HILIC-MS/MS法鉴别肝素和硫酸乙酰肝素

目的建立亲水相互作用色谱-三重四极杆质谱法(HILIC-MS/MS)同时测定肝素及硫酸乙酰肝素经肝素酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ酶切后产生的双糖含量,为肝素及硫酸乙酰肝素的鉴别提供方法和数据参考。方法采用PC HILIC色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以10 mmol/L乙酸铵-水溶液(A)、10 mmol/L乙酸铵-90%乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速0.9 mL/min,柱温40℃,进样量10μL,采用电喷雾电离源、负离子多反应检测模式对肝素及硫酸乙酰肝素酶切后产生的8种双糖进行定量,比较二者的差异。结果所测成分在测定摩尔浓度范围内线性关系良好(r2>0.9960),平均加样回收率为90.34%~99.62%,RSD为4.7%~6.7%,样品测定结果显示肝素与硫酸乙酰肝素双糖组成及比例差异明显。肝素中占比最大的双糖为ΔUA2S-GlcNS6S(TriS),约69.8%;硫酸乙酰肝素中占比最大的双糖为ΔUA-GlcNAc(0S),约51.0%。结论该法灵敏度高、稳定性好,简单快捷、准确可靠,可作为肝素与硫酸乙酰肝素的鉴别方法之一。

HPLC-MS/MS同时测定芪龙胶囊中6个有效成分的含量

目的:建立高效液相色谱-串联杆质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定芪龙胶囊中丹参酚酸B、芍药苷、丹参酮ⅡA、黄芪甲苷、苦杏仁苷、毛蕊异黄酮苷6个有效成分的含量。方法:采用CAPCELL PAK C18色谱柱(2.0 mm×150 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,柱温30℃,进样量10μL;质谱采用电喷雾电离源(ESI^+),多反应监测模式(MRM),离子源电压5 kV,离子源温度450℃,气帘气103.4 kPa,雾化气344.7 kPa,辅助气379.2 kPa。结果:所测6个有效成分在测定质量浓度范围内线性关系良好(r>0.9929);平均加样回收率为91.2%~104.8%,RSD为1.3%~5.1%。13批芪龙胶囊中丹参酚酸B、芍药苷、丹参酮ⅡA、黄芪甲苷、苦杏仁苷、毛蕊异黄酮苷的含量范围分别为0.164~0.323、0.561~0.952、0.009~0.030、0.113~0.397、0.014~0.284、0.041~0.138 mg·粒^-1。结论:该方法适用于芪龙胶囊成药中丹参酚酸B、芍药苷、丹参酮ⅡA、黄芪甲苷、苦杏仁苷、毛蕊异黄酮苷6个有效成分含量的同时测定,可用于芪龙胶囊的质量控制。

生物样本中糖胺聚糖定量方法及应用进展

糖胺聚糖(GAGs)是一类结构复杂、分子量不均一的内源性生物大分子多糖,具有抗凝血、抗肿瘤、抗病毒、调节免疫等多种生物活性,也是多种病理诊断的重要生物标志物,应用前景日益广阔。但由于结构复杂性,GAGs类药物生物样本中的含量测定仍是分析工作的难点,这在一定程度上制约了此类药物的开发应用。文章综述了近年来GAGs类药物生物样本中几种定量方法,包括光谱法、色谱法、毛细管电泳法、放射性标记法,免疫分析法,质谱法等,通过介绍各方法的原理、应用及优缺点,以期对GAGs类药物相关的临床病理诊断、药物监测及药代动力学等研究提供分析工具参考。