兔源金黄色葡萄球菌的分离鉴定

本研究采用细菌分离培养、形态学观察、生化试验、药敏试验与16S r DNA测序等技术,对泰安某兔场病兔的肺组织进行了细菌分离鉴定。结果表明,所分离细菌为无鞭毛、无荚膜、无芽胞的革兰氏阳性葡萄球菌,能分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产气,触酶试验呈阳性,16S r DNA序列同源性与金黄色葡萄球菌的同源性超过99%。所分离细菌为金黄色葡萄球菌,对诺氟沙星、氨苄西林、庆大霉素等敏感性高,对新霉素、四环素中度敏感,对多粘菌素B、磺胺甲噁唑具有耐药性。

水貂抗犬瘟热病毒中和抗体滴度的测定

为了解当前犬瘟热疫苗及免疫程序的在水貂的免疫效果,该研究在6个水貂养殖场,随机对CD疫苗免疫接种后55-60d的水貂进行心脏采血,共采集、制备84份血清。采用血清微量中和试验,测定84份水貂血清中抗CDV的中和抗体滴度。结果表明,只有1份水貂血清中抗CDV的中和抗体滴度为94,占1.2%,其余83份血清样品中的抗CDV中和抗体滴度小于10,达98.8%。

水貂抗貂细小病毒中和抗体滴度的测定

为了解当前水貂病毒性肠炎疫苗及免疫程序的在水貂的免疫效果,该研究在6个水貂养殖场,随机对MEV疫苗免疫接种后55-60d的水貂进行心脏采血,共采集、制备84份血清。采用血清微量中和试验,测定84份水貂血清中抗MEV的中和抗体滴度。结果表明,抗MEV中和抗体滴度大于10的共10份血清,仅占11.9%,其中1份效价为56,1份效价为28,1份效价为21,6份效价为14,1份效价为12,其余74份水貂血清中的抗MEV中和抗体滴度均小于10,达88.1%。当前水貂MEV疫苗免疫程序的免疫效果很差,是造成在水貂养殖过程中MEV流行的重要因素,因此有必要加强研究制定科学水貂MEV疫苗免疫接种程序。

基于新型小鹅瘟病毒VP3基因间接ELISA快速检测方法的建立

应用PCR方法扩增了新型鹅细小病毒(NGPV)的VP3基因,然后将其克隆到原核表达载体中,获得重组质粒p GEX-VP3。将p GEX-VP3转化到DH5α感受态细胞中,诱导表达后分别用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定。然后以表达的VP3蛋白作为抗原,包被ELISA板。分别对包被抗原的浓度、抗原封闭条件、血清的孵育条件、酶标二抗的孵育条件等进行优化,最终成功建立间接ELISA。VP3蛋白的包被稀释度为1:800,4℃包被过夜,5%脱脂乳4℃封闭过夜,血清稀释度为1:120,酶标二抗稀释度为1:1000,孵育时间为30min。此方法有良好的重复性及特异性,为临床检测新型细小病毒感染以及疫苗评价提供了参考方法。