DNFB柱前衍生化RP-HPLC测定大黄种子氨基酸的含量

采用柱前衍生RP-HPLC法测定大黄种子中氨基酸的含量。6mol／L盐酸水解得到氨基酸，以2，4-二硝基氟苯（DNFB）为柱前衍生化试剂，梯度洗脱。色谱柱为Gemlmi—NX C18（4．6mm×250mm，5μm）；流动相A相为0．1M乙酸钠水溶液，B相为乙腈-水（1：1），柱温37℃，检测波长360nm。结果表明，三种正品大黄种子中均含有17种氨基酸，总量在11．30％-19．26％。该方法灵敏、准确，有良好的重复性和稳定性。

切片厚度和烘干温度对唐古特大黄蒽醌含量影响的研究

采用HPLC-DAD法测定了不同切片厚度在不同烘干温度下唐古特大黄中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚、大黄酚的含量,探究切片厚度和烘干温度对唐古特大黄药材质量的影响。色谱柱采用的是Agilent Eclipse plus C 18(4.6×250 mm,5μm);流动相A相为色谱级别甲醇,B相为0.1%冰乙酸溶液;柱温25℃;检测波长254 nm。结果表明:75℃烘干,切片厚度以0.4~2 cm或6~7 cm;25、50℃时烘干,切片0.4~3 cm或6~8 cm,药材总蒽醌含量较高,其他厚度含量较低,芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚、大黄酚的含量也符合上述规律。结论唐古特大黄产地初加工时,75℃烘干,切片厚度以0.4~2 cm或6~7 cm为宜;25和50℃时烘干,切片0.4~3 cm或6~8 cm为宜,从而保证唐古特大黄药材的质量。

唐古特大黄药材干燥方法研究

综合唐古特大黄外观色泽、干燥耗时、折干率、有效药用成分(蒽醌、番泻苷、鞣质)含量等因素,探索唐古特大黄药材的最佳干燥方法。结果表明:唐古特大黄干燥过程中,随着水分的散失,生理活性、物理形态、有效成分的含量也随之发生显著的变化,干燥方法对唐古特大黄的品质影响较大。综合唐古特大黄的外观色泽、耗时、耗能、折干率、蒽醌、番泻苷、鞣质含量、设备要求和适宜大规模推广等方面因素,唐古特大黄干燥建议采用阴干、晾晒或45~55℃烘干。

6种病毒抑制剂对西藏青稞上大麦黄矮病的防治效果

通过田间小区试验,开展了6种病毒抑制剂对西藏青稞上大麦黄矮病防治效果的研究。采用带毒蚜虫人工接种法,于青稞起身拔节期每株接种10~15头带毒麦长管蚜,7 d后灭蚜,灭蚜后3 d喷施病毒抑制剂,在成株期出现黄矮病症状后调查病株率、病情指数、防治效果,以及长势和产量。结果表明,6种病毒抑制剂对青稞上大麦黄矮病有不同程度的防治效果,其中6%寡糖·链蛋白WP、0.5%香菇多糖AS和8%宁南霉素AS防治效果分别为65.38%、52.41%和50.11%;处理后的青稞有不同程度的增产,其中6%寡糖·链蛋白WP、0.5%香菇多糖AS和40%烯·羟·吗啉胍SP处理增产率分别为78.44%、53.22%、27.42%。综合本文结果表明,6%寡糖·链蛋白WP、0.5%香菇多糖AS对西藏大麦黄矮病有较好的防治效果和增产率。

2个青稞品种（系）原种田绿色增产增效技术研究

采用绿色增产增效技术模式,于2018年在拉孜县夏杂村开展青稞新品种藏青690和新品系12-10556的原种田繁育研究。结果表明,青稞原种产量较对照有显著提高,同时改变了当地农牧民的传统种植习惯,增强了农牧民对田间管理的认知程度,为以后青稞种植的精细化管理奠定基础。

高寒山生柳灌丛的群落特征研究

山生柳(Salix oritrepha)是我国的特有种。通过对山生柳灌丛植物群落结构特征的定量分析结果表明:该类型由97种植物组成,隶属30科65属。其中有灌木10种,草本植物87种,山生柳为建群种;地理成分以北温带分布为主;生活型以地面芽植物为主(52.59%),其次为地下芽植物(27.89%)和高位芽(10.31%),地上芽和一年生植物仅占9.21%;群落结构比较简单,大体可以分为灌木层和草本层植物。灌木层物种多样性指数偏低,垂直结构各层次间物种多样性大小为草本层>灌木层。

青海玉树地区主要灌丛类型地上生物量及其影响因素

以青海玉树地区主要灌丛鲜卑花群系、百里香杜鹃群系、细枝绣线菊群系和山生柳群系为研究对象,采用样方收获法研究其地上生物量分配特征。结果表明：5种类型的灌丛地上生物量在21.6-34.33 t/hm2之间,地上生物量最大的是细枝绣线菊群系,最小的是金露梅群系,5种灌丛群落地上生物量平均是29.64 t/hm2,不同层次生物量大小顺序是：灌木层〉草本层〉凋落物层,各自生物量占地上生物量的比例分别是73.35%、14.27%、12.35%。5种灌丛类型建群种生物量大小依次是：细枝绣线菊群系〉金露梅群系〉百里香杜鹃群系〉鲜卑花群系〉山生柳群系。影响玉树地区灌丛地上生物量的主要因素是海拔、群落盖度、灌丛高度及放牧。灌丛地上生物量随着海拔的上升而下降,随着群落盖度和灌木高度的增加而增加。放牧对灌木地上生物量的影响机制尚不明确。

HPLC法测定青海栽培与野生桃儿七中2种木脂素类的含量

采用超声法和HPLC法提取和测定青海栽培桃儿七植株中不同部位鬼臼毒素和4'-去甲基鬼臼毒素的含量,并与野生桃儿七药材进行比较。结果表明,青海栽培和野生桃儿七植株内鬼臼毒素的含量分布均表现为:根>叶柄>叶,栽培桃儿七的叶柄和叶中鬼臼毒素含量均大于野生桃儿七;青海栽培桃儿七植株内4'-去甲基鬼臼毒素含量表现为:叶柄>根,叶中未检测到此物质;野生植株内4'-去甲基鬼臼毒素的含量分布表现为:侧根>叶柄>根状茎>叶,果实中未检到此物质,栽培桃儿七叶柄中4'-去甲基鬼臼毒素的含量大于野生桃儿七。

羌活(Notopterygium incisum)nrDNAITS和cpDNA rpl20-rps1序列分子进化特点的分析

应用PCR产物直接测序法分析了羌活居群间nrDNA(核糖体DNA)ITS序列和cpDNA(叶绿体DNA)rpl20-rps12的碱基差异,从而初步研究两套植物基因组的变异速率。采用改良的CTAB法从硅胶干燥的羌活叶片中提取总DNA,并对nrDNA ITS和cpDNA rpl20-rps12区域进行扩增、纯化、测序。nrDNAITS序列共有635 bp,有变异位点17处,变异位点百分率为2.68%,(G+C)含量为57.83%。cpDNA rpl20-rps12序列共有767 bp,有变异位点35处,变异位点百分率4.56%,(G+C)含量为33.06%。比较发现,羌活nrDNAITS区域较cpDNA rpl20-rps12序列保守,变异速率较慢。通过对ITS和rpl20-rps12序列单倍型(haplotype)进行分析发现,两者得出的结论一致,即现有分布范围经历了居群近期范围扩张。因此,羌活nrDNA ITS序列适合该种的谱系地理学研究。

拉萨河曲丝叶蜂发生概况与防控对策

经调查,自2016年来,拉萨市城关区、聂当乡、柳梧新区和堆龙德庆区均发现河曲丝叶蜂危害柳树,发生面积逐年扩大,河曲丝叶蜂逐渐成为拉萨市危害最为严重的林业有害生物之一。分析了拉萨市河曲丝叶蜂发生的3种原因,并提出了相应的防控对策。

西藏大麦黄矮病病毒株系鉴定及介体蚜虫传毒能力分析

从西藏青稞发病田采集黄矮病株10份,经生物学分离并用BYDV-GAV、PAV、RPV、SGV 4种抗血清进行酶联免疫吸附(即EILSA法)测定和RT-PCR法验证。拉萨曲水6份标样与GAV抗血清有强反应,而与PAV、RPV、SGV抗血清无反应,说明拉萨曲水大麦黄矮病毒的主要株系为GAV株系。采用无毒麦无网长管蚜、麦长管蚜、禾谷缢管蚜传毒,麦长管蚜对GAV株系病毒传毒强,拉萨、山南两地的麦长管蚜传毒力无明显差异。

青稞细菌性病害的病原菌分离与鉴定

从扎朗县扎其乡采集青稞细菌性病害典型病株,通过菌物的分离与纯化,按照柯赫氏法则进行致病性测定及菌株鉴定。结果表明,该菌物为黄单孢杆菌属细菌。

温室番茄意大利蜜蜂和熊蜂授粉效果研究

以金棚一号番茄为试验材料,设意大利蜜蜂授粉、熊蜂授粉和自然授粉3个处理,测定番茄的单株重量、单株结果数、单株畸形果数和单果直径、高度、重量。结果表明,采用意大利蜜蜂为金棚一号番茄授粉可使其单株产量、单果重、果实数量、单果直径和单果高度提高,畸形果率降低。初步确定在金棚一号番茄上,蜜蜂授粉效果大于熊蜂授粉。

西藏本地膜翅目昆虫种类调查

为摸清西藏本地膜翅目昆虫种类组成及分布情况,通过野外采集、标本鉴定、查阅历史资料和查对有关单位标本等方法,于2015—2016年,对西藏5个调查点膜翅目昆虫种类进了初步调查。初步鉴定西藏本地膜翅目昆虫17科38属55种,其中,蜜蜂科种类最多,有16种;其次是叶蜂科,有7种。在5个调查点中,波密膜翅目昆虫种类最丰富(25种),米林次之(21种),察隅膜翅目昆虫种类排第3位(17种),林芝排第4位(14种),曲水膜翅目昆虫种类相对贫乏(3种)。

西藏一种芥菜型油菜PGIP基因的克隆与序列分析

防治油菜菌核病的有效方法是培育抗菌核病的油菜品种。多聚半乳糖醛酸酶阻遏蛋白(polygalacturonase inhibiting protein,PGIP),是植物体内一种重要的抗真菌蛋白。本研究根据NCBI中发表的PGIP基因序列设计引物,从芥菜型油菜‘藏油6号’中克隆得到全长1 048bp的PGIP基因序列。其核酸序列与NCBI数据库中登录的PGIP基因序列同源性为99%。该序列翻译后得到的氨基酸序列与NCBI上公布的油菜PGIP序列同源性为99%。该蛋白质序列中包含8个亮氨酸重复区(leucine-rich repeat,LRR)。过去研究结果显示芥菜型油菜比甘蓝型、白菜型油菜对菌核病的抗性普遍较高,但是未能搞清楚具体的原因,只是提出抗菌核病基因主要分布在芥菜型油菜中,其次是甘蓝型油菜中。通过研究证实了芥菜型油菜上PGIP基因具有保守性、疏水性,而且结构稳定,具有多个信号肽,能够高效地发挥其抗核盘菌的功能。今后在油菜育种上应利用芥菜型油菜的优势,发挥其抗病育种的潜力。

西藏蜜源植物调查分析

为使西藏蜜源植物得到充分利用,摸清其现状,采用野外调查为主、走访蜂农为辅的方式进行蜜源植物调查,咨询相关专家、查阅相关书籍和文献进行蜜源植物鉴定。初步确定西藏地区蜜源植物有18科51属64种,均为双子叶植物,其中主要蜜源植物20种(隶属于9科18属)、辅助蜜源植物41种(隶属于14科37属)、有毒蜜源植物3种(隶属于3科3属);生活型以草本植物为主,初花期多在夏季,蜜源植物分布相对均匀,在高海拔地区均有分布。西藏地区蜜源植物丰富,蜜质多为优质蜜,适合大力发展西藏养蜂业。

栽培唐古特大黄中多糖和蒽醌含量的动态变化研究

目的:以青海省3个不同地区栽培的唐古特大黄药材为实验材料,测定根中大黄多糖和蒽醌含量,比较多糖和蒽醌含量年际和月际的变化特征。方法:测定多糖含量采用硫酸比色法,对照品为0.102 0 mg·mL^(-1) D-无水葡萄糖标准溶液,5%苯酚溶液显色,490 nm波长处紫外分光光度仪下测定吸收度。测定蒽醌含量采用高效液相色谱法,色谱柱为Eclipse plus C_(18)(4.6 mm×250 mm、5μm),流动相A为甲醇,流动相B为0.1%乙酸溶液,梯度洗脱,检测波长254 nm。结果:(1)湟中县群加乡、湟源县东峡乡2~9年生的大黄多糖含量呈现出"M"型的变化趋势,西宁市廿里铺镇3~7年生的大黄多糖含量呈现出"V"型的变化趋势;(2)5年生的湟中县群加乡、西宁市廿里铺镇、湟源县东峡乡栽培唐古特大黄5~11月的大黄多糖含量呈现出"W"型的变化趋势;(3)湟中县群加乡、湟源县东峡乡2~9年生的大黄蒽醌含量呈现出"N"型的变化趋势,西宁市廿里铺镇3~7年生的大黄多糖含量呈现出倒"V"型的变化趋势;(4)5年生的湟中县群加乡、西宁市廿里铺镇、湟源县东峡乡栽培唐古特大黄5~11月的大黄蒽醌含量呈现出三峰变化趋势。结论:地理位置及生境条件(土壤有机质、海拔、经纬度)不同的种植地,唐古特大黄药材多糖和蒽醌含量随植物的生长发育时期节律波动(包含生长期和繁殖期的年际变化和5~11月的月际变化),且表现出基本一致的动态变化规律。

大黄种子中蛋白质、多糖和淀粉含量的测定

采用凯氏定氮法、苯酚-硫酸比色法和双波长比色法测定唐古特大黄种子、掌叶大黄种子和药用大黄种子的蛋白质、多糖和淀粉的含量。采用凯氏定氮法测定蛋白质含量,苯酚-硫酸比色法测定多糖含量,双波长比色法测定淀粉含量。唐古特大黄种子的蛋白质和多糖在三种大黄种子中含量最高,分别为21.81%、6.58%,掌叶大黄种子淀粉含量在三种大黄种子中最高,含量为32.95%。三种大黄种子中,蛋白质含量为:唐古特大黄种子>掌叶大黄种子>药用大黄种子;多糖含量为:唐古特大黄种子>掌叶大黄种子>药用大黄种子;淀粉含量为:掌叶大黄种子>唐古特大黄种子>药用大黄种子。大黄种子的蛋白质、多糖、淀粉含量丰富。测定方法精密度、准确度、稳定性均符合生物样品测定要求,可用于大黄种子蛋白质、多糖和淀粉含量的测定。

氮磷钾不同施肥配方对退化高寒草原植物群落结构的影响

以地处青海湖北岸三角城种羊场附近高寒退化的紫花针茅草原为对象,研究了施肥对植物群落盖度、物种多样性和植物类群的影响。结果表明:施肥后的第2年(2012年)和第3年(2013年)群落的总盖度显著高于施肥前(2011年)(P<0.05),且随着施肥年限的增加,群落的盖度也增加,但不同处理增加的幅度不一致;与不施肥相比,不同的施肥处理在2年和第3年物种丰富度逐渐减小;施肥后Simpson指数、Shannon指数、Pielou均匀度指数的变化无明显规律;不同植物类群对施肥的响应亦不同,施肥后第2年和第3年不同施肥处理间禾草类和杂类草生物量均显著增加(P<0.05),而莎草类和豆科变化不明显。

柴达木盆地几种荒漠灌丛植被的生物量分配格局

选择柴达木盆地的8种荒漠灌丛为研究对象,利用样方收获法对生物量及其分配格局进行了研究。结果表明:柴达木盆地荒漠灌丛生物量的空间分布具有高度异质性,介于11.11~58.63t·hm-2,平均为27.15t·hm-2。灌木层生物量是整个荒漠生态系统最重要的生物量组分,占总生物量的92.71%。灌木层地上生物量的变幅为7.93~46.10t·hm-2,地下生物量的变幅为1.15~25.64t·hm-2。地上生物量远大于地下生物量,根冠比介于0.07~2.45。几种荒漠植被的生物量在各个器官间分配格局为:枝生物量】根生物量】叶生物量,分别占建群种生物量的比例为38.05%、34.92%、27.03%。影响柴达木生物量及其分配的因子主要是灌木的高度及土壤含水量。