霍乱毒素B亚单位与谷氨酸脱羧酶抗原表位肽融合蛋白的表达及鉴定

目的:在大肠杆菌中表达霍乱毒素B单位(CTB)与谷氨酸脱羧酶(GAD)抗原表位肽段(531～545)的融合蛋白。方法:通过PCR技术将CTB基因与GAD基因融合在一起,插入pET22b载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经诱导获得融合基因的表达;对表达产物进行包涵体复性后,纯化得到融合蛋白分子;对该融合蛋白分子进行了Western印迹和GM1-ELISA分析。结果:表达的融合蛋白的相对分子质量约为14000,Western印迹表明该融合蛋白具有霍乱毒素抗原性;GM1-ELISA实验表明该融合蛋白能够特异性地结合神经节苷酯GM1,表明该蛋白具有与CTB相似的五聚体结构。结论:融合蛋白CTB-GAD的成功表达,为后续动物实验提供了充足的抗原。

冻干口服霍乱rBS－WC菌苗安全性及免疫原性的人群试验

为考察国产冻干重组霍乱毒素Ｂ亚单位－灭活霍乱弧菌全菌体（ｒＢＳ－ＷＣ）口服菌苗的安全性及免疫原性，将３６９人随机分为３组，采用双盲法分别服用高剂量菌苗（５ｍｇｒＢＳ＋１×１０＂ＷＣ）、低剂量菌苗（１ｍｇｒＢＳ＋１×１０＂ＷＣ）及安慰剂。服苗方案为０、７、２１天。试验结果显示，服苗组的不良反应率为０．４％（１／２４７），对照组无不良反应；免疫组血清抗体和粪抗体的阳转率及抗体水平均显著升高；两免疫组间血清及粪抗体阳转率及抗体水平差异无显著性；对不同性别、年龄及服苗次数，抗体的产生有所不同。结果表明。

冻干口服霍乱rBS-WC疫苗现场试验及评价

为考核冻干口服霍乱rBS-WC疫苗的安全性、免疫原性和对人群的保护效果，1997年7月～1998年7月在广州军区、南京军区指战员中，进行了冻干口服霍乱rBS-WC疫苗（胶囊剂型）的现场试验．将6079人随机分为3组，采用双盲法分别服用高剂量疫苗（1mgrBS＋1×1011WC）、低剂量疫苗（lmgrBS＋5×1010WC）及安慰剂．从疫苗的副作用、人群的抗体反应、服苗后半年内急性腹泻病的发病率、对产毒性大肠杆菌（ETEC）感染的保护率等方面进行了考核，结果表明该疫苗安全、有效．