S100A4-siRNA体外转染下调MMP-2表达抑制胰腺癌细胞侵袭能力的研究

目的观察S100A4基因沉默后人胰腺癌Bxpc-3细胞株S100A4和MMP-2的表达及肿瘤细胞迁移和侵袭能力的变化,探讨S100A4基因在肿瘤转移中的作用机制。方法采用RNA干扰技术将S100A4-siRNA转染至人胰腺癌Bxpc-3细胞,采用荧光实时定量PCR和Western免疫印迹方法检测转染前后S100A4和MMP-2的mRNA和蛋白表达;以Transwell小室模型检测转染前后癌细胞迁移和侵袭能力变化。结果转染后S100A4和MMP-2的表达均下调;细胞体外迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05)。结论 S100A4基因上调MMP-2的表达是肿瘤细胞具有高侵袭性的机制之一。S100A4基因可以作为胰腺癌基因治疗的一个靶点。

S100A4敲除对胰腺癌细胞E-钙黏素的表达及黏附和侵袭的影响

目的:探讨S100A4在胰腺癌侵袭和转移中的作用机制作用机制。方法:利用RNA干扰技术将S100A4-siRNA转染至人胰腺癌Bxpc-3细胞,用荧光实时定量PCR和Western免疫印迹方法检测转染前后S100A4和E-钙黏素的mRNA和蛋白表达;以平板黏附模型检测转染前后癌细胞黏附能力变化;以Transwe11小室模型检测转染前后癌细胞迁移和侵袭能力变化。结果:转染后S100A4表达下调,E-钙黏素的表达则升高;细胞黏附能力增强(P<0.05);体外侵袭能力显著降低(P<0.05)。结论:S100A4基因下调E-钙黏素的表达是肿瘤细胞具有高侵袭性的机制之一。S100A4基因可以作为胰腺癌基因治疗的一个靶点。

S100A4 siRNA对人胰腺癌BxPc-3细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的观察利用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)技术下调人胰腺癌BxPc-3细胞中钙结合蛋白S100A4表达后对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法设计合成针对S100A4的特异性siRNA,转染至人胰腺癌BxPc-3细胞,以Western印迹检测转染前后S100A4蛋白表达变化;克隆形成率实验检测转染前后BxPc-3细胞增殖能力;Transwell小室模型检测转染前后BxPc-3细胞迁移和侵袭能力变化。结果 Western印迹结果显示BxPc-3细胞转染S100A4siRNA48h后,S100A4蛋白表达明显下调;Transwell小室验证转染S100A4siRNA后细胞的迁移和侵袭能力明显降低。结论本研究结果表明,S100A4表达下调后可抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,提示S100A4可以作为一个潜在的肿瘤治疗靶标。

S100A4在癌细胞中的作用及其在寻找新治疗靶标中的应用

S100A4是由101个氨基酸组成的多肽,属于Ca2+结合蛋白超家族中的一员,通过与Ca2+结合在肿瘤发生发展中发挥重要作用。它在多种肿瘤细胞中都呈高表达,在肿瘤的生长、侵袭和迁移过程中发挥重要作用,是一个与细胞周期、增殖、凋亡、侵袭转移密切相关的蛋白。现就S100A4的结构、功能及其作为癌症治疗新靶标的应用做一综述。

辐射对肺腺癌细胞A549侵袭能力的影响及其分子机制

目的探讨辐射对肺腺癌A549细胞侵袭能力的影响及其相关的分子机制。方法用Transwell侵袭实验检测2和4Gy1射线照射后A549细胞的侵袭能力，利用反转录PCR和Westernblot实验，检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA和蛋白及磷酸化STAT3蛋白表达水平。结果2或4Gy^y射线照射后，A549细胞的侵袭数量较未照射对照组分别升高了200．O％和390．9％，差异均有统计学意义（F=111．7和596．7，P〈0．01）。照射后24hMMP-2mRNA及蛋白表达显著升高；照射后12h信号转导子及转录激活子3（STAT3）的磷酸化表达显著增加。使用特异性抑制剂AG490阻断STAT3磷酸化后，辐射诱导的MMP-2表达被显著抑制。同时，4Gy＋AG490处理组的侵袭细胞数与单独4Gy照射组相比，减少了76．1％（F=555．9，P〈0．01），仅为对照组的117．8％（F=3．6，P〉0．05）。结论辐射能通过激活STAT3来促进MMP-2的转录，最终导致A549细胞的侵袭能力增强。

γ射线照射对肺腺癌细胞迁移能力的影响及其分子机制

目的探讨辐射对肺腺癌A549细胞迁移能力的影响及其所依赖的信号通路。方法划痕实验检测2和4 Gyγ射线照射后A549细胞的迁移能力,Western印迹实验检测STAT3及磷酸化STAT3水平,ELISA法检测IL-6的分泌水平,间接免疫荧光染色观察STAT3在细胞内定位情况。结果 2或4 Gyγ射线照射均能显著增强A549细胞的迁移能力,并能激活STAT3的磷酸化,促进STAT3入核以及IL-6的分泌。JAK-2激酶特异性抑制剂AG490能阻断辐射诱导的STAT3磷酸化并进一步抑制辐射诱导的A549细胞迁移。结论本研究结果表明辐射能通过激活JAK-2/STAT3信号通路促进A549细胞的迁移,而IL-6可能参与了辐射诱导的JAK-2/STAT3信号通路的激活。

STAT3RNA干扰对脑胶质瘤U251细胞活性氧含量及DNA损伤的影响

目的探讨STAT3RNA干扰（RNAi）对脑胶质瘤U251细胞活性氧含量及DNA损伤的影响。方法利用构建好的STAT3RNAi载体（pSilencer2．1-STAT3，STAT3组）和pSilencer2．1-GFP（RNAi对照组）分别转染U251细胞，分别检测24、48和72h后细胞内活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）水平；同时利用单细胞凝胶电泳方法，检测6、12和24h后细胞内DNA损伤；利用碘化丙啶（PI）单染流式检测12、24、36和48h后细胞周期分布情况。结果U251细胞转染pSilencer2．1-STAT324h后，细胞内ROS水平是对照的8．91倍（F=89．296，P〈0．05），48h后回复到正常水平；24、48和72hsiSTAT3组和siGFP组之间MDA水平无显著变化；同时，与出现明显拖尾现象的8Gy照射U251细胞阳性对照组相比，转染pSilencer2．1-STAT36h后部分细胞出现拖尾现象，12h后拖尾变得较少，24h后完全消失。与对照组相比，siSTAT3转染组12h后s期的滞后率是17．22％，G2／M的滞后率是6．4％；24h后G0／G1的滞后率是18．44％；36h后，S期的滞后率是17．99％。结论对U251细胞STAT3RNAi后，细胞内氧化还原状态发生改变，同时伴有DNA的损伤与修复。

以图像和问题为载体的“函数单调性”教学设计

单调性是函数性质的重要方面,学生在此前的函数学习过程中已经研究了一些函数的增减性,但是相关研究还比较肤浅,而且没有对其增减性进行明确定义,相关单调性的判断仅仅只是通过图像来进行说明。因此,本节课所讲的人教B版《数学》'函数的单调性'可以认为是对此前学习的进一步深化和提高。1目标分析让学生通过由直观到抽象,以图识数的方式来认识函数的单调性。在该过程中,学生以自我探究的方式来体会数学概念的形成过程。