miRNA-106a在人淋巴瘤Jurkat细胞中的表达及作用机制

目的探讨miRNA-106a在人淋巴瘤Jurkat细胞中的表达及作用机制。方法取对数生长期人淋巴瘤Jurkat细胞,分别向培养基中加入5 ml生理盐水配制的浓度为0、0.5、1.0、1.5μg/ml的多柔比星,取健康体检者(对照组)的单个核细胞。采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA-106a以及视网膜母细胞瘤1(RB1)、E2F转录因子1(E2F1)、胱天蛋白酶3(caspase 3)mRNA的表达水平,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡能力,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测RB1、E2F1、caspase 3蛋白的表达水平。结果0μg/ml多柔比星干预人淋巴瘤Jurkat细胞miRNA-106a的表达水平明显高于对照组单个核细胞(P﹤0.01)。随多柔比星浓度升高、作用时间延长,miRNA-106a表达水平逐渐降低,光密度(OD)值逐渐降低,细胞增殖抑制率(IR)和凋亡率均逐渐升高,RB1、caspase 3 mRNA及其蛋白的表达水平均逐渐升高,E2F1 mRNA及其蛋白的表达水平均逐渐降低,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。相关性分析结果显示,miRNA-106a与RB1、caspase 3的表达均呈负相关(P﹤0.01),与E2F1的表达呈正相关(P﹤0.01)。结论miRNA-106a在人淋巴瘤Jurkat细胞中高表达,其可能通过调控RB/E2F1通路相关蛋白的表达来调节淋巴瘤进展。

含jumonji结构域的蛋白2B和缺氧诱导因子1α在儿童非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义

目的探讨含jumonji结构域的蛋白2B(jumonji domain-containing protein 2B,JMJD2B)和缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-lα)在儿童非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)组织中的表达和意义。方法应用免疫组化检测46例NHL儿童(观察组)和24例反应性增生儿童(对照组)淋巴结组织标本中JMJD2B和HIF-1α的表达,分析JMJD2B和HIF-1α与NHL患儿临床病理特征和预后的关系,以及在NHL组织中JMJD2B和HIF-1α表达的相关性。结果观察组JMJD2B(87%vs 21%)和HIF-1α(83%vs 42%)表达阳性率均高于对照组(P<0.05)。JMJD2B和HIF-1α表达与NHL患儿血清乳酸脱氢酶水平和国际预后指数危险度相关(P<0.05)。JMJD2B与HIF-1α在NHL患儿组织中的表达呈正相关(rs=0.333,P=0.024)。结论JMJD2B和HIF-1α在儿童NHL组织中表达增高,二者在儿童NHL发生发展过程中可能起协同作用;JMJD2B可作为儿童NHL辅助诊断、评估病情、指导治疗、评估预后的新指标.

利妥昔单抗联合化疗治疗儿童成熟B细胞淋巴瘤的有效性和安全性的Meta分析

目的 系统评价利妥昔单抗联合化疗治疗儿童成熟B细胞淋巴瘤的有效性和安全性。方法 计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网、万方等数据库,由2名研究者分别进行资料提取、质量评价,并交叉核对,检索时限为从建库至2022年7月。收集利妥昔单抗联合化疗对比单纯化疗的研究,以3年无事件生存率(EFS)、不良反应发生率作为结局指标。使用STATA11.0软件进行Meta分析、亚组分析、敏感性分析和发表偏倚分析。结果 共纳入9项研究,包含908例新诊断的儿童成熟B细胞淋巴瘤患者。Meta分析结果显示,与单纯化疗组相比,利妥昔单抗联合化疗组治疗新诊断的儿童成熟B细胞淋巴瘤的3年EFS明显增高(HR=0.37,95%CI:0.24~0.58,P<0.05)。亚组分析显示,利妥昔单抗使用≥6次时利妥昔单抗联合化疗组3年EFS高于单纯化疗组,差异有统计学意义(HR=0.32,95%CI:0.17~0.57,P<0.05);利妥昔单抗使用4次时利妥昔单抗联合化疗组3年EFS与单纯化疗组相比,差异无统计学意义(HR=0.41,95%CI:0.17~1.01,P>0.05)。利妥昔单抗联合化疗组与单纯化疗组≥4级不良反应发生率比较,差异无统计学意义(OR=1.24,95%CI:0.80~1.94,P>0.05),两组≥3级中性粒细胞减少发生率比较,差异无统计学意义(OR=1.34,95%CI:0.62~2.91,P>0.05),两组≥3级感染发生率比较,差异有统计学意义(OR=1.82,95%CI:1.23~2.71,P<0.05)。结论 利妥昔单抗联合化疗可提高儿童成熟B细胞淋巴瘤患者的生存率,应用≥6次利妥昔单抗临床效果更好,总体不良反应发生率较低。

miR-28-5p靶向BECN1对OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程的调控作用

目的探讨miR-28-5p靶向BECN1在OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程中的作用及机制。方法通过TUNEL荧光染色、Western blot实验明确miR-28-5p及姜黄素在OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程的作用,经在线预测并进一步通过双荧光素酶报告基因检测明确miR-28-5p和BECN1的靶向关系。结果TUNEL染色和caspase-3蛋白水平检测:与对照组比较,姜黄素明显增加凋亡细胞百分比并表达裂解蛋白caspase-3(P<0.05)。相比姜黄素单独作用,细胞凋亡被miR-28-5p显著减弱抑制(P<0.05)。与对照组比较,姜黄素组beclin1和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值显著降低、P62蛋白表达明显升高(P<0.05);与姜黄素组比较,姜黄素+miR-28-5p抑制剂组beclin1表达和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显升高、P62蛋白表达明显降低(P<0.05)。通过在线数据库预测:miR-28-5p与BECN1存在靶向的关系;双荧光素酶报告基因实验显示:与阴性对照组比较,miR-28-5p模拟物显著降低BECN1-wt组的荧光素酶活性,但miR-28-5p模拟物不影响BECN1-mut组的荧光素酶活性。结论miR-28-5p介导姜黄素促OCI-LY7细胞凋亡作用。BECN1是miR-28-5p的靶基因,姜黄素诱导miR-28-5p过表达可直接靶向BECN1抑制自噬过程。

转铁蛋白受体1和血管内皮生长因子在儿童及青少年骨肉瘤患者中的表达及临床意义

目的 探讨转铁蛋白受体1(TFR1)和血管内皮生长因子(VEGF)在儿童及青少年骨肉瘤患者中的表达及临床意义。方法 收集35例儿童及青少年骨肉瘤患者的骨肉瘤组织和癌旁正常组织,采用免疫组化染色法检测TFR1、VEGF表达情况。比较骨肉瘤组织和癌旁正常组织中TFR1和VEGF表达情况,比较不同临床特征儿童及青少年骨肉瘤患者骨肉瘤组织中TFR1和VEGF表达情况,比较不同TFR1、VEGF表达情况儿童及青少年骨肉瘤患者的生存情况,采用Spearman相关分析法分析TFR1与VEGF表达的相关性。结果 儿童及青少年骨肉瘤患者骨肉瘤组织中TFR1和VEGF中高表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。中低分化、有远处转移、Enneking分期为Ⅱ~Ⅲ期儿童及青少年骨肉瘤患者骨肉瘤组织中TFR1、VEGF中高表达率均高于高分化、无远处转移、Enneking分期为Ⅰ期的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。TFR1、VEGF低表达儿童及青少年骨肉瘤患者的生存情况均优于TFR1、VEGF中高表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。儿童及青少年骨肉瘤患者中TFR1与VEGF的表达呈正相关(r=0.669,P﹤0.05)。结论 TFR1和VEGF在儿童及青少年骨肉瘤患者中表达上调,可能参与骨肉瘤的发生、发展、侵袭和远处转移,可作为骨肉瘤诊断、恶性程度判断及预后评估指标。

心肌营养素-1在新生儿缺氧缺血性脑病中的变化及与心肌损伤的相关性研究

目的探讨血浆心肌营养素-1(CT-1)在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的变化,并分析其与心肌损伤的相关性。方法该院儿科收治的足月HIE患儿45例(轻度15例、中度24例、重度6例),分为心肌损伤组19例和非心肌损伤组26例。20例健康新生儿作为健康对照组。使用双抗体夹心酶标免疫分析法检测血浆CT-1水平。应用多普勒超声心动仪测定心输出量(CO)、左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)。结果轻、中、重度HIE血浆CT-1水平较健康对照组均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),中、重度与轻度HIE比较,CT-1水平也明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。心肌损伤组血浆CT-1水平较非心肌损伤组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。心肌损伤组急性期血浆CT-1水平明显高于恢复期,差异有统计学意义(P<0.01)。HIE患儿急性期CO、EF、FS明显降低,且CT-1水平与CO、EF、FS均呈显著负相关。结论 HIE患儿急性期血浆CT-1水平升高,且检测血浆CT-1水平有助于早期诊断心肌损伤,判断病情,并能反映其心功能变化。

新生儿缺氧缺血性心肌损伤60例临床分析

目的分析新生儿缺氧缺血性心肌损伤的临床表现、辅助检查及治疗方法,以期提高临床诊治水平。方法选择足月新生儿缺氧缺血性脑病合并心肌损伤患儿60例为研究对象,对其临床表现、辅助检查和治疗情况进行观察。结果新生儿缺氧缺血性脑病合并心肌损伤以面色苍白、紫绀、皮肤花纹、心音低钝、心动过缓或过速、心律不齐等为主要临床表现,辅助检查以心电图和心肌酶谱改变为主,综合治疗基础上,加用磷酸肌酸钠等改善心肌治疗后,治愈55例(91.67%),好转4例(6.67%),死亡1例(1.67%)。结论新生儿缺氧缺血性心肌损伤是可逆的,经临床积极治疗,心肌酶谱多可恢复正常,往往不遗留心脏功能后遗症。

儿童急性白血病ZO-1基因甲基化状态临床意义分析

目的探讨紧密连接蛋白(zonula occluden protein-1,ZO-1)基因启动子区甲基化状态在儿童急性白血病(AL)骨髓检测中的临床意义。方法将48例确诊为AL(35例急性淋巴细胞白血病,13例急性髓细胞白血病)患儿的骨髓标本作为研究组,20例非血液肿瘤患儿骨髓标本作为对照组。采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测研究组与对照组ZO-1基因启动子区甲基化状态。逆转录PCR(RT-PCR)检测研究组与对照组ZO-1基因mRNA的表达情况。结果 MS-PCR检测结果显示,治疗前研究组ZO-1基因甲基化阳性率为68.8%(33/48),对照组均呈非甲基化状态(P<0.05);动态观察31例急性淋巴细胞白血病ZO-1基因甲基化阳性率:治疗前64.5%(20/31),治疗第33天48.4%(15/31),治疗第12周29.0%(9/31)。治疗过程中复发2例,甲基化状态由部分甲基化条带转变为完全甲基化条带。5例疗程结束,停药前仍有1例可检出。治疗前与治疗第33天、治疗第12周比较差异均有统计学意义(P<0.05),治疗第33天与治疗第12周比较差异有统计学意义(P<0.05);急性淋巴细胞白血病68.6%(24/35),与急性髓细胞白血病69.2%(9/13)比较差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR检测结果显示,研究组治疗前及动态观察中,ZO-1基因甲基化阳性病例均无mRNA表达,对照组全部表达。结论 ZO-1基因启动子区高甲基化状态在儿童急性白血病中有较高的特异性,与疾病发生、发展及转归密切相关。ZO-1基因有可能作为新的白血病分子标志,为临床早期诊断、疗效判断、预后评价、微小残留检测提供新的指标。

中西医结合治疗小儿肾病综合征30例

笔者采用中西医结合治疗小儿肾病综合征，取得较好疗效。现将资料完整者30例报告如下。 1资料与方法 1．1一般资料 30例中男性21例，女性9例；年龄1～3岁6例，3^＊～6岁11例，6^＊～14岁13例；病程最短1周，最长3年。全部病例均符合原发性。肾病的诊断标准。30例中15例为初发，15例为复发而接受过激素治疗。

心肌营养素-1的研究进展

心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)是1995年Pennica等从小鼠心脏胚胎干细胞中克隆出的一种新型细胞因子,因能诱导心肌细胞肥大,故命名为CT-1.进一步研究发现,其结构与细胞因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)家族成员如白血病抑制因子(leukamia inhibitory factor,LIF)、睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)、抑瘤素M(oncostatin M,OSM)、IL-6和白细胞介素-11(interleukin-11,IL-11)具有高度同源性,属IL-6家族新成员.研究表明,CT-1存在于多种组织中,在心肌组织中表达最高,不仅在心脏发育和促心肌肥大中有重要作用,还对心肌细胞具有保护作用,同时对其他细胞也产生广泛的生物学影响.……

缺氧缺血时新生大鼠脑中谷氨酸含量的变化及与脑损伤的关系

目的建立单侧缺氧缺血性脑损伤 (hypoxic ischemicbraindamage,HIBD)动物模型 ,研究HIBD时脑中谷氨酸含量的变化及意义。方法选择 7日龄Wistar大鼠 5 6只 ,建立HIBD模型 ,随机分成假手术 2 4、4 8、72h组和HIBD 2 4、4 8、72h组及正常对照组 ,每组 8只 ,制模前观察每只大鼠的夹尾左旋及翻身能力。各组于规定时刻断头处死 ,留取脑标本检测 :HE或阿新兰 (Alicanblue)染色观察脑形态学改变 ;高效液相色谱分析电化学检测法(highperformanceliquidchromatography ,HPLC)测定脑谷氨酸 (glutamate ,Glu)含量 ;流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM )检测脑同一区域凋亡细胞计数。结果制模前各组大鼠行为检查均正常 ;制模后 1hHIBD各组 15只不能翻身 ,19只出现夹尾左旋 ,两者均有 11只。与同时刻假手术组比较 ,HIBD各组脑组织神经元细胞变性、坏死 ,树突减少或消失 ,脑软化灶形成 ,小胶质细胞增生 ,以 72h组最明显 ;HIBD 4 8h组Glu含量明显升高 ;HIBD各组凋亡细胞计数明显增加 (P均 <0 .0 5 )。结论缺氧缺血损伤了大鼠的运动中枢 ,缺氧缺血后 4 8h脑中Glu含量的短暂升高与脑组织病理损害、神经细胞凋亡密切相关 ,提示脑中Glu含量的升高在HIBD的发病过程中具有重要作用 ,降低脑中Glu含量是改善HIBD的关键。

TGF-β和IL-10在呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿外周血中的含量及表达意义

目的观察呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿外周血中TGF-β及IL-10的含量,并对其临床意义进行探讨。方法选择2012年10月~2013年10月间河北医科大学附属邢台市人民医院80例呼吸道合胞病毒毛细支气管炎检测为阳性的患儿为观察对象组,并以60例健康体检儿童为对照组,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中TGF-β和IL-10的含量,比较2组间的差异。结果治疗前,与对照组相比,呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿组外周血中TGF-β及IL-10含量显著降低(P<0.001)。与治疗前相比,治疗后呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿组外周血中TGF-β及IL-10含量显著升高(P<0.001);与对照组相比,治疗后呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿组外周血中TGF-β及IL-10含量虽有明显的上升趋势,但仍显著低于对照组水平(P<0.05)。结论外周血中TGF-β和IL-10含量可作为判断呼吸道合胞病毒毛细支气管炎病情轻重的重要指标。

XIAP抑制剂Embelin对人T淋巴瘤细胞Jurkat增殖抑制作用

目的:研究XIAP抑制剂Embelin体外对人T淋巴瘤细胞Jurkat增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:应用MTS法分析不同浓度Embelin对人T淋巴瘤细胞增殖的影响;光学显微镜下观察经Embelin处理后细胞形态学的改变;经Annexin V/PI双染后用流式细胞术检测Embelin对Jurkat细胞凋亡的影响;Western blot方法检测Embelin作用后细胞XIAP、PARP、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-xl、Bel-2表达的变化。结果:Emebeli对人白血病细胞具有显著增殖抑制作用(P<0.05);Caspase-3抑制剂z-DEVD-fmk,Caspase-9抑制剂Ac-LEHD-CHO能显著下调这种增殖抑制作用经不同浓度Emebelin处理24 h后,Jurkat细胞凋亡率明显增高,与未处理组比较有显著性差异(P<0.01);经Emebelin处理24 h后,Jurkat细胞出现PARP、Caspase3、9裂解片段,且Bax蛋白表达上调,Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达水平下调结论:Embelin在体外可明显抑制人T淋巴瘤细胞Jurkat的增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能是通过拮抗XIAP的作用,激活Caspase依赖性的细胞凋亡内源途径而诱导Jurkat细胞发生凋亡。

EV71感染手足口病患儿血清内皮素-1水平测定及其临床意义

目的探讨肠道病毒71型（Ev71）感染手足口病患儿血清内皮素-1（ET-1）水平变化及其临床意义。方法选取2011年5月～2011年12月河北医科大学附属邢台市人民医院儿科收治的经检测病原为EV71感染的手足口病患儿50例，分为普通组23例，重症组18例，危重症组9例。同时选取健康体检儿童30名作为正常对照，采用酶联免疫法（ELASA）测定血清ET-1水平。结果普通组和重症组血清ET-1水平与对照组比较无统计学意义（P〉o．05），危重症组血清ET-1水平明显高于对照组、普通组及重症组（P〈0．05）。结论检测手足口病患儿血清ET－1水平，有助于病情严重程度的判断，对判断患儿病情及预后有一定价值。

联合检测脐血与外周动脉血pH值对评估新生儿缺氧缺血性脑损伤的临床价值

目的测定新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿脐血及外周动脉血pH值,探讨其对新生儿HIE的临床诊断价值。方法选择2011年6月至2013年6月产科自然分娩的足月新生儿917例,于出生后第1声啼哭前采集脐带血,检测脐动脉血pH值;对其中生后1min Apgar评分小于或等于7分的138例新生儿于出生1h抽取外周动脉血进行血气分析。分析其与新生儿HIE的关系。结果 917例脐动脉血pH范围为7.22-7.51,平均pH值为7.31±0.14,pH〈7.10作为预测新生儿HIE的指标时其阳性预测值为55.38%,灵敏度60.00%,特异度96.61%,脐带血联合出生后1h动脉血pH值预测HIE的阳性预测值95.74%、灵敏度88.26%,特异度97.10%。联合检测同单独检测比较,具有较高的灵敏度及阳性预测值。结论对于脐血pH〈7.10的新生儿应当于生后复查外周动脉血pH值,脐血联合生后1h动脉血pH值测定能客观评价新生儿出生时的状况,对新生儿HIE的预测具有较高的临床价值。

儿童非霍奇金淋巴瘤X-连锁凋亡抑制蛋白和Caspase-3的相关性研究

X-连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）是凋亡抑制蛋白家族中作用最强的一员,能明显抑制Fas和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）诱发的内源和外源细胞凋亡过程,已经在多种恶性肿瘤中均发现高表达。Caspase家族在细胞凋亡的过程中起重要作用,Caspase-3是主要的效应因子,

三氧化二砷对淋巴瘤Raji细胞的抑制效应研究

目的研究三氧化二砷(As_2O_3)对恶性淋巴瘤细胞的的影响。方法体外培养人Burkitts淋巴瘤细胞株Raji细胞,设对照组和用不同浓度As_2O_3作用不同时间处理Raji细胞的实验组。应用四甲基偶氮唑盐(3-(4,5-dimethyl-2-thiazoly)-2,5-diphenyl tetrazolium dromide,MTT)比色法检测细胞生长情况;流式细胞术检测细胞凋亡并分析As_2O_3对细胞周期的影响。结果①实验组MTT比色实验结果表明,As_2O_3各浓度组作用于Raji细胞24、48、72h后抑制率为12.15%～92.17%(P<0.05);②流式细胞术检测细胞凋亡结果显示,实验组As_2O_3各浓度组作用于Raji细胞48h后出现明显的凋亡峰,对照组未见凋亡峰或仅有低平的凋亡峰;③流式细胞术细胞周期分析结果显示,实验组As_2O_3各浓度组作用于Raji细胞48h后,As_2O_3可阻滞Raji细胞于G_0/G_1期,且随着As_2O_3浓度的增加,阻滞作用增强,呈一定剂量依赖关系。结论①As_2O_3体外对Raji淋巴瘤细胞生长具有明显的抑制作用;②As_2O_3能诱导Raji细胞凋亡,且使G_2/G_1期细胞比例增加,同时S期及G_2/M期细胞比例减少。