RNA干扰GMF-β基因对脑梗死小鼠海马组织神经元凋亡及炎症水平的影响

目的探讨RNA干扰GMF-β基因对脑梗死小鼠海马组织神经元凋亡及炎症水平的影响.方法选择SPF级小鼠40只,将小鼠随机分为假手术组、模型组、control-shRNA组、GMF-βshRNA组,每组10只.建模后进行小鼠神经功能缺损评分;qRT-PCR检测小鼠脑组织GMF-β基因的mRNA表达水平;TTC染色法测定小鼠脑梗死体积;TUNEL法测定小鼠脑组织神经元凋亡;ELISA法检测小鼠脑组织及血清中TNF-c、IL-6表达水平.结果与假手术组相比,模型组和control-shRNA组小鼠神经损伤明显,神经行为学评分显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组和control-shRNA组相比,GMF-βshRNA组小鼠神经损伤明显改善,神经行为学评分显著降低(P<0.05).与假手术组相比,模型组小鼠脑梗死体积、脑组织神经元凋亡细胞数、脑组织及血清中TNF-α、IL-6表达水平均显著升高(均P<0.05);抑制GMF-β的表达后,小鼠神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织神经元凋亡细胞数、脑组织及血清中TNF-α、IL-6表达水平均显著减少(P<0.05),神经损伤明显改善.结论抑制GMF-β的表达可通过降低脑梗死小鼠脑海马组织梗死体积、神经元凋亡水平及机体炎症水平,从而改善脑梗死小鼠脑组织损伤.

circ_0004771靶向miR-924调控胶质瘤U251细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的:探讨circ_0004771对胶质瘤U251细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:选取33例胶质瘤组织标本以及正常脑组织,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circ_0004771和miR-924的表达水平;将胶质瘤细胞株U251随机分为小干扰RNA阴性序列(si-NC)组(转染si-NC)、circ_0004771小干扰RNA(si-circ_0004771)组(转染si-circ_0004771)、模拟对照序列(miR-NC)组(转染miR-NC)、miR-924模拟物(miR-924)组(转染miR-924)、si-circ_0004771+抑制剂阴性序列(anti-miR-NC)组(共转染si-circ_0004771和anti-miR-NC)、si-circ_0004771+miR-924抑制剂(anti-miR-924)组(共转染si-circ_0004771和anti-miR-924);细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;划痕实验检测细胞划痕愈合率;Transwell小室实验检测细胞侵袭数;蛋白质印迹法检测E-cadherin和N-cadherin蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circ_0004771与miR-924的靶向关系。结果:与正常脑组织比较,胶质瘤组织中circ_0004771表达水平升高,miR-924表达水平降低(P<0.05)。与si-NC组(或miR-NC组)比较,si-circ_0004771组(或miR-924组)胶质瘤U251细胞活性、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及细胞中N-cadherin蛋白表达均降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。circ_0004771靶向调控miR-924的表达。与si-circ_0004771和anti-miR-NC组比较,si-circ_0004771+anti-miR-924组胶质瘤U251细胞活性、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及细胞中N-cadherin蛋白表达均升高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。结论:下调circ_0004771表达可能通靶向上调miR-924抑制胶质瘤U251细胞的增殖、迁移和侵袭。