U251和U87细胞的Ezrin蛋白生物信息学分析

目的应用生物信息学方法分析Ezrin蛋白的功能、结构域,探讨胶质瘤细胞U251和U87浸润性生长的机制。方法 Transwell检测U251和U87细胞的迁移侵袭能力。RT-PCR钓取U251和U87细胞Ezrin基因,TA克隆后测序。应用Basic Local Alignment Search Tool(nucleotideblast及blastx)分析Ezrin基因与GenBank登录的Ezrin的相似性及氨基酸变异,EBI>Tools>Protein,SWISS-MODEL,SWISS-PDB Viewer分析Ezrin蛋白功能、结构域并建模观察其空间结构及变异氨基酸的位置。结果 Transwell检测结果显示穿过膜底面的U87细胞为(35.5±6.89)个,明显高于U251细胞〔(13.3±3.01)个〕(P<0.001)。RT-PCR扩增产物为1 700 bp,与Ezrin基因的大小相符,TA克隆后XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切选取阳性质粒测序。分析显示,U251和U87细胞Ezrin基因序列与GenBank登陆序列的相似性为99%,U251细胞Ezrin基因序列中有一个位点突变,U87细胞有5个位点;U251细胞Ezrin蛋白第407位氨基酸变异,U87细胞Ezrin蛋白第66、258、265和577位变异。EBI>Tools>Protein在线分析Ezrin蛋白功能,与U251细胞Ezrin匹配的蛋白有362个,与U87细胞Ezrin匹配的蛋白却有1 503个;Ezrin的结构分析显示,蛋白质结构数据库PDB中U87细胞Ezrin的数量多于U251细胞,而蛋白质结构等级分类显示的结构域的结构分级和分层分级相同;U87细胞Ezrin的结构域有45个,而U251细胞的Ezrin只有5个。SWISS-MODEL分析,U87细胞Ezrin的3D空间结构有8处与U251细胞的不同,QMEAN4评分U87细胞Ezrin低于U251细胞。SWISS-PDB Viewer显示U87细胞Ezrin第258、265位氨基酸相对位于空间结构的内侧。结论胶质瘤细胞U87的迁移浸润能力强于U251。U87细胞和U251细胞Ezrin基因序列与GenBank登录的相似性达99%,U87细胞Ezrin氨基酸变异多于U251细胞,导致其功能、结构域及空间结构不同。Ezrin蛋白影响U87、U251细胞的迁移和浸润。

数字化变电站扩建接口方式的实践

以芝堰变电站500 kV芝信5869线间隔扩建工程为例,对扩建过程中新设备的组网方式以及扩建过程中接口设备的安全措施进行深入探讨,为数字化变电站的扩建工程提供可借鉴的经验。

Ezrin影响胶质瘤在裸鼠脑内的浸润性生长

目的应用RNAi沉默Ezrin基因或表达载体使其过表达以探讨Ezrin基因对脑胶质瘤生长的影响。方法根据GenBank中Ezrin的基因序列,应用Designer3.0(Genepharma)软件设计以Ezrin基因4个位点为靶的shRNADNA oligo,合成并克隆至shRNA载体pGPU6/GFP/Neo;构建其shRNA载体。经BamHⅠ、PstⅠ酶切鉴定和测序分析,再以脂质体LipofectimineTM2000介导转染U87细胞,48h后用RT-PCR和Western blot检测Ezrin mRNA和蛋白的表达,以筛选有效shRNA载体。将转染Ezrin基因有效shRNA载体和表达载体的U87细胞接种裸鼠脑,制备脑瘤动物模型,激光共聚焦显微镜下观察U87细胞在裸鼠脑内的迁移情况。结果经限制性内切酶切和测序鉴定分析所构建的shRNA-Ezrin正确;RT-PCR和Western blot检测结果表明,shRNA-Ezrin-2可沉默Ezrin表达,使其mRNA和蛋白表达量降低,确定为有效shRNA载体。激光共聚焦显微镜下可见shRNA-Ezrin-2转染的U87细胞在裸鼠脑内迁移数少于对照组,pEGFP-C1/Ezrin转染的U87细胞的迁移数相对较多。结论成功构建Ezrin基因的shRNA载体并筛选出有效shRNA载体。Ezrin基因参与U87细胞在裸鼠脑内的浸润性生长。

高频保护通道自动交换试验方法的探讨

高频通道是高频保护的重要组成部分,运行正常与否直接影响电力系统的安全稳定运行。对传统的高频通道交换试验系统进行改进,实现高频通道自动交换试验和远方通道交换试验结果的监测,以满足现有运行方式的要求。

细节化管理在心内科病房患者护理中的应用分析

目的对细节化管理在心内科病房患者临床护理中的应用价值进行分析。方法随机选取200例患者作为研究对象,将其分成2组,各100例。其中对照组患者实施常规管理,观察组患者实施细节化管理,对比分析2组患者的护理满意度及治疗效果。结果与对照组相比,观察组患者的临床治愈率和护理满意度显著较高,差异具有统计学意义(P<0.05),其中对照组患者治愈率为56.0%、护理满意度为81.0%,观察组患者则分别为78.0%及97.0%(P<0.05)。结论在心内科病房患者护理中实施细节化管理,能够显著提升患者的临床护理满意度,并且促进患者临床治愈率的显著提升,值得推广。

分层次护理管理对循环内科护理质量的影响

目的通过对临床护理进行层级管理推动整体护理向更加深化和持续性的方向发展。方法根据循环科护士的实际工作能力以及相关资力,按照执行护士、护理员以及专业护士三个层次将其进行划分,对各个岗位的职责进行明确,根据各个岗位的相关业绩情况制定相应的业绩评价体系。结果患者从中受益,并提升了相应的护理质量。结论有效的实现了相应人才与岗位之间的有效结合,对相关的竞争机制得到了改善,从而实现了才尽其用和人尽其才的目的,使护士的自身价值得到充分体现,使相关的护理管理更加趋向科学、有效的方向上发展。

数字化变电站母差保护接口方式

数字化变电站的扩建改造中,对继电保护设备的接口工作,目前可借鉴的工程经验非常少。作为浙江省第一个数字化变电站扩建工程,本文以芝堰变500kV信安I线间隔扩建工程为实例,通过500kVII母母差保护接口,从SCD文件配置更改、试验前安全措施的实施和接口试验三个方面,对数字化变电站扩建接口方式进行了深入的探讨。

变电站开关端子箱智能除湿法

1加热器自动投入装置的应用 为了有效防止凝露的产生,需保持开关端子箱体内部的温度始终高于外部环境温度2～3℃。现场实施过程中,可通过加热器,将湿气从箱体内部排出,一方面降低箱体内部相对湿度,当在某一温度时,相对湿度下降至其凝露点温度以下,即可阻止凝露的发生;另一方面提高箱体内部的温度,使其温度略高于环境温度,阻止凝露的发生。但目前变电站户外二次开关端子箱内多数加热器需要人工投退,由于全网数量多易漏投、漏退,且运行人员操作量较大;箱体内缺乏温湿度采集显示器,仅凭运行人员判断环境温湿度投退加热器,主观随意性较大;某些机构开关端子箱有微机防误挂锁,投退加热器时涉及解锁问题,运行风险较大。

等离子喷涂高炉风口用Al_2O_3涂层的组织及性能研究

采用超音速等离子喷涂法在纯铜板上制备氧化铝(Al2O3)涂层试样。利用XRD衍射仪、扫描电镜和图形软件对其微观组织进行表征,采用水淬法测试其抗热震性能。结果表明:Al2O3涂层大部分由γ相组成,断口形貌为柱状晶和一定量的部分熔融颗粒组成,截面组织具有较好完整性,孔隙率为1.1%;试样在950℃经历了均值为36.3次热震循环后其半球顶端出现大面积剥落,但圆柱主体部分完好,因此Al2O3陶瓷涂层具备良好的抗热疲劳性能,超音速等离子喷涂适合于风口套表面涂层的制备。

大骨瓣减压与常规骨瓣减压治疗重度颅脑损伤临床对照研究

目的比较大骨瓣减压与常规骨瓣减压治疗重度颅脑损伤的临床效果。方法总结我科2000-2004年间颅脑外伤病例符合重度颅脑损伤的97例,分两组,一组是大骨瓣(n=47)行单侧或双侧额颞顶骨瓣(12×14cm),另一组为常规骨瓣(n=50)颞顶瓣、额颞瓣、额瓣(6×8cm)开颅术。结果按伤后6个月随访预后结果(6-GOS)大骨瓣组:恢复良好20例,中残14例、重残6例、植物生存4例、死亡3例。常规骨瓣组:良好12例、中残10例、重残12例、植物生存8例、死亡8例(P<0．01)。大骨瓣减压组颅内压下降程度优于常规骨瓣组P<0．01。两组患者的术后并发症切口脑脊液漏、外伤性癫痫,颅内感染,外伤性脑积水(P>0．05),无显著性差异。结论大骨瓣减压治疗重度颅脑损伤的预后优于常规骨瓣组。

USS椎弓根钉系统结合后路椎体间及后外侧植骨融合术治疗下腰椎不稳定的临床体会

目的探讨后路椎体间植骨融合术治疗下腰椎不稳定的手术技术并评价其应用价值。方法对明确诊断为下腰椎不稳的患者进行后正中入路下的椎管狭窄减压手术,椎弓根螺钉植入并行椎间隙撑开,双侧切除椎间盘保留侧方以及前方的纤维环,刮除终板的软骨层,植入足量的松质骨以及三面皮质骨的髂骨块,并行侧后方植骨,椎弓根螺钉系统加压固定。结果28例获得手术后3个月随访,原有的神经压迫症状大部恢复,行走距离增加最为明显。椎间高度术前2.7～6.8mm,平均高度4.1mm,术后椎间高度10.8～14.4mm,平均11.6mm。在3个月随访时平均高度为10.1～13.4mm,平均11.3mm。椎间孔3个月后较术前增加6mm。27例植骨融合。1例植骨块吸收,但症状改善。最常见的并发症为脑脊液漏和神经根牵拉刺激,最终缓解。结论后路椎体间及后外侧植骨融合术结合椎弓螺钉系统固定治疗下腰椎不稳能够达到充分减压,即刻的腰椎稳定性的重建以及长期骨性融合的治疗目的。

中枢神经系统血管周细胞瘤2例报告及文献复习

目的报告2例经手术病理证实的中枢神经系统血管周细胞瘤的临床特点,并复习相关文献,以提高诊断水平。方法回顾2例中枢神经系统血管周细胞瘤患者的临床表现、影像学表现、术中所见及术后病理学资料,并结合文献对其临床表现、病理特点及诊治进行探讨。结果颅内及椎管内血管周细胞瘤患者各1例,其MRI表现均与周围组织边界清晰,增强后明显强化。术中见肿瘤外观呈灰红色,质地硬韧,边界尚清,血供丰富。术后病理诊断为血管周细胞瘤(WHOII级)。结论中枢神经系统血管周细胞瘤较罕见,需与中枢神经系统的其他肿瘤(如脑膜瘤)相鉴别,治疗上以手术切除为首选,易复发和转移,术后应行常规放射治疗。

隔离开关触头位置的实时在线检测装置

为监测倒闸操作中隔离开关一次侧的状态,采用激光感应技术设计了隔离开关检测装置,实现了对远方遥控操作隔离开关一次侧动触头位置的精确监测,解决了后台遥控隔离开关无法观察闸刀实际动作的问题,提高了电力设备操作运行的可靠性。

腰穿置管引流治疗老年患者术后脑脊液皮漏58例

部分老年患者在后颅窝及脊髓术后出现脑脊液切口漏、皮下积液、切口假性愈合等并发症〔1〕,处理起来较复杂,一些病人甚至需再次手术处理,不但增加了患者的痛苦,也增加了相应的住院费用。本院自2006年起应用腰穿置管持续引流的方法治疗这类并发症,效果良好。

中枢神经系统血管周细胞瘤临床病理学观察

目的探讨中枢性血管周细胞瘤(haemangiopericytoma,HPC)的临床特点、影像学特征、免疫表型。方法对4例中枢性HPC患者临床病理资料进行总结分析,随访3～24个月,并复习相关文献。结果男性2例,女性2例,平均年龄50岁。4例患者均先行肿瘤切除术,其中2例术后行放疗。免疫表型:3例vimentin、CD34、CD99均(+),3例EMA(-)性,1例EMA灶状(+)。例3和例4的Ki-67增殖指数分别为灶状5%和10%。随访3～24个月,肿瘤无复发及颅外转移。结论中枢性HPC发病率极低,其影像学表现与脑膜瘤相似,确诊均需免疫组化标记来证实,但其与脑膜瘤在生物学行为、组织学及治疗预后方面均不同,故中枢性HPC患者术后需进行长期随访,及早发现复发或转移并给予及时处理,可降低患者病死率。

阿尔茨海默病与氧化应激的研究进展

阿尔茨海默病（AD）是一种由神经系统变性引起的疾病,又叫老年痴呆症。近年来,我国AD的发病也逐年上升。目前药物治疗是治疗AD最主要方式之一。本文对AD发病机制的各种学说与氧化应激的关系进行综述。

无骨折脱位型颈脊髓损伤模型的实验研究

目的建立一种理想的模拟无骨折脱位型颈髓损伤的实验模型。方法经颈前路于C5椎体植入钛质螺钉,通过螺钉的缓慢拧入产生对颈脊髓的慢性压迫。后方经C5、6椎间孔插入导管球囊,膨胀后形成急性后路压迫。结果通过对羊行为学、影像学、组织学观察,羊颈脊髓损伤模型符合无骨折脱位型脊髓损伤病理改变的特点。结论该造模方法是一种简便,理想及可靠的实验方法。

单鼻孔经蝶窦入路显微手术切除垂体腺瘤

目的探讨单鼻孔经蝶入路切除垂体瘤的手术技巧和应用价值。方法对40例采用该入路手术治疗的垂体瘤病人临床资料进行回顾分析。结果40例患者中,肿瘤全切34例,大部切除6例;31例功能性腺瘤患者术后垂体激素水平23例恢复正常,其余8例亦有不同程度恢复。视力、视野较术前均有不同程度改善,月经恢复13例,妊娠1例。结论此术式手术路径短,麻醉及手术时间短,对病人打击小,术后恢复快,术后并发症少,费用低,值得推广。