以学生为考官的教学法在神经查体教学中的应用

目的探讨以学生为考官的教学法在住院医师神经系统体格检查培训中的作用和价值。方法选择2021年2—10月在浙江大学医学院附属第二医院神经内科进行住院医师规范化培训的二年级和三年级住院医师96名,按1︰1比例进行随机分组,试验组采用以学生为考官的教学法,对照组采用传统教学方法。比较2组住培生出科考试神经查体的成绩及对教学方法的评价。结果试验组住培生出科成绩为(90.02±4.18)分,最低分为83.00分,最高分为96.00分;对照组平均为(85.15±5.85)分,其中最低分为68.00分,最高分为93.00分,统计结果显示试验组住培生的成绩高于对照组,差异有统计学意义(t=4.527,P<0.001);且对教学方法的评价优于对照组,尤其是在提高学习趣味性、理解查体重要性、有利于掌握操作要点和希望在其他操作中应用方面,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论以学生为考官的教学法可以提高住培生的神经系统体格检查成绩,有利于其临床实践能力的培养。

依达拉奉对慢性脑低灌注大鼠脑自由基代谢及海马CA1区HIF-1α表达的影响

目的:观察依达拉奉对慢性脑低灌注大鼠前脑组织SOD、MDA代谢变化及海马CA1区HIF-1α表达的影响,并探讨其意义。方法:实验分假手术组,模型组及依达拉奉组,后两组采用永久性大鼠双侧劲总动脉结扎术(2-vesselocclusion,2VO)制备慢性脑低灌注模型,各组在术后八周后行水迷宫试验后断头,取前脑组织制备成10%脑组织匀浆检测其SOD活性及MDA含量,并采用免疫组化技术观察海马CA1区HIF-1α表达变化。结果:模型组与假手术组相比水迷宫完成时间显著延长(P<0.05),前脑组织SOD活性降低,MDA含量增加(P<0.01),海马CA1区可见HIF-1α少量表达。依达拉奉组较模型组水迷宫结果显著改善(P<0.01),前脑组织SOD活性增加,MDA含量减少(P<0.01),且海马CA1区可见HIF-1α大量表达。结论:慢性脑低灌注可显著损害大鼠空间学习记忆能力,依达拉奉可能通过抑制黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤氧化酶活性,降低羟自由基的浓度,促进HIF-1α表达等多种途径改善血管性认知障。

难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层GRP78、caspase4的表达

目的观察难治性颞叶癫痫患者脑组织内质网应激相关分子GRP78、caspase4的表达,探讨内质网应激在难治性颞叶癫痫脑损伤中的作用。方法应用免疫组化、Western blot方法检测32例难治性颞叶癫痫患者手术切除的颞叶皮层脑组织GRP78、caspase4的表达,并与性别、年龄相匹配的对照组进行比较。结果与对照组相比,GRP78、caspase4在癫痫组表达明显上调(P<0.05)。结论癫痫诱发了内质网应激,caspase4可能参与了癫痫后脑损伤,很可能为癫痫脑损伤的治疗提供新的靶点。

神经系统不同疾病注意力障碍的特点和药物治疗

多种中枢神经系统性疾病都表现有注意力障碍或缺失,不同的神经疾病过程可能选择性破坏不同的注意力成分。本文拟对中枢神经系统不同疾病中注意力缺失的特点和近年来的治疗进展进行综述。

α-突触核蛋白的表达与氧化应激水平的相互影响

目的探讨氧化应激与在稳定转染α-突触核蛋白(-αsynuclein)的大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)中α-突触核蛋白表达的相互影响。方法测定未转染、转染空质粒、已稳定转染野生型(WT)及突变型(A53T)α-突触核蛋白的PC12细胞的活性氧(ROS)水平,并以实时定量PCR法和免疫印迹(Western blot)法检测分析经0、50、100和250 nmol/L H2O2处理的WT型和A53T型PC12细胞α-突触核蛋白表达。结果 (1)α-突触核蛋白转染PC12细胞后,细胞内ROS水平增加,按未转染的PC12细胞、转染空质粒的PC12细胞、WT型PC12细胞、A53T型PC12细胞顺序ROS水平依次增加(P<0.05)。(2)经不同浓度H2O2处理后,WT型和A53T型PC12细胞α-突触核蛋白mRNA表达水平均无明显改变,WT型及A53T型PC12细胞不同浓度组组间差异均无统计学意义(均P>0.05);在Western blot检测中,50、100和250 nmol/L H2O2组WT型PC12细胞α-突触核蛋白表达较0 nmol/L H2O2组减少,且不同浓度组组间差异均有统计学意义(P<0.05);50、100和250nmol/L H2O2组A53T型PC12细胞α-突触核蛋白表达较0 nmol/L H2O2组增加,且不同浓度组两两比较差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论α-突触核蛋白可引起PC12细胞氧化应激损伤,且不同氧化应激水平对WT型和A53T型PC12细胞中的α-突触核蛋白表达有不同程度的影响。

外伤、手术相关性吉兰-巴雷综合征的临床观察

目的观察外伤、手术相关性吉兰-巴雷综合征的临床表现、对静脉注射免疫球蛋白治疗的疗效。方法回顾性分析16例病前有外伤、手术史的吉兰-巴雷综合征病例,并与同期住院治疗的无外伤或手术的吉兰-巴雷综合征患者的临床表现、治疗效果相比较。结果外伤、手术继发吉兰-巴雷综合征发生在外伤或手术后3周内,发病前可有咽痛、腹泻史,主要表现为四肢无力,可伴有四肢麻木,严重病例有呼吸困难。主要体征为四肢肌力下降、肌腱反射减弱或消失,可有感觉异常。与同期住院治疗的吉兰-巴雷综合征患者相比,外伤、手术继发吉兰-巴雷综合征患者临床表现较重(P<0.05)。大部分病例脑脊液化验表现为脑脊液蛋白-细胞分离现象。肌电图检查有髓鞘脱失、轴索变性表现。在接受静脉注射免疫球蛋白治疗后,与无外伤或手术的吉兰-巴雷综合征患者比较,外伤、手术继发吉兰-巴雷综合征患者效果差(P<0.01)。结论静脉注射免疫球蛋白治疗外伤、手术继发的吉兰-巴雷综合征效果差。应重视外伤、手术继发吉兰-巴雷综合征,及时诊断、治疗,改善患者预后。

ETFDH基因杂合突变的脂质沉积性肌病1例

脂质沉积性肌病(lipid storage myopathy,LSM)是由于脂肪代谢过程中多种酶的功能缺陷或肉碱缺乏,影响了肌纤维内的脂肪酸代谢,导致异常增多的脂滴在肌纤维内堆积而引起一组疾病。笔者报告1例基因检测结果为ETFDH基因杂合突变的LSM,旨在提高对该病的认识与诊治水平,提高对该病分子遗传学的认识。

庞贝病多学科综合管理

庞贝病是由于编码溶酶体内酸性α-葡糖苷酶(acidα-glucosidase,GAA)的基因缺陷所致的常染色体隐性遗传病。早期诊断和治疗干预可有效改善患者预后。由于庞贝病多系统受累,临床表现多样,故需要进行多学科综合管理贯穿患者的筛查诊断及治疗管理全程。现系统性总结庞贝病多学科综合管理的最新研究进展,为临床医师提供参考。

发作性运动诱发性运动障碍研究热点及面临的挑战

发作性运动诱发性运动障碍（paroxysmal kinesigenic dyskinesia,PKD）是一种反复发作、运动诱发、持续时间短暂的神经系统运动障碍性疾病,多在儿童及青春期前发病,表现为舞蹈症、手足徐动、投掷症、肌张力障碍等不自主运动[1].PKD可分为家族性和散发性,家族性PKD呈常染色体显性遗传.自1967年加拿大学者Kertesz[2]首次报道该病以来,国内外学者一直致力于探索该病的致病基因及发病机制.

大鼠癫痫持续状态后肌醇酶1α介导的内质网应激相关凋亡分子在海马中的表达

目的探讨肌醇酶10／．（inositol requiring enzyme1d，IRE1a）介导的内质网应激相关凋亡分子在大鼠癫痫持续状态（SE）后海马神经元损伤中的作用。方法Wistar大鼠按随机数字表随机分为对照组、SE组，SE组根据不同时间点又分为3、6、12、24、48h组。免疫荧光法观察葡萄糖调节蛋白78（glucose—regulating protein 78kd，GRP78）及磷酸化-IRE1a（p-IRE1a）在各组大鼠海马CA3区中的表达；蛋白质印迹检测磷酸化c-JunN端激酶（p-JNK）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12（caspasel2）的表达变化；荧光TUNEL观察各组大鼠海马CA3区神经元凋亡变化。结果免疫荧光结果显示，对照组仅见少量GRP78、p-IRE1a阳性神经元（分别为6．90％-t-O．96％，4．60％±1．12％），SE各亚组GRP78、p-IRE1a阳性神经元均增多，SE后12h达高峰（GRP78：87．45％±3．63％，F=356．82，P〈0．05；p-IREl仅：86．90％±3．82％，F=300．80，P〈0．05）；蛋白质印迹结果显示，与对照组相比，p-JNK、caspasel2在SE各亚组表达均增多，SE后12h达高峰；同时TUNEL染色在SE各亚组均能检测到海马神经元凋亡，以SE后12h凋亡最严重，与p-IREld、p-JNK、caspasel2表达变化一致。结论大鼠SE后诱发了内质网应激，表现为内质网应激标志分子GRP78表达增加；IREl仅可能通过磷酸化JNK和活化easpasel2参与了SE后神经元凋亡损伤。

额颞痴呆的神经病理及分子遗传学研究进展

额颞痴呆ffrontotemporal dementia，FTD）或额颞叶变性（frontotemporal lobar degeneration．FTLD）是一组以进行性行为异常、人格改变、语言障碍，而早期记忆相对保留为特征的临床综合征，是仅次于阿尔茨海默病（Alzhimer’s disease，AD）的一种原发退行性痴呆．占老年前期痴呆的20％。FTLD的神经分子病理呈异质性，实际是一疾病综合征，不同亚型的病因及发病机制可能不同。近年来对FTLD的神经病理及致病基因研究方面取得了较大进展。

慢性脑低灌注的病理生理学和药物治疗

慢性脑低灌注时，脑组织发生一系列病理生理学改变，临床主要表现为进行性认知功能减退，是血管性痴呆、Alzheimer病和Binswanger病等多种疾病发展过程中的一个共同的病理学过程。目前对慢性脑低灌注的临床治疗方法和手段极其有限。因此，研究其发病机制以及预防和治疗措施显得尤为重要。

人α-突触核蛋白基因慢病毒稳定转染PC12细胞系的建立及其凋亡检测

目的构建及鉴定人野生型和突变型α-突触核蛋白（SNCA和SNCAmu）基因慢病毒表达载体，并观察在体外大鼠嗜铬细胞瘤细胞中的表达。方法在引物合成后采用PCR技术扩增目的基因，并将基因克隆到慢病毒载体表达质粒[pGC—FU，含绿色荧光蛋白（GFP）基因]中，构建SNCA基因慢病毒载体表达质粒（pGC—FU—SNCA—GFP）和SNCAmu基因慢病毒载体表达质粒（pGC—FU—SNCAmu—GFP），通过酶切、测序验证后，将pGC—FU—SNCA—GFP、pGC—FU—SNCAmu—GFP质粒和包装质粒pHelper1．0、pHelper2．0共同转染大鼠嗜铬细胞瘤细胞（PCI2细胞），获得稳定转染。结果通过检测标签蛋白GFP和目的蛋白，进一步验证pGC—FU—SNCA—GFP和pGC—FU—SNCAmu—GFP在靶细胞中的表达。通过噻唑蓝比色法检测稳定转染后细胞凋亡水平，稳定表达SNCA组（OE组）、SNCAmu组（OEm组）、不加慢病毒质粒的空白对照组（CON组）和加pGC—FU—GFP空载体对照组（NC组）共4组细胞，病毒转染后不同时间（1、2、3、4、5d）细胞增殖变缓（F=4．534、196．285、411．829、1282．049、3135．559，均P〈0．05）。碘化丙锭单染法检测细胞周期，CON组、NC组、OE组和OEm组G1期、G2期和M期细胞百分比差异有统计学意义（F=885．79、45．03、207．11，均P〈0．05），其中G1期细胞百分比（％）较高（CON组：59．10±0．35、NC组：68．24±0．60、OE组：71．73±0．11、OEm组：74．66±0．35）。结论人SNCA和SNCAmu基因转染到PC12细胞中，成功建立稳定表达的细胞系，并且对细胞凋亡水平和细胞周期有一定程度的改变。

结核性脑膜脑炎诊断与治疗

结核性脑膜炎是结核分枝杆菌引起的以脑膜为主的非化脓性炎症，病变除累及软脑膜外，蛛网膜、脑实质也常常受累，称为结核性脑膜脑炎（简称结脑），是最常见最严重的肺外结核病。多见于青少年，一年四季均有发生。近年来，由于耐药结核病例的增加，加之人口流动及AIDS流行等因素，

内质网应激及其介导的癫痫后神经元损伤

多种生理或病理条件下都会引起未折叠蛋白或错误折叠蛋白在内质网聚集，损伤内质网的正常生理功能，称为内质网应激。目前认为内质网参与了多种疾病的病理过程，包括神经系统变性病、脑缺血、糖尿病、动脉硬化、病毒性感染、癌症等。近年来临床及动物实验均表明，内质网应激也参与了癫痫后神经元损伤。