焦虑预处理加重MPTP诱导的急性PD小鼠运动行为损害

目的探讨焦虑预处理对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropridine,MPTP)诱导的急性帕金森病(Parkinson disease,PD)模型小鼠运动、情绪和认知的影响。方法将68只13周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、焦虑预处理组、急性PD模型组、焦虑预处理的急性PD模型组,每组17只,通过旷场实验,高架十字迷宫实验,爬杆试验和水迷宫实验以及黑质-纹状体酪氨酸羟化酶阳性(tyrosine hydroxylase positive,TH+)神经元的变化,探究焦虑预处理对PD小鼠运动、情绪、认知及多巴胺神经元的影响。结果焦虑预处理后第2天高架十字迷宫实验显示,焦虑预处理组开臂进入次数占总进臂次数百分比(percentage entries of open arm entries,OE%)和开臂滞留时间占总进臂时间百分比(percentage time spent on open arms,OT%)少于对照组,急性PD模型组OE%和OT%少于焦虑预处理的急性PD模型组(P<0.05)。焦虑预处理后第6天高架十字迷宫实验显示,4组的OE%和OT%比较差异均无统计学意义(P>0.05)。焦虑预处理后第5天行旷场实验,4组在中心路程百分比、时间百分比、穿格次数百分比比较差异均无统计学意义(P>0.05)。焦虑预处理后第7天爬杆实验显示,与对照组、焦虑预处理组和急性PD模型组比较,焦虑预处理的急性PD模型组爬杆时间增加(P<0.05)。焦虑预处理后第8~13天水迷宫实验显示,与对照组和焦虑预处理组比较,焦虑预处理的急性PD模型组的小鼠的寻台潜伏期较长,目标平台象限的滞留时间短,运动路程较长,穿越平台次数较长(P<0.05)。急性PD模型组和焦虑预处理的急性PD模型组黑质TH+神经元数少于对照组和焦虑预处理组,差异有统计学意义(P<0.05)。焦虑预处理的急性PD模型组黑质TH+神经元数与急性PD模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。急性PD模型组的纹状体TH+神经元的平均光密度值(mean optical density,MOD)值低于对照组,焦虑预处理的急性PD模型组低于焦虑预处理组(P<0.05)。结论焦虑预处理可能在一定程度上损害MPTP诱导的急性PD模型的纹状体多巴胺能神经元,并可加重小鼠运动功能损害。

对轻度认知障碍和痴呆患者睡眠障碍管理的推荐

意大利痴呆研究协会的睡眠研究小组对2013年12月以前发表的原始论文、荟萃分析和系统性综述的证据进行了回顾分析。该研究按照证据等级（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）和推荐强度（A、B、C、D、E）进行分类,试图解决认知障碍和痴呆患者睡眠障碍的管理。

对轻度认知障碍和痴呆患者睡眠障碍评估的推荐

对轻度认知障碍（MCI）及痴呆患者的睡眠障碍进行临床评估和管理,具有重要的临床和社会意义。睡眠不好导致痴呆患者的发病率和死亡率增加,并成为加重照料者负担的原因之一。睡眠障碍在MCI和痴呆患者中具有较高的患病率,它们常以共病形式存在。因此,临床上应常规对认知功能下降的患者,仔细进行睡眠障碍的临床评估及管理。意大利痴呆研究协会的睡眠研究小组将2013年12月前发表的原始论文、荟萃分析和系统性综述,进行了回顾。这些证据按照等级（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）和推荐强度（A、B、C、D、E）进行分类。

人脐带血间充质干细胞和神经干细胞移植对帕金森模型大鼠神经营养作用的比较

目的:比较人脐带血间充质干细胞(hUCB-MSCs)和中脑神经干细胞(NSCs)移植治疗帕金森病大鼠的神经营养作用。方法:6-羟基多巴胺所致偏侧帕金森病SD大鼠模型随机分为3组,分别为中脑NSCs组、hUCB-MSCs组、生理盐水组。造模成功后3周,将磷酸缓冲液(PBS)和溴尿嘧啶(BrdU)标记的NSCs及hUCB-MSCs立体定向注入模型鼠右侧纹状体,检测大鼠旋转行为。在移植后8周对3组大鼠进行Morris水迷宫实验,并对大鼠脑纹状体区进行免疫组织化学显色检测纹状体移植区脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的变化。结果:移植4、8周后,NSCs组、hUCB-MSCs组大鼠的旋转次数比生理盐水组均减少。移植8周后,水迷宫实验显示NSCs组和hUCB-MSCs组第1~5天平均潜伏期均短于生理盐水组,NSCs组、hUCB-MSCs组穿越平台次数均高于生理盐水组。但在大鼠旋转次数和水迷宫实验中,NSCs组和hUCB-MSCs组之间均无统计学差异。移植治疗8周后,纹状体移植区NSCs组、hUCB-MSCs组的BDNF和GDNF表达较生理盐水组显著增多;hUCB-MSCs组的BDNF和GDNF表达较NSCs组增多更明显。结论:NSCs、BMSCs的移植明显增加帕金森病大鼠纹状体移植区BDNF、GDNF的表达水平,并改善大鼠运动及认知功能;hUCB-MSCs移植在纹状体移植区BDNF、GDNF表达水平多于NSCs移植组,hUCB-MSCs神经营养效应可能更强,更适合应用于临床治疗。

hUCMSCs通过抑制星形胶质细胞活化引起的炎症因子表达改善Aβ损伤大鼠学习记忆能力

目的观察侧脑室注射人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)对阿尔茨海默病样大鼠学习记忆能力的影响,并进一步探讨胶质细胞活化及炎症因子在hUCMSCs改善阿尔茨海默病样大鼠学习记忆能力中的作用。方法实验共分5组,分别为对照组、假手术组、溶剂对照组、Aβ损伤组、hUCMSCs保护组。双侧海马CA1区定位注射Aβ制备AD样学习记忆障碍大鼠模型;通过Morris水迷宫行为学测试检测大鼠学习记忆能力;采用酶联免疫吸附测定法分析海马组织中炎症因子表达情况;采用Western blot检测海马脑区星形胶质细胞及小胶质细胞标志物表达。结果与Aβ损伤组相比,hUCMSCs保护组大鼠逃避潜伏期显著降低(P<0.05),平台区穿越次数及平台所在象限停留时间百分比显著提高(P<0.05)。与Aβ损伤组相比,hUCMSCs保护组大鼠海马组织内炎症因子TNF-α及IL-1β蛋白表达量显著降低(P<0.05),星形胶质细胞标志物GFAP表达显著降低(P<0.05)。结论 hUCMSCs移植可改善Aβ损伤大鼠的空间学习记忆能力,其神经保护作用与抑制星形胶质细胞活化、进而减少炎症因子表达有关。

艾司西酞普兰对MPTP处理的PC12细胞的保护作用及机制

目的 :探讨艾司西酞普兰(ESC)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)处理的PC12细胞的保护作用及其机制。方法 :用不同浓度ESC或/和不同浓度MPTP处理PC12细胞,再用3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制;通过MTS检测细胞存活率,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡,免疫印迹检测自噬标记物LC3B-Ⅱ、LC3B-Ⅰ和凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果 :经筛选得出,10μmol/L ESC预处理PC12细胞1 h,再加入1 000μmol/L MPTP处理24 h,细胞存活率显著提高;Hoechst 33258染色显示细胞核固缩明显减少;ESC+MPTP组LC3B-Ⅱ/Ⅰ、Bcl-2/Bax表达水平较MPTP组显著上升,但ESC+MPTP+3MA组LC3B-Ⅱ/Ⅰ、Bcl-2/Bax表达水平均显著下降。结论 :ESC对MPTP处理的PC12细胞有一定的神经保护作用,可能通过PI3K/Akt途径激发自噬作用,提高了Bcl-2的表达,抑制MPTP引发的细胞凋亡,从而发挥对其保护作用。

人脐带间充质干细胞的生物学特性及向神经样细胞分化的研究

目的探究人脐带间充质干细胞具有的生物学特性,并对其向神经样细胞的分化进行研究。方法检测人脐带间充质干细胞细胞表面的标记;以β巯基乙醇与丹参诱导其向神经细胞分化,并为分化细胞与未分化细胞进行免疫细胞化学鉴定。此外,半定量RT-PCR检测细胞神经相关基因表达。结果分离自人脐带的贴壁细胞在体外可以生长成类似成纤维细胞的形态,在未分化状态下可以维持稳定增殖形态,且体外增殖远超10代,这类细胞表面标记CD105、CD59、CD44、CD29有较高的表达,而造血细胞的表面标记CD117、CD45、CD34、CD33、CD28、CD14则无表达或低表达,而与其相同表达的还有移植免疫排斥相关的表面标记,如CD86、CD80、CD40。经诱导分化的细胞表达神经元标记β-Ⅲ类神经微管和神经微丝、神经干细胞标记巢蛋白、神经胶质细胞标记的胶质纤维酸性蛋白。经过RT-PCR检测可知,经丹参诱导后的间充质干细胞表达神经干细胞的相关基因Neatin,而诱导前后间充质干细胞全部表达神经细胞基因Pleiotrophin并且在诱导后表达增强。结论人脐带间充质干细胞具有易于培养扩增的生物学特性,其表达间充质干细胞的表面标记,低或不表达造血细胞、与移植排斥有关的细胞标记。同时,其可以分化为神经样细胞并表达神经细胞的基因与相关标记,这种细胞可以作为肝细胞的一个来源,用于中枢神经系统细胞的移植。

艾司西酞普兰对MPTP诱导的急性帕金森病模型小鼠运动和认知功能的作用

目的探讨草酸艾司西酞普兰(escitalopram,ESC)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropridine,MPTP)诱导的急性帕金森病(Parkinson disease,PD)模型小鼠运动和认知功能的影响。方法将45只11周龄的23~30 g健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(n=15,对照组)、急性PD模型组(n=15,PD组)、ESC预处理组(n=15,ESC组)三组,行爬杆实验和Morris水迷宫实验以检测小鼠行为和认知功能变化,利用免疫组化染色计数小鼠海马区乙酰胆碱转移酶阳性(choline acetyltransferase,ChAT+)细胞数、黑质酪氨酸羟化酶阳性(tyrosine hydroxylase,TH+)细胞数及纹状体TH+细胞平均光密度(mean optical density,MOD),Western blot方法检测小鼠海马脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的水平变化。结果与PD组相比,ESC组及对照组小鼠的寻台潜伏期缩短,而小鼠穿过平台次数及穿越平台路程比率增加,爬杆时间缩短,游泳速度增快(P<0.05),海马区ChAT+细胞数量及BDNF水平明显增加(P<0.05),黑质TH+细胞数和纹状体TH+细胞MOD有显著提高(P<0.05),而ESC组与对照组比较差异均无统计学意义。结论ESC可以改善急性PD模型小鼠的学习记忆能力和运动功能;ESC预处理对PD模型小鼠的保护作用可能与ESC能够保护海马胆碱能神经元和黑质多巴胺神经元以及提高海马区BDNF水平有关。

神经变性疾病相关睡眠障碍的机制及药物治疗进展

神经变性疾病患者常出现各种睡眠障碍，包括失眠、快速眼动睡眠期行为障碍（ RBD）、阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（ OSAS）、日间过度嗜睡、睡眠-觉醒节律障碍（ CRSD）、周期性腿动、不宁腿综合征、睡眠呼吸障碍等［1-2］。研究显示，在帕金森病、路易体痴呆、多系统萎缩等神经变性疾病中，α-突触核蛋白在神经元和神经胶质细胞异常聚集［3］，而阿尔茨海默病、额颞叶痴呆、皮克病、进行性核上麻痹等多种神经变性疾病神经细胞胞体及树突中均有异常tau蛋白聚积［4］。睡眠呼吸暂停和阿尔茨海默病间有可能关联［5］，睡眠质量好可以减弱ApoE4基因对神经元纤维缠结的病理进展，从而影响阿尔茨海默病患者的认知功能［6］。神经变性疾病患者睡眠障碍的治疗也相对复杂。现就神经变性疾病睡眠障碍的机制及药物治疗综述如下。

Holmes－Adie综合征及相关疾病

Holmes － Adie 综合征（Holmes － Adie Syndrome ，HAS）是一种罕见综合征，其病因、发病机制、诊断等不清，尚无有效的治疗方法。本病与多种疾病相关，而临床医师对此了解甚少，临床诊治过程中易被忽视，而耽误诊治。现对本病进行综述，介绍目前报道的相关疾病，旨在使临床医师对本病及相关疾病有大致了解，为患者诊治提供参考。

焦虑对帕金森病患者运动功能和认知功能的影响

目的探讨焦虑对帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）患者运动功能和认知功能的影响。方法 60例PD患者,采用汉密尔顿焦虑量表14项版本（Hamilton Anxiety Scale-14,HAMA14）评测患者焦虑情绪、简易智能精神状态检查量表（Mini-Mental State Examination,MMSE）和蒙特利尔认知评估量表（Montreal Cognitive Assessment,MoCA）评定患者认知功能、统一帕金森病评定量表第三部分（Unified Parkinson＇s Disease Rating Scale PartⅢ,UPDRSⅢ）和Hoehn-Yahr分期评测患者运动功能和病情严重程度。分析焦虑对PD患者运动功能和认知功能的影响。结果 60例患者中,27例（45%）存在焦虑,焦虑与非焦虑组之间的UPDRSⅢ、MMSE和MoCA评分差异有统计学意义（P〈0.05）;60例患者中,17例（28.33%）为轻度运动功能障碍,43例（71.67%）为中重度运动功能障碍,二组间病程、HAMA14、Hoehn-Yahr分期之间存在差异（P〈0.05）,并且焦虑（OR=4.280,OR95%CI=1.081~16.937,P=0.038）和病程（OR=6.717,OR95CI=1.743~25.895,P=0.006）是运动功能障碍加重的危险因素。60例患者中,18例（30%）为认知功能正常,26例（43.33%）为轻度认知功能障碍（mild cognitive impairment,MCI）,16例（26.67%）为痴呆,三组之间年龄、UPDRSⅢ、HAMA14差异有统计学意义（P〈0.05）,并且年龄（OR=4.290,OR95%CI=1.133~16.235,P=0.032）和焦虑（OR=4.274,OR95%CI=1.041~17.555,P=0.044）为认知功能障碍发生的危险因素。结论焦虑对PD患者的运动及认知功能有影响,并且是运动功能障碍加重和认知功能障碍发生的危险因素。