甘蓝型油菜光叶性状的遗传分析及基因定位

【目的】表皮蜡质是覆盖植物叶片和茎秆等部位的疏水层,在植物抵御逆境方面发挥着重要作用,同时会影响光合作用和生长发育;甘蓝型油菜作为世界上主要的油料作物之一,研究表皮蜡质突变体的遗传机制,为实现油菜高产稳产提供参考。【方法】对油菜光叶突变体M8和普通蜡质叶中双11(ZS11)和C20的叶片表征进行记载,使用便携式植物光合作用测量系统测定叶片光合速率;利用M8和ZS11、C20分别杂交获得2个F1、自交构建2个F2分离群体,用于分析油菜光叶性状的遗传规律;选取M8和ZS11杂交的F2群体中光叶和蜡质叶表型单株分别进行混池,通过集团分离分析法结合靶向测序技术进行基因克隆,结合比较基因组和转录组数据进行候选基因预测,并通过RT-PCR验证候选基因。【结果】甘蓝型油菜光叶表型叶片气孔导度更大、光合效率更高;遗传分析表明M8光叶性状受1对基因控制,光叶相对蜡质叶为隐性。图位克隆将光叶控制基因定位至A08染色体0.134—0.699 Mb物理区间内。进一步分析发现,相比于ZS11,光叶突变体M8中A08染色体0.22—0.58 Mb区间存在大片段缺失,ZS11在该区段中的Bna A08G0006900ZS(Bna A08.SAGL1)可能为光叶的候选基因,该基因编码一个Kelch-F-box蛋白,在ZS11叶片中表达量高而M8中未检测到,该基因缺失可能导致了M8光叶表型。【结论】甘蓝型油菜光叶新突变体M8相比野生型蜡质叶片光合速率更高,该光叶表型受1对隐性基因控制;图位克隆鉴定到光叶性状调控基因为Bna A08.SAGL1,基因缺失产生了光叶表型。

云南地方稻种的遗传变异和籼粳分化

用７ 个单拷贝探针对８７ 份云南稻地方品种进行了ＲＦＬＰ分析．结果表明∶云南稻（Ｏｒｙｚａｓａｔｉｖａ Ｌ．）地方品种中，籼稻（ｉｎｄｉｃａ）和粳稻（ｊａｐｏｎｉｃａ）都表现出较高水平的变异，粳稻的等位基因数目和遗传多样性水平都高于籼稻，表明粳稻的遗传变异比籼稻丰富． 云南稻地方品种中的籼稻和粳稻间表现出明显的遗传分化，且不同染色体区段分化程度不同．

甘蓝型油菜油酸、亚油酸和亚麻酸含量的关联分析

关联分析是一种分辨率较高的高效QTL定位方法。为初步揭示甘蓝型油菜油酸、亚油酸和亚麻酸的遗传基础,挖掘可能控制该性状的候选基因位点,选取192份甘蓝型油菜品种和自交系构建自然群体,利用1 109个SSR和AFLP标记对菜籽中油酸、亚油酸、亚麻酸进行了初步全基因组关联分析。在最优的Q＋K模型下,2009-2011年3年共检测到93个显著关联的标记位点,对表型解释的效应值在3.04%-38.34%之间,其中有49个标记在2年或3年中被同时检测到（P〈0.001）。共检测到15个标记与多个性状共关联,其中有9个与油酸和亚油酸共关联。同时也检测到一些对油酸具有正向贡献的优异等位基因。这些优异等位基因的聚合将有助于改良甘蓝型油菜的脂肪酸成分。

春性与半冬性甘蓝型油菜的SSR标记多样性分析比较

通过42个单位点SSR标记分析59个甘蓝型油菜品种,比较春性和半冬性甘蓝型油菜品种间的遗传差异。结果表明,不同位点上存在2～6个等位基因,平均每位点检测到4.29个等位基因。不同位点的遗传多样性指数在0.40～0.70之间,所有供试位点平均遗传多样性指数为0.50,表明甘蓝型油菜品种资源中存在丰富的遗传变异。春性和半冬性油菜品种间的等位基因总数相差不大,主要等位基因的类型和频率存在明显的差异,而且春性和半冬性品种中分别存在相当数量的特异稀有等位基因。春性和半冬性油菜品种在27个位点上的遗传分化水平很小,仅在2个位点上存在明显的遗传分化,这些分化主要是由品种的春化特性差异造成。聚类分析表明春性和半冬性品种之间存在广泛的亲缘关系。

用同源序列的染色体定位寻找水稻抗病基因DNA片段

根据已知植物抗病基因的序列以及蛋白激酶序列中的高保守区域设计合成了特异性和简并引物，用聚合酶链反应从水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）ＤＮＡ中扩增同源片段，获约１００个大小不同的克隆。以这些克隆作探针进行限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析，已将２６个克隆定位在两个水稻分子标记连锁图１２条染色体的３４个位点上。其中１０个克隆与８个已定位的水稻抗病基因在分子标记连锁图上的位置对应或毗邻。用其中部分与抗稻瘟病基因在染色体位置相对应的克隆作探针，分析抗稻瘟病近等基因系，ＲＦＬＰ带型在抗性基因系和感病亲本间表现出多态性，表明这些克隆与抗病基因在染色体位置上有较好的对应关系。

萝卜芥蓝异源四倍体与埃塞俄比亚芥属间杂交

萝卜芥蓝异源四倍体(Raphanobrassica,RRCC,2n=36)与埃塞俄比亚芥(Brassica carinata,BBCC,2n=34)正反交,结果表明:萝卜芥蓝异源四倍体×埃塞俄比亚芥可交配率为7.3%,反交为64.6%。正反交F1植株均呈双亲中间形态,体细胞染色体数目为35,花粉母细胞减数分裂染色体主要配构型为10Ⅱ+15Ⅰ。62个F2植株和22个与埃塞俄比亚芥的回交植株的形态为中间类型、偏萝卜芥蓝异源四倍体或偏萝卜。AFLP检测到F2和BC1植株均含有大量双亲特异片段,聚类分析表明,这些植株独立于亲本种聚成一组。

AtRabD2b共抑制植株死亡茎段的显微和超微结构观察

采用树脂包埋技术,以AtRabD2b共抑制植株死亡发生茎段为实验材料,制备半薄切片和超薄切片,观察突变体茎段死亡的细胞学特征。结果表明:(1)共抑制植株茎细胞的死亡首先在表皮细胞层中发现,然后向切片圆周两侧以及内侧细胞蔓延。(2)共抑制植株茎细胞出现染色质边缘化、叶绿体内囊体片层膜数目减少、细胞器成分被液泡吞噬等异常现象。这些细胞学特征暗示共抑制植株茎段发生了细胞程序性死亡,由此推断AtRabD基因对拟南芥茎顶端细胞的生长有重要的维持作用。

水稻基因组中的节段重复(英文)

利用 13个多拷贝探针 ,研究水稻 (OryzasativaL .)基因组第 8、9、11和 12染色体上的节段重复。由同一探针检测到的多拷贝位点通常位于不同染色体的相同部位。不同探针检测到的多拷贝位点在不同染色体上的位置顺序相同。第 8和第 9染色体上的相同多拷贝位点的线性排列 ,提示这两条染色体在进化上可能来源于同一原始染色体。而第 9染色体上的一个节段与前人报道的以及本研究进一步证实的第 11和第 12染色体短臂末端的重复区段相同 ,提示第 8、9、11和 12染色体可能在进化上存在同源性。这 4条染色体上表现出的不同程度的节段重复 ,为作者曾提出的水稻基因组形成和进化模式的推测提供了进一步的依据 ,即原始染色体的复制和基因的演变可能是水稻基因组形成和进化的重要机制。

中国白菜小孢子离体培养和双单倍体植株再生

采用略加修改的NLN培养基(无机大量元素1/2)和甘蓝型油菜小孢子的胚状体诱导程序,培养了5个中国菜用小白菜品种和1个中国大白菜品种的小孢子,进行了双单倍体的诱导。结果表明,不同品种的小孢子产胚量差异很大,在接种的6个基因型中,有5个诱导出胚,诱导率83.33%。其中的中萁青抗热605产胚量最高,是8.68个胚/10蕾,最低的是鸡冠菜,其产胚率是0.42个胚/10蕾。这些胚在添加了NAA和PP333(多效唑)的B5培养基发育成健壮的小植株,已移栽到田间。关于6个基因型的小孢子胚胎发生能力,还有待进一步研究。

萝卜花叶性状的遗传分析及基因定位

为筛选控制萝卜花叶性状的候选基因,以萝卜花叶品种J4和板叶品种WA构建F_(2)分离群体,在F_(2)群体中,选择20个花叶和20个板叶单株,分别构成花叶和板叶DNA混合池,分析花叶性状的遗传规律。结果显示:萝卜花叶性状受1对基因控制,且花叶对板叶呈不完全显性;结合集团分离分析(bulked segregant analysis,BSA)与简化基因组测序基因型分析技术(genotyping by sequencing,GBS),将花叶基因定位在R7染色体0.07~7.97 Mb区间内;通过萝卜全基因组与甘蓝型油菜全基因组的共线性分析发现,萝卜候选区间内0.87~1.32 Mb与油菜A10染色体的16.35~16.80 Mb存在很好的共线性;对共线性区段进行基因功能注释确认Rs390250(899863~901651 bp)为萝卜花叶的候选基因;该基因编码1个HD-ZipⅠ(the class Ⅰ homeodomain leucine-zipper)转录因子,其位于第二外显子的非同义突变位点T425C会导致LZ(leucinezipper)结构域内保守氨基酸的改变,可能是导致叶形变异的关键位点。

微卫星DNA和AFLP标记在水稻分子标记连锁图上的分布

以一个栽培稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．ｓｐ．ｉｎｄｉｃａ）和野生稻（Ｏ．ｒｕｆｉｐｏｇｏｎＧｒｉｆ）杂交的Ｆ２作图群体以及由该群体构建的ＲＦＬＰ标记连锁图，分析了微卫星ＤＮＡ和ＡＦＬＰ标记的多态性、遗传行为及其在染色体上的分布。共定位了２８个微卫星ＤＮＡ标记和１７２个ＡＦＬＰ标记。２８个微卫星ＤＮＡ标记中有６个为华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室根据数据库中序列而设计，其余２２个来自美国Ｃｏｒｎｅｌ大学已发表的结果。１７２个ＡＦＬＰ标记出自２５对引物扩增得到的２２８个多态性带的片段。这些标记分布于水稻的１２条染色体。将此２００个ＰＣＲ标记与华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室构建的ＲＦＬＰ连锁图整合，得到一张含６１２个分子标记位点的遗传连锁图。

反奈奎斯特特性设计综合方法

本文提出一种系统频率特性新的设计综合方法。它的优点是:(1)求闭环系统频率特性比用尼柯尔斯图简捷、直观。(2)可直接根据期望提高的指标要求设计反馈环节 H。并以负反馈改善系统高频段指标为例,讨论 H 环节的具体设计综合方法。

晶体管LC自激振荡器——振荡条件的负阻分析方法

本文用准直线性理论,从负阻观点出发提出了一种,对晶体管 LC 自激振荡器振荡条件的分析具有普遍意义的简捷的分析方法。并把常用的三种 LC 振荡器的振荡条件表示式统一为一个公式,便于理论分析和工程计算。

籼,粳稻的品种及广亲和品种双列杂交杂种不育性分析

亚洲栽培稻品种间杂种育性研究是一项非常有意义的工作，本研究分析了２１个亲本双列杂交产生的２１０个组合的杂种育性，所选亲范围广，包括当地品种原始栽培品种，现代优良栽培品种及杂我水稻的亲本，这些材料依据籼，粳分类标准（包括典型的籼，粳型，偏籼，偏粳型，中间类型和广亲和品种）进行了精心的选择，结果表明，不同组合杂种育性不同，从完全不育完全可育，变化较大，总的来说，亚种内杂种育性。

犊牛代乳应用试验效果观察

选择日龄为20d的小犊牛45头,随机分为对照组、试验组A、试验组B,试验组A为15头,试验组B为16头,对照组为14头。采用犊牛代乳粉和犊牛代乳料,与鲜奶做对比试验,连续饲喂70d,结果试验组B日均增重1.057±0.144kg/头,比对照组0.961±0.345kg/头增加0.096kg,提高9.99%,差异显著(P<0.05),试验组A日均增重0.980±0.3849kg/头比对照组0.961±0.345kg/头增加0.019kg,提高1.98%,差异不显著(P>0.05)

犊牛代乳应用试验效果观察

选择20日龄的小犊牛45头,随机分为对照组、试验组A、试验组B,试验组A为15头,试验组B为16头,对照组为14头。采用犊牛代乳粉和犊牛代乳料,与鲜奶做对比试验,连续饲喂70天,结果试验组B日均增重1.057±0.144kg/头,比对照组0.961±0.345kg/头增加0.096kg,提高9.99％,差异显著(P<0.05),试验组A日均增重0.980±0.3849kg/头比对照组0.961±0.345kg/头增加0.019kg,提高1.98％,差异不显著(P>0.05)。

澳洲荷斯坦奶牛在乌鲁木齐的生产表现和饲养体会

新疆金牛生物股份有限公司是以生物技术为先导，以胚胎工程产业化为龙头、以草食畜牧业和乳品加工业为支柱的股份制畜牧高科技企业，其发展方向是：1)将公司建成全国最大的良种奶牛繁育基地和胚胎生产基地；2)建成新疆最大和全国前五名乳品加工企业；3)建成畜牧高科技技术研究、推广、应用企业。公司经过近年来的快速发展。

低磷胁迫对甘蓝型油菜自然群体产量及品质的影响

甘蓝型油菜作为重要的油料作物,对缺磷敏感。为了分析低磷胁迫对甘蓝型油菜自然品种产量及品质的影响,通过大田实验调查了187份甘蓝型油菜自然品种在正常磷和低磷胁迫条件下种子中9个品质性状及单株产量的变化。结果表明:(1)两处理条件下自然群体各性状变异范围差异较大,其中20碳烯酸、油酸和单株产量的变异系数较大。缺磷对群体产量的影响较大,而对品质性状的影响相对较小;(2)低磷胁迫不影响群体各品质性状间的相关性,但会显著降低含油量、蛋白质及水分含量与单株产量间的相关性;(3)低磷胁迫对品质性状的影响在品种间表现出不同的趋势。总体而言,含油量、水分、油酸和亚麻酸等受低磷胁迫影响的趋势不明显,75%以上品种的亚油酸和棕榈酸含量下降,60%以上品种的20碳烯酸和硬脂酸含量上升;(4)以磷正常和低磷条件下的含油量和单株产量为指标,挑选出6个耐低磷胁迫的优异种质。上述结果为深入开展低磷胁迫条件下油菜品质性状的基因型差异及遗传调控机制提供了基础。

水稻苯达松和磺酰脲类除草剂抗性基因Bel的表达载体构建与拟南芥转化

用RT-PCR从水稻品种日本晴的cDNA中扩增出苯达松和磺酰脲类除草剂抗性基因Bel,得到基因ORF全长1542 bp。将Bel片段克隆到pGEM-T Easy载体。将此基因插入pCAMBIA3301的Ca MV35 S启动子后取代原载体中的GUS基因构成表达载体pCAMB IA3301-Bel,通过电击转化法导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)GV3101,并转化拟南芥(Columbia生态型)获得转基因植株。对转化植株进行的基因组PCR和RT-PCR分析,结果表明Bel基因已成功地整合到拟南芥的基因组中并可以表达。研究结果为利用水稻苯达松和磺酰脲类除草剂抗性基因Bel开展油菜、棉花等双子叶作物的抗除草剂育种提供了实验依据。