基于网络药理学和细胞实验探讨橙皮素对LPS诱导的小胶质细胞炎症模型的改善作用

目的通过网络药理学和细胞实验研究橙皮素对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞炎症模型的改善作用。方法筛选橙皮素治疗神经炎症的关键成分,构建PPI网络,筛选核心节点网络,并进行GO及KEGG富集分析。细胞实验分为空白对照组、LPS(100 ng/mL)+ATP(5μmol/L)组、橙皮素组(20、40μmol/L),MTT法检测细胞存活率,Griess法检测NO水平,免疫荧光法检测ROS以及小胶质细胞标记物IBA1表达,RT-qPCR法检测TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达,Western Blot法检测RAGE蛋白表达。结果PPI网络分析得到88个核心靶点。KEGG富集分析显示,橙皮素主要通过对细菌起源分子的反应、脂多糖反应调节、炎症反应调节等改善经炎症。细胞实验显示,橙皮素能抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症反应,降低细胞上清液NO水平、细胞ROS水平、IBA1表达以及TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达、RAGE蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论橙皮素具有改善小胶质细胞极化、抗神经炎症作用,其机制与下调AGE/RAGE介导的炎症信号通路有关。

医疗决策中患者自主决定权的困境、冲突与破解

在当前的医疗决策中,患者自主决定权行使依旧存在障碍,梳理其历史源流,造成这一现状的原因主要包括来自家庭主义文化、医事父权主义的影响,行为能力制度和监护制度对其的束缚。在此背景下,对“能够享有决定权的关键是具有理性”的观点予以批判,并呼吁患者自治理念的回归,达成与他人代理决策权、医生特殊干预权的协调,建议通过以医疗决定能力来代替行为能力、要求根据实际评估医疗决定能力、建立预先医疗指示体系、明确医疗特殊干预权边界等措施来建构化解冲突的法律体系。

高度耐盐双价转基因烟草的研究

随着全球性人口的增长和土地退化的加剧,开发利用广阔盐碱地和干旱土地的需要日益迫切。植物生物技术的日臻完善,为培育高效耐盐植物迎来了一丝曙光。在高渗条件下,耐盐的微生物或植物细胞通过增加胞内一些相溶性溶质的浓度来维持渗透压的平衡。这些可溶性溶质包括无机离子、糖类、多元醇、氨基酸和生物碱等。通过基因工程手段,使细胞内积累脯氨酸、甜菜碱、甘露醇、海藻糖,能够不同程度地提高转基因烟草的耐盐性。多元醇含有多个羟基,亲水性能强。

大肠杆菌mtID基因和gutD基因的克隆、全序列测定和高效表达

使用指示性培养基,筛选含有正常甘露醇操纵子和山梨醇操纵子的大肠杆菌菌株。从细菌染色体DNA中,通过多聚酶链式反应(PCR)扩增出1-磷酸甘露醇脱氢酶基因(mtlD)和6-磷酸山梨醇脱氢酶基因(gutD)。将它们分别克隆至载体pBluescript SK或KS以后,完成了这两个基因DNA的全序列分析。序列测定结果表明:所克隆的mtlD基因除编码区第96位密码子由GCA变成了GCT之外,其它序列与所报道的修正序列一致;所克隆的gutD基因除3＇端非编码区缺失一个碱基C之外,基因全序列与文献报道一致。完成此两个基因的大肠杆菌高效表达载体的构建之后,表达的1-磷酸甘露醇脱氢酶和6-磷酸山梨醇脱氨酶分别占菌体可溶性蛋白的24.79％和29.38％。

转基因烟草的甘露醇合成和耐盐性

土壤的盐碱性是世界许多地区限制植物生长和作物产量的主要制约因素。长期的研究发现:在高盐或干旱环境下,大多数植物在细胞质中开始积累一些低分子量的代谢物,如脯氨酸、甜菜碱、糖醇等。这些物质通过维持高的细胞质渗透压,有利于植物在高盐或干旱条件下的水分吸收。通过基因工程手段,影响或改变植物体内的生理代谢途径,使得植物细胞产生和积累不同的低分子量有机化合物。

大豆花叶病毒外壳蛋白基因的克隆和其在大肠杆菌中的表达

通过多聚酶连锁反应(PCR),我们合成了包括病毒外壳蛋白基因在内的病毒基因组3′端区域,并完成了其全部序列分析,比较SMV(北京分离物)和SMV-N株的序列发现:外壳蛋白基因的核苷酸序列同源性达93.4%,其氨基酸序列同源性高达98.5%,就基因组3′端非编码序列而言,其同源性达88.8%。Western blot分析结果表明所克隆的cDNA片段在大肠杆菌JM107中能表达正常的病毒外壳蛋白。

番木瓜环斑病毒分离物(SM)外壳蛋白基因克隆及序列分析

番木瓜环斑病毒(Papaya Ringspot Virus简称PRV)是马铃薯Y病毒组(Potyvirus group)的成员之一。PRV严重危害我国的番木瓜生产,流行年间甚至达到毁灭性程度。60年代以来,我国番木瓜因受PRV危害。

番木瓜环斑病毒复制酶(亚基)基因的克隆、序列分析及其植物表达载体的构建

近二年报道,在TMV、PVX、PEBV和CMV等病毒中,利用病毒编码的复制酶(亚基)基因或相关cDNA片段转化烟草,工程植株获得绝对或极高的病毒抗性。大量研究认为:马铃薯Y病毒组的核内含体大分子量蛋白(NIb)是依赖于RNA的RNA复制酶(或核心亚基),NIb与上述病毒的复制酶有广泛的同源保守区。

番木瓜环斑病毒华南强株系cDNA文库的构建及其基因组3'端区域结构的研究

以λ-ZAPⅡ噬菌体为载体,构建了番木瓜环斑病毒华南强株系(PRV-SM)基因组cDNA文库。以PCR扩增的外壳蛋白(CP)基因为探针筛选出阳性克隆。酶谱和序列分析确定,其中两个阳性克隆除重叠部分外为长达2676个核苷酸的基因组3′端区域。其中包括棱内含体蛋白b(NIb)基因的1607个棱苷酸,CP基因的858个核苷酸和基因组3′端非编码区的211个核苷酸(不包括polyA尾巴)。PRV-SM的NIb含有依赖于RNA的RNA聚合酶的8个特征性保守序列,可能是参与基因组RNA复制的核心亚基。与其他株系比较,NIb的氨基酸变化主要集中在其C端和N端。PRV-SM 3′端非编码区有一段28个核苷酸的正向重复序列,能在其内形成茎环二级结构,并且在各株系间具有高度保守性。NIb,CP和3′端非编码区的总的序列比较表明,SM株系与国外报道的其他株系亲缘关系相对较远。

大豆花叶病毒3’-端基因组的克隆和序列分析

大豆花叶病毒(Soybean Mosaic Virus)是马铃薯Y病毒组的重要成员之一。SMV基因组是单一正链RNA,长约10kb,病毒外壳蛋白基因位于基因组的3′端。SMV在我国大豆主要产区普遍流行,严重影响大豆生产,常年导致10—

番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因的克隆和在大肠杆菌中的表达

以番木瓜环斑病毒(PRV-SM株)基因组RNA的cDNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)合成和改造了病毒外壳蛋白基因。将该基因克隆于pBluescript KS以后,完成了其全序列分析。与PRV-P和W株系比较,其核苷酸序列同源性分别为89.4％和88.7％;由核苷酸序列所推导出的氨基酸序列同源性均为94.4％。SM株与P、W株间的同源性低于P株与W株间的同源性。Western-blot分析表明,所克隆的病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中能获得正常表达产物,它具有与天然外壳蛋白同样的大小及相同的血清学反应。

1-磷酸甘露醇脱氢酶基因转化水稻的研究

PCR和 Southern blotting检测表明 ,来自大肠杆菌的 mtl D基因已通过农杆菌介导整合进水稻基因组。mtl D基因在 T1代出现分离 ,T2 代出现纯系。在 0 .75% Na Cl胁迫下 ,7个转基因 T3 代株系都能检测到 mtl D酶活性 ,与对照相比细胞膜的相对电导率和大分子渗漏值明显降低。部分转基因株系能在 1 .0 % Na Cl浓度下正常生长 ,而对照在 0 .5% Na Cl浓度下已不能存活。通过有性杂交途径实现了 mtl D和 gut D两个基因的聚合 ,部分杂交后代株系能在 1 .2 5% Na Cl胁迫下正常生长结实。

新型含氮硼酸酯极压抗磨剂的合成及性能

合成了一种亚胺型含氮硼酸酯极压抗磨剂,并用IR、UV和1H NMR对产物进行了表征,用测水和正交分析的方法确定了最佳的工艺条件,用四磨球机对产物进行了性能测试.该工艺的原料廉价易得,产物易于分离,溶剂能回收循环使用,反应步骤短,操作简单,有利于大规模工业化生产,且副产物是水,提高了环境友好性.结果表明:在邻氨基苯酚、苯甲醛、硼酸和十八醇摩尔比为1.2∶1.0∶1.2∶2.0,温度为110℃,两步各反应2 h的最佳条件下,反应酯化率可达91.07%;经四球长磨实验表明,当含氮硼酸酯在液体石蜡中的添加量为质量分数3%时,抗磨性能提高22.62%.

电动汽车引射热泵空调系统性能实验研究

针对已提出的电动汽车引射热泵空调(EHPAC)系统进行改进,将车内、外侧换热器设计成前后排分离的形式,并加设引射器,形成梯级蒸发并回收膨胀功,从而提高系统的性能。实验研究了夏季及冬季工况下车内、外温度对EHPAC系统制冷及制热性能的影响,验证了引射器的使用可大幅提高汽车热泵系统的制热性能。将EHPAC系统与传统热泵系统(THPAC)进行对比,结果表明:对不同的车内、外温度工况,EHPAC系统的制冷及制热性能均优于THPAC系统,制冷量提高约21.5%~35.7%、制冷COP提高约13.1%~21.7%、制热量提高约4.4%~14.5%、制热COP提高约11.3%~18.3%。同时表明车内温度的改变对EHPAC系统性能的影响比车外温度的影响更大。

WA型、BT型和D型水稻雄性不育系细胞质基因组翻译产物分析和研究

通过对ＷＡ型、ＢＴ型和Ｄ型水稻雄性不育系细胞质基因组即线粒体基因组和叶绿体基因组翻译产物的分析，初步寻找出与雄性不育和育性恢复有关的调控基因产物。根据实验结果，讨论了水稻细胞质雄性不育及育性恢复机制，并提出了两种育性恢复假说。

肌动蛋白基因在豌豆幼苗的发育阶段和器官特异性表达

从豌豆幼苗及开花植株各器官提取总RNA，以豌豆肌动蛋白基因（PEAC1）为探针，鉴定肌动蛋白基因在不同器官的表达。Northern和Dotblot结果表明，肌动蛋白基因在豌豆中的表达具有发育阶段特异性，它倾向于在豌豆5天苗的芽和2天苗的报中特异表达。

马铃薯Y病毒复制酶基因的克隆和序列分析

马铃薯Ｙ病毒复制酶基因的克隆和序列分析彭学贤，项瑜，刘俊君，莽克强（中国科学院微生物研究所，北京１００００８０）ＭｏｌｅｃｕｌａｒｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆＰＶＹＮＩｂｇｅｎｅ￥ＰｅｎＸｕｅｘｉａｎ；ＸｉａｎｇＹｕ；Ｌｉ...

基于大数据分析的英语线上线下混合式教学效果评价

研究基于大数据分析的英语线上线下混合式教学效果评价方法,为提升线上线下混合式英语教学效果提供有力支撑。应用自适应布谷鸟搜索的并行K-means聚类算法聚类混合式英语教学相关数据,根据聚类得到教学数据设计混合式英语教学评价指标体系,构建基于改进BP神经网络的教学效果评价模型,完成混合式英语教学效果评价,依据该评价结果开展针对性措施增强混合式英语教学效果,提升学生英语成绩。

在丝瓜和黄瓜发育过程中肌动蛋白基因的表达

对肌动蛋白基因在丝瓜（Ｌｕｆｆａ ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａ Ｌ．）和黄瓜（Ｃｕｃｕｍ ｉｓ ｓａｔｉｖｕｍ Ｌ．）各器官的表达进行了研究．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ和Ｄｏｔｂｌｏｔ结果表明，肌动蛋白基因在丝瓜和黄瓜中表现出器官特异性表达． 首先，肌动蛋白基因在丝瓜幼苗发育过程中表现明显的发育阶段特异性． ３０ ｄ 苗茎的ｍ ＲＮＡ 水平为８ ｄ 苗的根、子叶和１５ ｄ 苗的根、下胚轴的４～６ 倍， 同时为开花植株茎和叶片的ｍ ＲＮＡ 水平的１０～１２ 倍． 其次，肌动蛋白基因在黄瓜中表现器官特异性表达，它们倾向于在黄瓜幼嫩果实中（开花后１５

一种基于过敏性反应机制的抗植物病毒侵染策略

基于植物的过敏性反应机制,构建了PVY NIb基因和来自于细菌Bacillus amy-loliquefaciens的一类RNase基因-Barnase基因的融合基因的植物表达载体。在此表达载体内两基因的拼接处,保留了原来PVY蛋白酶识别PVY NIb和CP蛋白剪切位点的七肽保守序列。通过农杆菌介导获得此融合基因的转基因烟草植株。病毒侵染试验表明,转基因植物在病毒侵染后,发病症状被改变。少部分转融合基因的植株对病毒侵染表现局部抗性。