫后血浆中宿主源循环microRNAs变化研究

循环性microRNAs不仅参与生命体的重要活动调控,还有望成为某些疾病诊断的新型标志分子。为深入探讨宿主与血吸虫之间的相互作用机制并发现新型诊断标志分子,我们对前期获得的感染和未感染新西兰大白兔血浆小RNA的Solexia测序结果进行生物信息学分析,对差异表达的microRNAs用实时定量PCR进行验证,同时对这些差异表达的microRNAs的靶基因进行了分析。在剔除虫源性序列后,我们发现了感染和未感染日本血吸虫的新西兰大白兔体内的循环性宿主源microRNAs 173条,选取了10个差异表达的microRNAs利用实时定量PCR进行验证分析,结果表明所选取的10个microRNAs表达与Solex测序结果一致。靶基因的预测与分析结果表明感染血吸虫兔血浆中差异表达microRNAs的靶基因主要参与细胞进程、代谢调控、生命调控、发育进程等生命进程调控。本研究结果为深入开展日本血吸虫与宿主的互作及其寄生的分子机理提供了基础。

日本血吸虫重组IAP蛋白的免疫保护效果评估

为研究日本血吸虫凋亡蛋白抑制因子(inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP)重组蛋白诱导BALB/c小鼠的免疫保护效果,利用PCR技术扩增SjIAP基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-SjIAP,诱导表达重组SjIAP蛋白,并利用重组蛋白制备兔源多克隆抗体血清。然后,选用SjIAP重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用ELISA检测免疫小鼠血清中的特异性抗体水平,以及免疫小鼠脾脏淋巴细胞在SjIAP重组蛋白刺激后产生的细胞因子水平。强化免疫后,将小鼠进行血吸虫尾蚴攻虫试验,感染38 d,进行剖杀,计算虫体减虫率及肝脏减卵率。Western blot结果表明本研究制备的兔源多抗血清能特异性识别SjIAP重组蛋白。ELISA检测表明免疫SjIAP重组蛋白可诱导较高水平的IgG及IgG亚型(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3)抗体和IFN-γ、IL-2及IL-4细胞因子。动物试验表明,免疫SjIAP重组蛋白的小鼠与PBS组相比分别获得了31.5%的减虫率和37.2%的肝脏减卵率。免疫SjIAP重组蛋白能诱导小鼠获得一定减虫和减卵保护效果,提示血吸虫凋亡蛋白抑制因子可作为抗血吸虫病的疫苗候选分子。

基于Keap1-Nrf2/ARE信号通路的多糖对氧化损伤调控作用研究

自由基理论提到衰老是由自由基引起的。自由基是一种活性较高且带有不成对电子的原子或分子。当机体处于正常状态下时,体内适量的自由基可以促进细胞增殖,杀灭体内细菌,发挥细胞信号因子作用等。当机体受到刺激时,自由基含量过多,因含有不成对电子,且反应活性高,会不断夺取其他电子,可引发链式自由基反应。因此,过量的自由基会导致机体氧化损伤。食源性多糖来源广泛,种类多,有增强免疫、抗肿瘤和抗氧化等多种作用,可通过Keap1-Nrf2/ARE信号通路对氧化损伤进行调控,在预防和治疗氧化损伤引起的疾病中发挥着重要作用。且有低毒性,副作用小等优势,因此受到了越来越多的关注。