129株非结核分枝杆菌采用两种分子检测技术行菌种鉴定的结果分析

目的分析北京地区3个单位非结核分枝杆菌(NTM)临床分离株采用芯片杂交法(简称“芯片法”)和16SrRNA基因测序(简称“基因测序”)进行菌种鉴定的结果,为临床分枝杆菌病的快速准确诊断提供科学依据。方法用芯片法和基因测序进行北京地区3个单位129株NTM临床分离株的菌种鉴定,实验操作者之间采用双盲法,对两种鉴定方法的结果进行比较和评价。结果129株NTM菌株中,有107株进行分枝杆菌基因测序,其中59株为胞内分枝杆菌(55.1%);29株为堪萨斯分枝杆菌(27.1%);5株为龟分枝杆菌/脓肿分枝杆菌(4.7%);3株为鸟分枝杆菌(2.8%);2株为偶发分枝杆菌(1.9%);2株为戈登分枝杆菌(1.9%);1株为蟾蜍分枝杆菌(0.9%);1株为草分枝杆菌(0.9%);1株为瘰疬分枝杆菌(0.9%);4株为其他NTM(3.7%)。有116株进行芯片法分枝杆菌菌种鉴定,且有96株同时进行芯片法和基因测序法检测,两种方法进行菌种鉴定的符合率为88.5%(85/96)。基因测序发现有3株外来菌株,分别为明尼苏达分枝杆菌、熊本分枝杆菌、提门分枝杆菌(M.temen)。结论北京3家机构NTM菌种以胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌和龟分枝杆菌/脓肿分枝杆菌为主。用芯片法和基因测序对NTM临床分离株进行菌种鉴定的一致率较高。

干扰素体外释放酶联免疫法在结核病诊断中的价值

目的分析干扰素体外释放酶联免疫法(quantitative diagnostic kit for Mycobacterium tuberculosisIFN-γrelease assay,TB-IGRA)在结核病诊断中的应用价值。方法用北京万泰生物药业股份有限公司生产的结核分枝杆菌相关γ-干扰素检测试剂盒(体外释放酶联免疫法)(Wantai quantitative diagnostic kit for Mycobacteriumtuberculosis IFN-γrelease assay,WT-IGRA)(简称WT试剂)和澳大利亚Cellestis有限公司生产的QuantiFER-ON-TB(QuantiFERON-TB GOLD in tube,QFT-GIT)(简称QFT试剂)检测病区与门诊结核患者(249例)及健康者(140例)的全血标本,结果与其结核菌素试验(PPD)、痰结核分枝杆菌培养及痰涂片结果相比较,分析TB-IGRA阳性率、特异度及试剂间的相关性。结果 249例结核病患者,WT试剂和QFT试剂阳性率分别为76.3%(190/249)和67.1%(167/249),特异度都是83.3%(100/120);痰菌阳性和痰菌阴性结核病组,WT试剂阳性率分别为74.1%(43/58)和76.1%(83/109),差异无统计学意义(χ2=0.082,P>0.05);QFT试剂阳性率分别为67.2%(39/58)和65.1%(71/109),差异无统计学意义(χ2=0.075,P>0.05);WT试剂与QFT试剂总符合率为84.3%。结论 TB-IGRA对结核病有一定的诊断价值。

结核抗体检测联合结核感染T细胞斑点试验的临床诊断价值

目的 探讨结核抗体检测联合结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）在结核病诊断中的应用价值。方法 选择2016年1月1日至2017年4月12日就诊于北京老年医院的961例结核病患者[结核病组;包括364例菌阳肺结核患者（通过细菌学诊断确诊）和597例菌阴肺结核患者（通过临床进行诊断）]和非结核病的1046例患者（对照组）。所有患者同时使用上海奥普生物医药有限公司及新加坡MP生物医学亚太私人有限公司生产的结核抗体金标试剂（分别为TB-DOT、ASSURE TB试剂盒）检测血清中的结核抗体;961例结核病组中的574例及1046例对照组中的664例患者同时使用T-SPOT.TB试剂盒和2种结核抗体金标试剂进行检测。对两组患者采用3种实验室技术进行检测或联合检测（包括串联与并联）,对检测结果的敏感度、特异度进行统计学分析。结果 TB-DOT和ASSURE TB检测结核病组和对照组患者的敏感度和特异度分别为52.86%（508/961）、74.95%（784/1046）和45.99%（442/961）、76.00%（795/1046）。TB-DOT 和ASSURE TB对菌阳和菌阴肺结核患者检测的敏感度分别为64.84%（236/364）、62.09%（226/364）和45.56%（272/597）、36.18%（216/597）;菌阳肺结核患者TB-DOT和ASSURE TB检测的敏感度均高于菌阴肺结核患者,差异均有统计学意义（χ2值分别为60.99、33.69,P值均＜0.05）。结核病组和对照组患者在2种结核抗体金标试剂和T-SPOT.TB试剂盒的串联联合检测中,敏感度为24.04%（138/574）,但特异度达到89.91%（597/664）;并联联合检测中,特异度为21.23%（141/664）,但敏感度达到89.55%（514/574）。结核病组和对照组在ASSURE TB、TB-DOT和T-SPOT.TB 3种检测方法中,均为阳性和均为阴性两种谱型的构成比分别为24.04%（138/574）、10.09%（67/664）和10.45%（60/574）、21.23%（141/664）,差异均有统计学意义（χ2值分别为43.37和26.32,P值均＜0.05）。结论 两种结核抗体与T-SPOT.TB行串联联合检测能够提高检测特异度,并联联合检测能够提高检测敏感度;串联联合检测时,3种检测方法结果均为阳性和均为阴性两种谱型在临床上对结核病血清学诊断具有辅助诊断价值。

耐异烟肼结核分枝杆菌临床分离株耐药基因突变及其分子流行病学调查研究

目的阐明结核分枝杆菌耐异烟肼临床分离株katG基因突变特点以及Spoligotyping分型和结核病流行关系。方法对123株结核分枝杆菌临床分离株,其中有药敏结果的98株,(耐异烟肼菌株45株;异烟肼敏感株53株)的katG基因进行DNA片断扩增然后进行SSCP分析;同时对其中的121株菌株进行Spoligotyping分型。结果45株耐INH结核杆菌株中,27株(60%)第315位点突变,低耐药菌株(1mg/L)第315位点突变率显著高于高耐药菌株(10mg/L;53株敏感株中无KatG基因315位密码子突变。对121株临床株的SpoligotypingDNA指纹分析,1型,(北京型)103株占84%(103/121),其它基因型18株,分散在13种基因型中。结论本项研究进一步证实了结核分枝杆菌耐异烟肼与katG基因突变之间的关系;北京型感染是北京地区结核病流行的重要原因。

hsp65基因序列PCR-RFLP法鉴定130株临床分枝杆菌研究

目的探讨hsp65基因序列PCR-RFLP法用于临床分枝杆菌鉴定的诊断价值。方法用hsp65基因序列PCR-RFLP法鉴定经过传统方法鉴定过的130株临床分枝杆菌。结果130株临床分枝杆菌中,鉴定出结核分枝杆菌105株,戈登分枝杆菌4株、瘰痢分枝杆菌3株、耻垢分枝杆菌1株。用PCR-RFLP法,偶然分枝杆菌复合群和鸟胞分枝杆菌复合群进一步鉴定,偶然分枝杆菌2株、脓肿分枝杆菌2株、龟分枝杆菌4株、鸟分枝杆菌5株、胞分枝杆菌4株。结论hsp65基因序列PCR-RFLP法比传统方法有更高的准确性、敏感性、特异性和重复性,具有很好的临床应用价值。

16SrRNA基因序列在分枝杆菌分类鉴定的研究进展

16SrRNA基因序列高度保守 ,其核苷酸位点的变化具有种的特异性 ,用分子生物学技术分析 16SrRNA基因 ,能够将分枝杆菌鉴定到种的水平。本文就用 16SrRNA基因进行PCR扩增、DNA直接测序、限制性酶切片段长度多态性 (RFLP)分析。

ADXL210加速度传感器在稳定平台中的应用

通过采用加速度传感器 ADXL210来模拟位置环路中的图像传感器及80C196KC 单片机,构成了一个纯数字式的双闭环陀螺平台稳定系统,用于稳定摄像头,从而实现平台的稳定以及对目标的跟踪。文中根据各环节的基本特性,设计了控制器,并通过以80C193KC 单片机为核心的最小系统进行了实验,结果表明,控制方案可行,达到了预期的目的。

某型炮射反坦克导弹弹带改进技术研究

文中通过研究采用非金属材料弹带替代炮射导弹金属弹带材料。根据弹丸初始启动压力推导公式和材料性能及该导弹的特征值,对弹带进行了设计和计算。最终提出的弹带设计方案,可以为该型炮射导弹弹带优化设计提供理论依据。

携带TGEV DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及安全性与免疫性分析

【目的】探讨以减毒沙门氏菌为载体,进行TGEV DNA疫苗口服免疫可行性。【方法】通过RT-PCR扩增TGEV四川株(SC-H)S基因5’端约2.1 kb的主要抗原位点片段,将其插入真核表达载体pVAX1,构建重组质粒pVAX-S,体外转染COS-7细胞,间接免疫荧光检测S基因表达。通过电转化将pVAX-S转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建SL7207(pVAX-S)重组菌,并在体外感染小鼠腹腔巨噬细胞,以RT-PCR、间接免疫荧光检测细胞内S基因的转录与表达情况。将SL7207(pVAX-S)重组菌以5×108、1×109、2×109CFU剂量口服接种BALB/c小鼠,分析其安全性,并以1×109CFU剂量的重组菌3次免疫BALB/c小鼠,通过间接ELISA检测免疫小鼠的血清IgG与肠道粘膜IgA抗体。【结果】成功构建重组质粒pVAX-S,且重组质粒能在COS7细胞中表达。重组菌SL7207(pVAX-S)感染巨噬细胞后检测到目的基因的转录、表达。小鼠口服接种不同剂量重组菌,具有良好的安全性。免疫小鼠于二免后两周可检测到针对TGEV S蛋白的特异性血清IgG与肠道粘膜IgA抗体,且三免后两周与SL7207(pVAX1)空载体免疫组间分别存在显著性差异(P<0.05)和极显著性差异(P<0.01)。【结论】携带TGEV DNA疫苗的减毒沙门氏菌小鼠试验显示了良好的免疫原性与安全性。

基于图像处理的自动对焦技术综述

简述了传统和现代自动对焦技术方法并进行对比,在此基础上详细介绍了基于图像处理的自动对焦技术的原理和核心问题,提出了该技术中的关键技术是图像清晰度评价方法和搜索算法并对具体技术进行了描述。

同位素示踪剂井间监测技术在狮子沟油田N1油藏的应用

将同位素示踪剂井间监测技术应用于青海油田狮子沟油田N1油藏,以评价井间连通性,解释高渗通道参数,为油田挖潜增效提供依据。该技术采用定性分析和定量计算的方法并结合油藏的静、动态资料,对注水井与采油井间连通性和高渗通道的参数进行综合分析,提出合适的解释结论。应用结果表明,同位素示踪剂井间监测技术在分析低渗透油藏中井间连通性、识别高渗通道、解释高渗通道参数方面非常有效。

无细胞短棒状杆菌纳米级制剂抗结核作用及机理研究

目的：研究无细胞短棒状杆菌纳米级制剂(NCPP)体内抗结核作用及机理。方法：NCPP各剂量组与乌体林斯组豚鼠皮下攻击结核杆菌H37RV后，第3，10，17d肌肉注射给药，于5，7，9周分3批处死动物，取脾查活菌分离数，并做病理镜检。另取小鼠腹腔注射NCPP 10d后测定腹腔巨噬细胞(Mφ)吞噬率、吞噬指数、过氧化氢(H2O2)和一氧化氮(NO)水平及脾T细胞增殖指数。结果：NCPP各剂量组豚鼠脾活菌数于5，7，9周时明显低于对照模型组(P<0．05)，与对照药乌体林斯组相近。亦可减轻结核特异性病理改变。此外，NCPP各剂量组小鼠腹腔Mφ上述各项指标均显著提高(P<0．01)，但脾脏T细胞增殖指数无明显变化。结论：NCPP对结核杆菌感染的豚鼠模型具有明显的免疫治疗作用，其机理主要是通过激活Mφ，且使其产生过氧化氢、一氧化氮水平明显提高．达到杀灭结核杆菌的目的。

分枝杆菌特殊DNA序列检测及其在分类鉴定中的应用进展

分子生物学技术已应用于分枝杆菌菌种快速鉴定。目前分子鉴定靶序列主要有四种 :即hsp6 5基因、dnaj基因、16SrRNA基因、16S 2 3SrDNA间隔区序列。其他一些序列如IS6 110、mce基因内 45 3bp重复序列、SenX3 RegX3IR、mtp40、DT1/DT6 ,属于种特异性或群特异性DNA序列。

干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断中的价值

目的探讨干扰素体外释放酶联免疫法(TB-IGRA)在诊断诊断结核分枝杆菌潜伏感染的价值。方法分枝杆菌相关γ-干扰素检测试剂盒(WT-IGRA)检测140例健康者IFN-γ分泌水平,并对其进行结核菌素皮试及采用Cellestis Limited生产的QuantiFERON-TB试剂盒进行IFN-γ平行检测。结果 140例健康者中,WT试剂和QFT试剂阳性率分别是25.7%(36/140)、21.4%(30/140),PPD3+～4+为14.3%(20/140)。两试剂阳性符合率为81.3%,阴性符合率为88.9%,总符合率86.7%。28例密接者中,PPD3+～4+为39.3%(11/28),WT试剂和QFT试剂阳性率分别是46.4%(13/28)和67.8%(19/28)。结论 TB-IGRA在诊断结核分枝杆菌潜伏感染的价值优于PPD皮试,可以用于潜伏感染者的筛查。

微信支付的现状分析和安全协议建模

微信支付作为新生态移动支付，发展时间短但成长迅速，其中潜在的安全问题不可忽视。由微信支付的流程入手，并从信息安全、法律、业务方面对微信支付的安全性进行了分析，然后在此基础上构建出微信支付模型，包括微信支付协议模型和身份验证模型，最后得出结论。参考了当前已知的几种移动支付模型和协议，构建的符合微信支付流程的微信支付协议模型和微信支付的银行卡绑定协议则采用了零知识证明和博弈论分析，以及使用了椭圆曲线加密算法、MD5算法和RSA公钥加密算法。不足的是由于微信支付协议并没有公开，我们对其安全性分析与协议建模都是基于现行的微信支付流程和现有的支村模型。

应用反向线性杂交技术快速检测结核分枝杆菌利福平耐药性研究

探讨反向线性杂交技术(reverse line blot assay,RLB)在结核分枝杆菌利福平(RFP)耐药性快速检测中的应用价值。采用RLB将包含rpoB基因核心区的扩增产物与标记特异性探针的膜进行杂交,共对121株结核分枝杆菌进行RFP耐药性检测,并将结果与常规药敏实验进行比较。结果发现,121株中有71株对RFP耐药,56株为多重耐药株;采用RLB共检测到65株RFP耐药株rpoB基因核心区存在突变,其灵敏度为91.5%(65/71);50株RFP敏感株中均未检测到突变,则特异性为100%(51/51);56株多耐药菌株中,92.9%(52/56)存在rpoB基因核心区突变。因此,用RLB检测结核分枝杆菌RFP耐药株具有快速,高效,特异性和灵敏度高的优点,且可用于多耐药菌株的筛选,具有推广和潜在的临床应用价值。

基于3D max与AE的现代制造工程实训装置三维动画技术研究

三维动画是一种基于模拟真实或想象世界,进行视觉再现的高端图形、图像技术,形象直观、表现力丰富。本文以一套现代制造工程实训装置为例,详细阐述了基于3D max与AE,开发设计该实训装置三维演示动画的过程及其关键技术,为工程演示动画的设计制作提供了一些可借鉴的思路。

基于数据库的混合编程接口技术在地质绘图中的应用

在地质绘图过程中,利用混合编程接口技术进行数据库管理和处理及图像绘制等工作,能够在很大程度上简化了数据处理流程,提高工作效率,更大的节约软件购买成本和缩短开发周期。以delphi和Surfer两大软件在数据库基础上开发为例,阐述了混合编程接口技术的实现和效果评价,为数字化油田快速出图具有一定意义。

基于语义的位置服务隐私保护综述

位置服务发展引起的隐私泄露问题已不容忽视。基于语义的位置隐私保护是位置隐私保护工作中的重要组成部分。首先总结了近年来基于语义的位置隐私保护研究工作,包括隐私保护设计中的关键因素、语义保护可行性、相关概念等;随后讨论了基于语义的位置隐私保护机制、语义相似度测量方法、隐私保护度量方法等;最后展望了基于语义的位置隐私保护未来的研究方向。