抗菌肽的研究进展

抗菌肽是广泛存在于生物体内的一种小分子肽,具有广谱性、高效性、稳定性等特点,其本身不易产生耐药性。耐药性细菌的出现致使现有抗菌药物对细菌感染治疗的疗效低下或无效,形成的危害日益严重,抗菌肽作为最有希望代替抗生素的新药制剂倍受国内外科研工作者的关注,成为当前的研究热点。本研究介绍了抗菌肽的发展,并重点阐述了最新的研究热点与应用领域。

双抗夹心ELISA法测定水资源、食品及饲料中总甾体激素含量

基于睾丸酮丛毛单胞菌(C.test)具有降解甾体类物质的特性,其细胞中3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3α-HSD)是诱导酶,建立了以3α-HSD的测定总甾体激素含量的双抗夹心酶联免疫反应(ELISA)方法。实验结果表明,睾丸酮类甾体激素的量在0.5～600μg/g之间,与3α-HSD酶表达量具有明显线性关系。应用这种方法对多种水资源、饲料、肉食品进行了检测。检测结果表明,松花湖水中的睾丸酮类甾体激素含量为34.5μg/g,明显高于其它水系;被测饲料中睾丸酮类甾体激素含量均大于2μg/g;肉类样品的检测结果均低于检测下限。本方法与高效液相色谱法的测定结果相符。

奶牛乳房炎疫苗防治的研究进展

奶牛乳房炎是奶牛场的常发病和难以防治的疾病,危害奶牛业的发展,是造成奶牛业经济损失的主要因素。现就奶牛乳房炎的疫苗防治等进行综述,为奶牛乳房炎的防治提供一定的参考依据。

毕赤酵母工程菌株表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白发酵条件的优化

能分泌表达重组人溶菌酶-鲎素融合蛋白的巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌(X33/pPICZαA-human lysozyme-TachyplesinⅠ构建的)。除了基因本身内在特性外,表达条件对外源基因的表达量也有着极显著的影响。本文在摇瓶水平上通过发酵液起始pH、甲醇诱导浓度、诱导时间这3个因素进行表达条件优化。通过生长曲线,Bradford检测以及平板扩散试验分析,获得摇瓶发酵表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白的最佳条件为发酵液初始pH 5.0,甲醇诱导浓度为2.0%,诱导时间为72 h;Bradford检测法分析显示表达量最高,平板扩散试验显示融合蛋白对金黄色葡萄球菌(ATCC25923)抑菌能力最明显,为进一步大规模发酵表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白奠定了基础。

结核分枝杆菌天然抵抗宿主防御和药物的机制及治疗策略

结核病严重威胁着人类健康,据世界卫生组织最新统计,结核分枝杆菌（Mycobacterium）感染者约占全球总人口的三分之一,每年约有800万新发病例,200多万死亡病例,死亡人数居单一传染病之首。

睾丸酮诱导下的不同菌种中3α-HSD的表达及含量检测

3-羟类固醇脱氢酶(3α-hydroxysteroid dehydrogenase,3α-HSD)是睾酮丛毛单胞菌分泌的一种类固醇脱氢酶。本实验利用已构建的pET-3α-HSD转化BL21,得到BL21pET-3α-HSD,经IPTG诱导表达提纯3α-HSD蛋白,建立了3α-HSD蛋白标准曲线。应用ELISA方法检测在睾丸酮的诱导下,三种工程菌C.testosterone,Ca3,BL21PET-3 hsd对3α-HSD的表达量,经过对比研究发现,在三种工程菌中,C.testosterone更宜适合作为检测环境中载体类化合物的指示菌种,并且得出3α-HSD是C.testosterone和Ca3在降解载体化合物的关键酶,在检测中可作为目标蛋白。

噬菌体展示肽库技术及其在分子病原细菌学研究中的应用

从噬菌体展示技术的基本原理、肽库的构建、噬菌体肽库的分类、噬菌体肽库的筛选方法等方面,综述了噬菌体展示肽库技术;从抗原表位研究、免疫诊断研究、基因疫苗研究、抗菌药物的靶向投递等方面,阐述了噬菌体展示肽库技术在分子病原细菌学中的应用;并对今后的研究方向进行了展望。

3α羟类固醇脱氢酶在血清总胆汁酸测定中的应用

目的建立血清总胆汁酸(TBA)测定的酶循环法。方法在全自动生化分析仪上用3α羟类固醇脱氢酶和辅酶体系循环底物的原理,建立循环酶测定法。结果本法批内、批间精密度结果(μmol/L)及变异系数分别是7.31±0.23、2.59%,7.38±0.282、3.82%;线性达100μmol/L;与商品试剂盒比较r=0.998;平均回收率97.7%;在2-8℃避光可稳定一个月。对90例健康人和85例不同肝脏疾病血清TBA进行测定,健康人参考范围在3.0-10.0μmol/L,可敏感的区分出不同肝脏疾病时血清胆汁酸的含量变化,符合临床需求。结论本法在全自动生化分析仪上采用循环酶速率法测定血清TBA,具有速度快,简便,灵敏度高,线性、精密度好的优点,是一种理想的TBA测定方法。

肿瘤多肽疫苗研究进展

肿瘤的发生、发展和治疗与机体免疫系统功能密切相关,伴随着肿瘤抗原、抗原递呈、T细胞识别机制的突破性研究进展,研究者发现抗肿瘤多肽疫苗能够通过肿瘤抗原多肽识别抗原递呈细胞表面的主要组织相容性复合体(MHC)分子,形成肽-MHC-T细胞受体复合物,引起相应的细胞毒性T淋巴细胞免疫反应,从而杀伤肿瘤。因此,研制既能打破肿瘤患者存在的免疫耐受又能诱发针对肿瘤相关抗原特异性免疫应答的高效多肽疫苗已成为肿瘤免疫治疗研究的热点。论文综述了肿瘤多肽疫苗抗肿瘤相关机制及其在该领域所取得的最新临床研究进展。

Toll样受体靶向药物的研究进展

Toll样受体是一类进化上高度保守的模式识别受体,通过多种信号传递途径调节免疫系统功能,活化后可诱导多个蛋白质家族的表达,包括炎性细胞因子、I型干扰素和趋化因子。Toll样受体的过度活化或活化不足均会导致机体功能异常,其与免疫系统疾病、肿瘤发病机制密切相关,是个非常值得开发的新型治疗靶点。现就对目前已开发Toll样受体药物进行了研究,对其治疗效果及临床进展做一简要综述,以期为临床预防和治疗疾病提供参考。

肝癌细胞靶向肽的筛选与鉴定

利用噬菌体环七肽库筛选与肝癌细胞特异性结合的多肽,并对其亲和力进行生物学鉴定。以HL-7702为消减细胞,HepG2为筛选靶细胞,对噬菌体随机环七肽库进行4轮全细胞消减筛选,并随机挑取60个阳性噬菌体克隆,以ELISA法鉴定其与HepG2细胞的结合活性,并取阳性克隆进行测序分析,并合成多肽进行免疫细胞化学染色鉴定。经4轮筛选,噬菌体在靶细胞HepG2上出现明显富集;利用ELISA从随机挑选的60个噬菌体克隆中得到15个与肝癌细胞具有高结合力的阳性克隆,测序并进行序列分析比对发现氨基酸序列无同源性,经免疫细胞化学染色鉴定后,发现1条多肽序列亲和力较高,为提高抗菌肽对肿瘤细胞的靶向杀伤作用奠定基础。