绞股蓝在治疗呼吸系统疾病中的应用

目的绞股蓝不仅在传统医学中有着广泛应用,同时在现代科学研究中对呼吸系统疾病治疗方面也显示出独特的潜力。因此,本文综述了绞股蓝的植物分类学特征及其在民族医学中的历史用途,突出其在多种传统治疗中的角色。详细讨论了绞股蓝的植物化学特性,包括其主要活性成分的基础物质、来源及合成途径。深入分析了绞股蓝对呼吸系统疾病的治疗作用,同时结合网络药理学方法,揭示了其潜在的治疗机制和作用靶点。最后通过文献计量学分析,评估了近年来关于绞股蓝治疗呼吸系统疾病研究的趋势与发展。本文通过多角度综述,系统总结了绞股蓝治疗呼吸系统相关疾病的研究进展以及应用前景,为绞股蓝的临床研究和应用提供了理论基础和科学依据。

呼吸道合胞病毒感染相关的lncRNA研究进展

呼吸道合胞病毒(RSV)引起的肺部感染是人类健康的一大负担,至今无特异的疫苗和(或)抗病毒药物进行有效的防治,并且发病机制不完全清楚。长链非编码RNA(1ncRNA)是病毒感染过程中宿主-病毒相互作用的关键调节分子,有研究发现lncRNA在RSV感染后出现差异性表达,部分通过促进宿主的免疫细胞成熟、调控免疫分子、调控RSV的基因或蛋白表达来影响RSV的复制,很可能是RSV感染诊断的潜在生物标记和(或)治疗靶点。本文对RSV感染进程中可能有重要作用的lncRNA进行综述,以加深对lncRNA参与的RSV感染机制的理解。

脐带间充质干细胞外泌体对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺部炎症的作用机制探讨

目的探讨人脐带间充质干细胞外泌体对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺部炎症的作用及机制。方法将18只SD雄性大鼠随机分为Control组、COPD组、COPD+Exo组,每组6只;COPD组、COPD+Exo组大鼠采用香烟烟熏+脂多糖(LPS)雾化吸入的方法建立COPD大鼠模型,COPD+Exo组经尾静脉注射100μL人脐带间充质干细胞外泌体稀释液(含2×107个外泌体),Control组和COPD组注射等量的磷酸盐缓冲液。干预后1周处死大鼠,收集外周血、肺泡灌洗液(BALF)和肺组织。HE染色观察大鼠肺组织病理改变,全自动血细胞分析仪计数外周血炎性细胞数目,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF和血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,qRTPCR检测肺组织中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达,Western blot检测肺组织中Toll样受体4(TLR4)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB p65)和核因子抑制蛋白(IκBα)的表达。结果Control组大鼠肺泡结构完整、形态规则;COPD组大鼠肺泡结构紊乱,部分肺泡不规则扩张、融合成肺大疱甚至破裂,肺泡间隔增宽且可见较多炎性细胞浸润。与COPD组比较,COPD+Exo组大鼠肺泡结构较完整,肺泡间隔炎性细胞浸润减少,外周血中炎性细胞减少,BALF、血清及肺组织中IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平降低(P<0.05);肺组织TLR4、IκBα蛋白表达水平升高,p-NF-κB p65表达水平降低(P<0.05)。结论人脐带间充质干细胞外泌体通过调控TLR4/核因子κB(NF-κB)信号通路减轻COPD大鼠的肺部炎症,从而发挥肺保护作用。

丙烯醛刺激小鼠气道粘液高分泌新的分子机制-p38 MAPK/MMP-9信号通路调控MUCIN5AC表达

目的探讨p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路及其特异性抑制剂SB203580在气道粘液高分泌中的作用,阐明p38 MAPK、基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粘蛋白基因转录中的相互作用机制。方法小鼠吸入丙烯醛21d建立模型,对照组采用生理盐水吸入,干预组予SB203580腹腔注射。于第7天、第21天处死动物。结果小鼠吸入丙烯醛21d后出现明显的气道粘液高分泌表现,经SB203580治疗后粘液分泌明显减轻;拮抗p38MAPK后MUCIN5ACTMMP-9蛋白、mRNA表达量下降(P<0.01)。结论丙烯醛吸入可致小鼠气道粘液高分泌,p38 MAPK信号通路可在转录水平调节MMP-9,最终调控MUCIN5AC基因表达,揭示新的引起气道粘液高分泌的分子机制和有效的治疗靶点。

慢性阻塞性肺疾病患者血清白介素8的临床意义

目的评价慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者急性加重期血清白细胞介素8(IL-8)的变化特点及其与肺功能的相关性,探讨IL-8在COPD中的临床意义。方法分别测定63例COPD急性加重期患者治疗前后血清IL-8水平及一秒钟用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC),并进行相关性分析。结果COPD急性加重期患者治疗前后IL-8水平对比分析具有显著差异(P<0.001)。同时,血清IL-8与FEV1/FVC呈负相关。结论IL-8参与了COPD的气道炎症,对判断COPD的急性加重、治疗效果及呼吸功能具有重要的临床意义。

p38丝裂原激活蛋白激酶特异性抑制剂SB203580减轻小鼠气道炎症及黏液高分泌

目的探讨小鼠吸入丙烯醛后是否出现气道黏液高分泌及其产生机制,观察p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在气道炎症损伤、黏液高分泌中的作用,以及应用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预后对气道炎症、MUC5AC的影响。方法64只小鼠随机分为四组丙烯醛模型组、丙烯醛+SB203580治疗组、生理盐水对照组和SB203580对照组,每组16只小鼠。于第7和21d各组随机处死8只,采集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本。BALF作细胞总数及分类计数,石蜡包埋肺组织切片HE染色观察形态学,AB-PAS染色了解气道杯状细胞和黏液物质,免疫组织化学及RT-PCR方法进行黏蛋白基因半定量分析,Western-Blot定量分析信号通路蛋白。结果小鼠吸入丙烯醛21d后出现明显的气道炎症和黏液高分泌,经SB203580治疗后,炎性细胞浸润减少,杯状细胞增生改善,黏液分泌明显减轻。丙烯醛模型组、丙烯醛+SB203580治疗组的AB-PAS阳性着色面积比较差异有统计学意义[(15.54±0.93)%比(9.82±0.56)%,P<0.01];丙烯醛模型组与丙烯醛+SB203580治疗组之间MUC5AC阳染积分光密度比较差异有统计学意义(0.153±0.017比0.066±0.007,P<0.01)。拮抗p38MAPK后,MUC5ACmRNA表达量下降(7d0.934±0.061,21d1.041±0.026),与模型组相应时间点比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组磷酸化p38MAPK表达与模型组比较明显下调(0.844±0.014比1.004±0.039,P<0.01)。结论小鼠吸入丙烯醛模型中,p38MAPK信号通路调控MUC5AC基因转录,SB203580可减轻气道炎症和气道黏液高分泌。

p38MAPK与MMP-9在气道粘液高分泌中的调控作用

目的了解基质金属蛋白酶9(MMP-9)与p38丝裂原激活蛋白激酶(p38M APK)在气道粘液高分泌中的调控作用。方法利用小鼠吸入丙烯醛(21天)构建气道粘液高分泌模型,对照组采用生理盐水吸入,干预组予p38MAPK特异性抑制剂SB 203580腹腔注射。应用A日-PA S、1mmU nO h istO chem ist叮、RT-PCR和W estefri-b,ot等方法,于第7天、第21天时间点取标本检测。结果丙烯醛可致小鼠出现明显的气道粘液高分泌表现,拮抗p38M APK后气道粘液物质减少、MUC 5AC和MMP-9蛋白、mRNA表达量下降。结论p38M APK信号通路特异抑制剂可减轻气道粘液分泌,其机制可能涉及调控MMP-9,从而下调MUC 5AC表达。

西藏藏族群体15个短串联重复序列位点的遗传多态性研究

目的获得15个短串联重复（Short tandem repeat，STR）基因座在西藏藏族人群中的基因型及等位片段频率分布，获得相应位点的群体遗传学数据。方法126份EDTA抗凝血样采自西藏藏族地区无血缘关系的藏族个体。Chelex法提取DNA，PCR复合扩增，自动基因分析仪电泳收集电泳结果数据，基因扫描分析软件计算扩增产物片段相对大小，基因分型软件进行样本基因型分型。结果全部样本的每个STR基因座都获得了清晰的基因型分型结果。15个STR基因座的杂合度介于0.627-0.897之间。累计非父排除率和累计个人识别机率为0.999999527和〉0.999999999。结论经一次扩增电泳可获得15个STR基因座的基因型分型结果，累计非父排除率和累计个人识别机率较高，适用于法医学亲权鉴定和个人识别。

BTLA在重症社区获得性肺炎患者中的表达及糖皮质激素干预动物模型的影响

目的本研究通过观察BT淋巴衰减子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)在重症CAP患者外周血淋巴细胞及支气管黏膜上的表达,外源性干预LPS-诱导的急性肺部炎症小鼠模型BTLA表达对肺部炎症的作用以及给予糖皮质激素对BTLA表达的影响。方法利用流式细胞学分析重症CAP患者外周血BTLA^+CD4^+淋巴细胞比例,另外对重症CAP患者支气管黏膜常规行HE染色和免疫组织化学检测BTLA表达情况。利用流式细胞学分析LPS诱导的急性肺部炎症模型右心血BTLA^+CD4^+淋巴细胞比例。收集肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)行炎症细胞分类计数,并利用ELISA检测炎症因子。取肺组织分别行HE染色、免疫组织化学染色和蛋白印迹。结果流式细胞学分析重症肺炎患者外周血中BTLA^+CD4^+淋巴细胞比例明显高于正常对照组。此外,支气管黏膜HE染色结果显示重症CAP患者支气管黏膜有大量炎症细胞浸润,并且伴有支气管壁增厚;进一步用免疫组织化学检测支气管黏膜BTLA表达,结果提示重症肺炎患者支气管黏膜BTLA表达明显增高,浸润的炎症细胞BTLA表达增高明显。流式细胞学分析LPS诱导的急性肺部炎症模型小鼠右心血中BTLA^+CD4^+淋巴细胞比例明显高于正常对照组。利用激动性抗-BTLA抗体6A6干预急性肺部炎症模型后淋巴细胞BTLA表达较模型小鼠明显增高,同时,激动性抗-BTLA抗体6A6能减轻肺部炎症反应和抑制NF-κB信号通路激活。利用糖皮质激素干预急性肺部炎症模型后淋巴细胞BTLA表达较模型小鼠明显增高,糖皮质激素能减轻肺部炎症反应和抑制NF-κB信号通路激活。结论通过本研究我们推测BTLA信号可能参与了重症CAP患者的免疫调节过程,BTLA可能成为重症CAP治疗的一个新靶点。同时,BTLA的表达可能反应患者机体的免疫状态,为临床使用糖皮质激素治疗提供指导作用。

TGF-β_1诱导人胎肺成纤维细胞分泌血管内皮生长因子以及布地奈德的调控作用

目的应用转化生长因子(TGF-β1)刺激人胎肺成纤维细胞(HFL-1)检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并观察布地奈德(Budesonide)对HFL-1分泌VEGF的干预作用。方法采用体外培养细胞法,实验组加入不同浓度TGF-β1刺激,孵育72 h后收集细胞培养上清液,经EIA法检测VEGF含量;同时在0.5 ng/ml TGF-β1刺激下,观察应用不同浓度布地奈德对VEGF的调控。结果低浓度TGF-β1上调VEGF的表达,但与对照组比较无显著性差异;随着TGF-β1刺激浓度加大,VEGF含量也逐渐增加,当TGF-β1浓度为0.5 ng/ml时,VEGF相对含量与空白对照组相比具有明显差异(P<0.01)。10-7mol/L布地奈德不仅能明显阻断内源性VEGF的表达,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),还可明显下调TGF-β1诱导的VEGF分泌增加效应,与相同浓度单独TGF-β1刺激组比较,VEGF含量明显下降,二者比较具有统计学意义(P<0.01)。结论 TGF-β1能够诱导HFL-1增殖及VEGF分泌增加,具有浓度依赖效应。提示TGF-β1诱导VEGF分泌增加可能是纤维化形成的重要原因之一;抑制VEGF生成及血管新生可能是布地奈德发挥抗纤维化作用的重要分子机制。

慢性阻塞性肺疾病患者血清γ-谷氨酰转肽酶与炎症的相关性

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期及急性期患者血清γ-谷氨酰转肽酶(GGT)的变化及其与炎症的关系。方法选取60例无肝脏及胆道疾病的COPD稳定期患者和60例急性期患者,测定患者血清GGT活性与C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT))及白介素(IL)-6水平,并进行相关分析。结果 COPD患者急性加重期与稳定期比较:血清GGT、CRP、PCT及IL-6均明显升高(P<0.05);COPD患者稳定期血清GGT与CRP、PCT及IL-6的相关系数分别为:0.227、0.105、0.011;COPD急性期血清GGT与CRP、PCT及IL-6的相关系数分别为0.546、0.624、0.116。结论血清GGT水平在COPD急性期明显升高,并与血清CRP、PCT及IL-6相关。血清GGT水平可用来评估COPD患者的炎症及氧化应激。

慢性阻塞性肺疾病患者肺通气功能程度与夜间低氧发生的关系

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺通气功能程度与夜间低氧发生的关系。方法选择稳定期COPD患者48例,其中肺通气功能为轻度、中度、重度、极重度者均为12例,采用肺功能检测仪检测患者的肺通气功能指标,监测整夜多导睡眠图观察夜间血氧指标,并对其肺通气功能与夜间血氧指标进行相关分析。结果随病情程度加重,COPD患者的第1秒用力呼气容积占预计值百分比、第1秒用力呼气容积/肺活量、肺活量、最大呼气流量、平均血氧饱和度、清醒时平均血氧饱和度、最低血氧饱和度逐渐降低,残气容积(RV)、RV/肺总量、氧减饱和度指数、血氧饱和度低于90%的时间占睡眠总时间的百分比逐渐升高(P<0.05或<0.01)。COPD患者的肺通气功能程度与平均血氧饱和度呈负相关(P<0.05)。结论 COPD患者夜间低氧发生与其肺通气功能程度相关。

白细胞介素-32与慢性阻塞性肺疾病患者肺功能损害的相关性

目的探讨白细胞介素(IL)-32与慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能损害的相关性。方法选取正常人30例,COPD急性加重期(AECOPD)患者30例。AECOPD组接受布地奈德混悬液2 mg雾化吸入,3次/d,治疗1 w。收集正常人及AECOPD患者治疗前后痰液和静脉血,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测痰液和血清中IL-32蛋白的表达。检测正常人及AECOPD患者治疗前后肺功能,分析COPD患者IL-32浓度与肺功能损害的相关性。结果 AECOPD组痰液及血清中IL-32浓度明显升高(P<0.05),治疗后血清IL-32浓度较治疗前明显降低(P<0.05);IL-32浓度与第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比[FEV1(%)]、第1秒用力呼气量占用力肺活量比值(FEV1/FVC)及氧合指数呈负相关关系。结论 IL-32诱导COPD气道炎症,使肺功能损害加重;布地奈德能有效抑制IL-32的表达,起到控制气道炎症、改善肺功能的作用。

清醒麻醉镇静下支气管镜检查临床应用体会

纤维支气管镜检查为呼吸科一种侵入性辅助检查，目前大多采用局部麻醉方法，一般是给予利多卡因、丁卡因等进行局麻。由于局部麻醉效果的局限性，当纤维支气管镜进人声门及声门以下气管时，患者易出现气憋、咳嗽，感觉极不舒服，有明显不良记忆，很多病人不愿意做第二次检查，有的甚至在做检查过程中出现拔管行为，时间延长，增加检查危险性。采用静脉麻醉联合局部麻醉使支气管镜检查耐受性更好，患者无痛苦经历，易于接受。

利用毛细管电泳技术分析云南回族人群7个STR基因座的遗传多态性

目的对云南回族群体的D3S1358/THO1/D21S11/D18S51/D5S818/D13S317/D7S820等7个STR基因座的遗传多态性进行群体遗传学研究。方法利用荧光标记复合扩增及毛细管电泳自动荧光检测的方法,对204例无关个体的7个STR基因座进行检测。结果获得7个基因座的各基因座等位基因的分布频率和基因型频率,结果均符合Hardy-Weinberg平衡。计算了各基因座的杂合度(He)、个人识别能力(PD)、偶合率(PM)、非父排除率(PE)和多态性信息总量(PIC)等群体遗传学数据。结论利用毛细管电泳技术可对这7个STR基因座进行很好的检测,这些基因座多态性丰富、灵敏度高,可用于人类遗传分析及法医学中的亲子鉴定和个人识别。

血管内皮生长因子受体抑制剂SU5416对小鼠肺间质纤维化的影响

目的 探讨血管内皮生长因子受体抑制剂SU5416在博来霉素所致小鼠肺间质纤维化炎症反应中的作用。方法 48只雄性C57BL／6小鼠随机分为对照组、模型组、SU5416早期处理组和SU5416晚期处理组。模型组和SU5416处理组予以博来霉素溶液（10mg／kg）气管内注射建立小鼠肺纤维化模型，对照组予以等体积生理盐水注射。SU5416处理组在造模后分两个阶段（早期：第1～14d；晚期：15～28d）予以SU5416溶液（50mg／kg）腹腔内注射，每周2次；对照组和模型组则予以等体积生理盐水注射。各组随机于造模后第14d和28d分两批处死，检测小鼠肺组织羟脯氨酸（HYP）、支气管肺泡灌洗液（BALF）中自细胞和乳酸脱氢酶（LDH）的变化。结果 与对照组同时间点比较，模型14d组肺组织HYP、BALF中自细胞数和LDH含量明显增高（P均〈0．01）；28d组肺组织HYP含量亦显著升高（P〈0．01），BALF中自细胞数和LDH含量无明显变化（P均〉0．05）。SU5416早期干预后增高的LDH、HYP和白细胞受到明显抑制（P均〈0．01）；晚期干预则没有明显作用。结论 早期予以SU5416可以抑制早期炎症反应，减轻肺间质纤维化。

特发性肺纤维化发病机制及血管新生作用的研究进展

特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种原因不明的进行性疾病,局限于肺部的弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱,最终导致以肺纤维化伴蜂窝状改变为特征。因其进展快、死亡率高,被世界卫生组织称为肺系疑难疾病。近年来,IPF发病机制及治疗靶点研究已成为国际研究的热点,但尚无有效治疗措施。因此,加深对IPF发病机制的阐明对了解疾病的发生、发展及防治具有重要意义。目前,血管新生与IPF关系已逐渐成为国际研究热点。文中主要就IPF发病机制最新研究进展及血管新生在IPF中的作用进行综述。

呼吸道合胞病毒感染与慢性阻塞性肺疾病研究进展

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease．COPD）是严重危害人类健康的疾病。其发病率及死亡率呈现逐年上升的趋势，这一现象在发展中国家尤其明显。呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）是婴幼儿及青少年呼吸道感染常见病原体，近些年随着认识的深人，RSV被认为是成人呼吸道感染及COPD发病的重要病原体[1]。现将RSV与COPD相关研究综述如下。

SD大鼠骨髓间充质干细胞-肝细胞共培养上清液细胞因子分析

目的检测SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)-肝细胞共培养上清液中的细胞因子,探讨细胞因子的作用,为生物人工肝及临床治疗肝功能衰竭提供理论依据。方法分离SD大鼠BMSC及原代肝细胞,将生长良好的第3代BMSC与肝细胞按1∶10比例体外共培养(实验组),以单独肝细胞(对照组)和单独BMSC(BMSC组)作为对照。观察不同情况下肝细胞生存时间和形态,培养48h后用RayBiotech抗体芯片检测细胞培养上清液中的细胞因子。结果实验组的肝细胞生长增殖迅速,肝细胞可存活14d;对照组的肝细胞生长增殖缓慢,细胞培养可存活9d。实验组上清液中的细胞因子表达谱发生了明显改变:IL-1、IL-6、IL-10均较对照组及BMSC组升高2倍以上,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 BMSC-肝细胞共培养,BMSC可能通过分泌IL-1、IL-6和IL-10促进肝细胞生长,延长肝细胞生存时间。