2022-2023年山东省A(H1N1)pdm09流感病毒HA、NA基因变异特征分析

目的 了解山东省2022-2023流感监测年度分离的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因的变异特征,为流感的防控提供科学依据。方法 从流感监测网络实验室分离的流感毒株中按地市随机选取14株A(H1N1)pdm09亚型流感毒株,以WHO推荐的当季疫苗株为参考进行全基因组测序,并采用荧光法开展神经氨酸酶抑制(neuraminidase inhibition,NI)实验以评估药物敏感性。结果 山东省2022-2023年度分离的A(H1N1)pdm09流感病毒属于6B.1A分支中的5a.2a进化簇,核苷酸序列比对分析显示,HA和NA基因与2021-2023年度北半球疫苗株A/Victoria/2570/2019的亲缘关系较为接近,同源性分别为98.5%~98.7%和98.8%~99.1%。氨基酸序列分析显示,HA蛋白有20个位点发生了氨基酸序列变异,并发现1株病毒可能发生抗原漂移,有3株病毒发生了HA蛋白糖基化位点的缺失。NA酶相关重要位点未发生变异。NI实验显示,所测流感毒株均对抗流感病毒药物敏感。结论 所监测毒株与疫苗株整体同源性很高,但氨基酸存在一定程度变异,今后有必要持续开展流感病毒基因变异特征监测以了解流感流行的风险,以及评价基因变异对流感疫苗和治疗药物效果的影响。

山东省2017—2018年B型流感病毒药物敏感性检测及神经氨酸酶基因特征分析

目的检测山东省2017-2018流感监测年度B型流感病毒对神经氨酸酶抑制剂的药物敏感性,分析其神经氨酸酶(NA)基因特征。方法选取山东省2017—2018年分离的18株B型流感病毒(Yamagata系16株,Victoria系2株),通过生物学耐药实验检测病毒对奥司他韦和扎那米韦的药物敏感性。提取病毒核酸后一步法RT-PCR扩增NA基因片段,双向测定核苷酸序列,对基因序列和氨基酸序列特征比对分析。结果在检测的18株B型流感病毒中,有1株Yamagata系病毒对奥司他韦和扎那米韦2种药物的敏感性均降低,此株病毒的NA基因发生H274Y位点突变。其余15株Yamagata系病毒和2株Victoria系病毒均为奥司他韦及扎那米韦的敏感株。结论随机选取的18株B型流感病毒中大多数病毒对神经氨酸酶抑制剂敏感,临床上可继续使用此类药物对流感患者进行治疗。应加强耐药性监测,警惕耐药株的出现。

2005-2006年度山东省流行性感冒监测结果分析

目的通过分析山东省2005-2006年度流行性感冒(流感)监测结果,显示流感的流行趋势,为控制山东省流感流行提供参考。方法总结、分析流感监测点流感样病例、病毒分离及血清学监测情况。结果2005-2006年度山东省4所监测医院报告的流感样病人就诊百分比10～12月呈递增趋势,1～3月呈递减趋势,但未出现明显的流行高峰。2月底至3月底共发生流感样病例爆发15起。本年度共分离到67株流感病毒,流行优势株为甲1亚型流感病毒。正常人群血清对A/PANA- MA/2007/99(H_3N_2)毒株、B/HONGKONG/330/01-LIKE毒株的抗体阳性率均为100%);对A/NEW CALEDONIA/20/99(H_1N_1)毒株抗体阳性率最低(65%)。结论流感样病例数与病原学监测结果基本吻合,可以用来反映流感活动的强弱,监测网络的敏感性还有待于进一步提高。

不同分子生物学方法检测手足口病标本的应用研究

目的比较逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)和巢式PCR两种方法检测临床手足口标本敏感性的差异,同时对普通凝胶电泳和Agilent 2100 Bioanalyzer分析PCR产物结果进行比较。方法分别在人类肠道病毒(EV)VP1-VP3区设计人类肠道病毒71和肠道病毒柯萨奇A16(CAV16)引物,建立RT-PCR和巢式PCR方法,对手足口患者肠道病毒进行基因检测。结果RT-PCR方法检出EV71阳性80例(36.5%),CAV16特异性检测49例(22.3%);巢式PCR方法检出EV71阳性155例(70.8%),CAV16特异性检测64例(29.2%),普通凝胶电泳和Agilent 2100 Bioanalyzer分析PCR产物结果无统计学意义。结论手足口病原体以EV71和CAV16为主,巢式PCR检测灵敏度更高,普通凝胶电泳和Agilent 2100 Bioanalyzer分析PCR产物结果无统计学意义。

2019-2020年山东省H3N2流感病毒抗原性及血凝素基因特征分析

目的了解2019-2020年流感监测年度山东省分离的H3N2亚型流感病毒抗原性及血凝素(hemagglutinin,HA)基因遗传进化规律与氨基酸变异情况。方法用免疫雪貂后的抗血清进行红细胞凝集抑制试验,对2019年4月至2020年3月山东省分离的40株H3N2亚型流感毒株进行抗原性分析,并对其中19株待检病毒的HA基因进行序列测定及分析。结果抗原性分析结果显示检测的H3N2亚型流感病毒中仅仅35%(14/40)与疫苗株A/Kansas/14/2017抗原性类似。系统进化树显示,19株H3N2亚型流感病毒分离株血凝素基因在进化树上全部属于3C.2a分支,与处于3C.3a分支的疫苗株A/Kansas/14/2017亲缘关系较远;与疫苗株相比,所有待检毒株A抗原决定簇有3个位点,B抗原决定簇有2个位点发生改变;受体结合位点均发生T135K位和S137F位变异;19株分离株全部发生133位糖基化位点缺失。结论抗原性分析及HA基因序列分析结果显示,WHO推荐的2019—2020年疫苗株保护效果有可能不理想。应继续密切关注H3N2亚型流感病毒的流行与基因变异情况,为流感病毒疫苗株推荐及防控提供科学依据。

瑞氏木霉外源基因表达系统中受体菌株的改造

将解除了葡萄糖阻遏的纤维素酶高产菌株瑞氏木霉TrichodermareeseiRutC30经EMS诱变后,在酪蛋白平板上筛选出部分蛋白酶缺陷突变菌株T.reeseiRutC30M3。RutC30M3的胞外蛋白酶活力比亲本株降低约74%,但生长特性、产纤维素酶活力等性状与亲本株相同。用携带潮霉素磷酸转移酶基因(hph)的表达质粒pAN7-1分别转化瑞氏木霉RutC30和RutC30M3原生质体,转化结果显示RutC30M3(pAN7-1)对潮霉素的抗性比RutC30(pAN7-1)提高约20%,而Northernblot分析结果显示在两菌株中潮霉素基因转录水平相似,由此证明宿主菌蛋白酶缺陷对保护重组蛋白免于降解有明显作用。蛋白酶缺陷菌株RutC30M3适于作为瑞氏木霉外源基因表达系统中的受体菌株用于大量生产同源与异源蛋白。

3M含氟玻璃离子和光敏树脂修复后牙的疗效观察

目的:对3M含氟玻璃离子和光敏树脂联合修复后牙凹坑式严重磨耗的疗效进行观察评价。方法:患者126例,患牙268颗,近髓处的牙本质涂3M含氟玻璃离子,酸蚀后冲洗涂粘合剂,放置树脂,固化修整。结果:全部患牙术后立即消失敏感症状,随访至术后12个月修复牙形态、密合度、牙髓活力疗效满意度97.8%～100%,继发龋0.7%。结论:3M含氟玻璃离子和光敏树脂联合修复后牙凹坑式严重磨耗疗效满意持久。

CF_4预处理后热生长薄栅氧漏电流及势垒研究

嵌入式FlashMemory要求低的工作电压.采用反应离子刻蚀技术,用CF4气体在低功率下对硅片做预处理,再热生长薄氧化层,从而在氧化层中引入F,降低氧化层势垒:势垒高度从3.05eV降低到2.5eV,隧穿电流增加,从而可以在低压下提高FlashMemory的编程效率.

碧兰麻对老年脏器功能损害者拔牙麻醉的安全性观察

目的:观察碧兰麻在老年脏器功能损害患者中麻醉的安全性。方法:分析连续治疗的28例老年患者中麻醉剂应用的安全性。结果:麻醉效果达完全25例,良好3例。6例术前心率、血压小幅度上升,其余书前后均无显著变化。肝肾功能损害者拔牙前后转氨酶、胆红素、尿素氮、血肌酐及凝血功能无显著变化。心电图监测随访至术后2周未见显著变化。未观察到过敏反应。结论:碧兰麻可安全用于经密切监测和调整的脏器功能损害老年患者。

电视问政节目之浅谈

作为一种新兴的舆论监督形式,电视问政吸引了越来越多的关注。在表现形式上,主要包含6个环节——主持人+电视短片+职能部门+市民提问+专家点评+观众不记名表决。因为涉及到传统媒体、政府和民众之间的三方互动,所以从狭义上来说,指的就是政府相关职能部门在电视镜头前接受市民的质询与评议。可以说,既是政府传播、沟通、说服公民的重要渠道,也是公民反映心声、参与公共管理的主要途径,在促进民主政治发展方面具有独特作用。

硬粒小麦白粉病成株抗性QTL的遗传分析

小麦白粉病是世界范围内广泛流行的小麦叶部真菌病害,显著影响小麦的产量和品质。由于现有品种的白粉病抗性不断丧失,使得进一步挖掘新的白粉病抗源及抗病基因十分重要。本研究以硬粒小麦品种UC1113和Kofa构建的包含93个株系的F_(8)代RIL群体为材料,利用235个多态性标记构建遗传图谱,并结合白粉病成株抗性表型数据,对4个环境下的白粉病成株抗性进行QTL定位。结果表明,在RIL群体中共定位到4个与白粉病成株抗性相关的QTL,分别位于1AL、4AL(2)和5AL染色体上。其中,来自UC1113的3个QTL(QPm.hnau-1AL、QPm.hnau-4AL.1和QPm.hnau-4AL.2)为新的白粉病成株抗性QTL。本研究为小麦白粉病抗性基因挖掘和抗病育种提供了重要信息。

一株GⅡ.12[P16]型诺如病毒毒株的全基因组序列分析

目的对一株诺如病毒分离株SD20200267进行鉴定和全基因组序列分析,了解其结构特征。方法取患者标本进行病毒核酸的提取,对样本核酸进行扩增,将扩增产物进行测序,根据核苷酸序列进行基因分型。采用宏基因组测序技术进行全基因组测序,对测序所得的核苷酸序列进行分析。结果获得SD20200267株病毒基因组全长,总长度为7465个核苷酸。SD20200267株在VP1区及RdRp区分别属于GⅡ.12和GⅡ.P16基因型。SD20200267株与其他GⅡ.12[P16]型毒株核苷酸一致性在96.0%~97.3%之间,有15个氨基酸位点变异。该毒株存在重组现象,重组位点位于ORF1与ORF2重叠区域。结论SD20200267株为GⅡ.12[P16]型毒株,ORF1与ORF2重叠区域存在重组现象。

对于集成电路布图设计的一些基础概念的探讨

本文就集成电路布图设计的一些基础概念进行探讨,并在此基础上就集成电路布图设计的法理基础提出意见。作者尝试结合集成电路的制备过程和集成电路布图登记的实务对“集成电路”和“布图设计”的定义进行分析和解读,并由此认为,集成电路布图设计保护的对象实质是抽象的图案,其由掩模版、掩模或半导体基片之上或之中的层实体承载。基于此,进一步探讨了布图设计的保护的法理基础。

创造性分析“三步法”之我见——从本领域普通技术人员的视角

关于创造性(非显而易见性)的判断,《专利审查指南》(2010版)中规定了"三步法"。然而,一个没有创造能力的本领域普通技术人员会如何创造一个发明创造呢?本文试图从本领域普通技术人员的角度,来尝试探寻"三步法"背后的一点思辨。

对法5条“违反法律的发明创造”审理的探讨

《专利法》第5条是否能够充分赋予专利审查员根据所涉的任意法律进行审查的权力?这是一个问题。作者对《专利法》第5条进行了探讨性的解读,并从两个层面来理解发明创造"违反法律"。

电容器外壳用铝带材

铝材是电解电容器外壳主要用材，随着电子行业的发展，主要的电子元件电解电容器的需求量也在不断增大。目前，国内外电容器外壳主要是用1060合金的铝带材制作，其工艺方案依次为铸轧、冷轧、成品退火，温度为250℃～350℃，但这种牌号的铝材制造的电容器外壳用铝带材在冲制后表面发乌、加工成型过程中制耳率一般在3．5％以上，不能保证冲壳工艺的要求。

从“一种全保护无人机”无效案看专利复审委员会对优先权的核实

专利申请能否享有优先权可能会对其新颖性和创造性判断有很大的影响。在实质审查过程中,在对比文件是PX、PY、PE类文件的情况下,实审审查员会对涉案专利的优先权进行核实。本文结合"一种全保护无人机"无效宣告请求案件审理过程中对优先权核实的情况,讨论了专利复审委员会对专利优先权核实的基本做法,并讨论了在证据提交有瑕疵的情况下,优先权核实的可能处理方式。