全科医学硕士专业学位研究生培养质量保障体系构建研究

全科医学教育服务于国家高层次全科医学人才培养,加强全科专硕培养质量保障体系建设势在必行,但全科专硕培养存在并轨培养模式不统一,培养质量保障体系不健全,高目标定政策、低标准抓落实等问题。基于扎根理论和德尔菲法构建了由六大要素(教学支撑、师资队伍、招生管理、过程质量、出口质量、社会支持)组成的全科专硕培养质量保障体系,并梳理了培养质量保障体系各要素间的交互关系和运行逻辑。

苦参碱对K562细胞蛋白酪氨酸激酶及磷酸酶活性的影响

背景与目的:一定浓度的苦参碱能诱导K562细胞分化,本研究拟初步探讨其诱导分化的信号转导机制。方法:运用链亲和素-生物素放大系统结合的酶联免疫法,动态检测苦参碱作用于K562细胞后,K562细胞膜相及胞浆内的蛋白酪氨酸激酶和磷酸酶活性的变化。结果:苦参碱能抑制K562细胞内的蛋白酪氨酸激酶活性,在<0.1mg/ml的浓度范围内,抑制作用具有浓度依赖性。不同浓度的苦参碱对蛋白酪氨酸磷酸酶活性的影响无显著性差异。0.1mg/ml的苦参碱作用K562细胞后,伴随蛋白酪氨酸激酶的活性变化,蛋白酪氨酸磷酸酶的活性也有一个短暂的下降。结论:在苦参碱诱导K562细胞分化的过程中,涉及到蛋白酪氨酸激酶的活性改变。膜相中蛋白酪氨酸激酶的活性改变先于胞浆内的改变,提示有一个信号的跨膜转运过程。同时伴有蛋白酪氨酸磷酸酶的活性变化,反映了胞内的蛋白酪氨酸残基磷酸化与去磷酸化的即时调节机制。苦参碱对蛋白酪氨酸激酶活性的抑制作用具有特异性与饱和性的特点,还提示有相应的受体存在。

苦参碱触发的K562细胞胞内钙信号的动态变化

目的 研究苦参碱诱导K5 6 2细胞分化的信号转导机制。方法 以Fura 2 AM为荧光探针 ,定量分析苦参碱作用后K5 6 2细胞内钙离子浓度的动态变化。结果 经苦参碱处理后 ,在胞外有钙的情况下 ,K5 6 2细胞内钙离子浓度由 12 9.0 2nmol/L升至 2 0 7.5 0nmol/L ,并维持较长时间 ;在无胞外钙的情况下 ,胞内钙离子浓度由 12 9.0 2nmol/L迅速升至 16 4 .2 2nmol/L ,并迅速恢复。两者的增高幅度均与苦参碱浓度呈正相关。结论 在苦参碱诱导K5 6 2细胞分化过程中 。

苦参碱诱导K562细胞酪氨酸激酶与磷酸酶的活性改变

目的 研究苦参碱诱导 K5 6 2细胞分化的信号转导机制。方法 运用链亲和素 -生物素放大系统结合的酶联免疫法 ,动态检测苦参碱作用于 K5 6 2细胞后 ,K5 6 2细胞膜相与胞浆内的酪氨酸激酶与磷酸酶的变化。结果 结合特异性激酶抑制剂的使用 ,首次证实了在苦参碱对 K 5 6 2细胞的诱导分化过程中 ,有广泛性的蛋白酪氨酸激酶活性的短暂下降 ,同时伴有蛋白酪氨酸磷酸酶的活性变化。结论 在苦参碱诱导 K5 6 2细胞分化的信号转导过程中 ,涉及到蛋白酪氨酸激酶的活性改变 ,膜相中蛋白酪氨酸激酶的活性改变先于胞浆内的改变 ,提示有一个信号的跨膜转运过程。同时伴有蛋白酪氨酸磷酸酶的活性变化 ,反映了胞内的蛋白酪氨酸残基磷酸化与去磷酸化的即时调节机制。

改良DDRT-PCR研究苦参碱诱导K562细胞分化相关的差异表达基因

The differentiation of human leukemia K562 cells can be induced by matrine. To investigate the mechanism of the induced cell differentiation, an improved DDRT PCR technique was applied to screen the differentially expressed genes between K562 cells and the matrine treated cells. The sequences of the fragments of the differentially expressed genes were obtained by sequencing following the T A cloned fragments identified by restriction endonuclease, and analyzed with bioinformatics. The results indicated that the multiple gene expression known already changed in the process of induced cell differentiation and an unknown gene fragment was cloned. It suggested that the differentially expressed genes acted as cell differentiation related genes involved in the early phase of the induced cell differentiation.

苦参碱诱导K562细胞磷脂酶A_2活性与表达的改变

目的 研究磷脂酶A2 在苦参碱促K 5 62细胞分化的信号转导中的作用。方法 利用磷脂酶A2 的水解作用 ,以掺入大肠杆菌膜的 [3H ]标记的油酸为酶解底物 ,检测K 5 62细胞内磷脂酶A2 的活性。以半定量的RT -PCR方法检测K5 62细胞内磷脂酶A2 的mRNA水平。结果 0 .1mg ml浓度的苦参碱作用K 5 62细胞后 ,磷脂酶A2 的活性与表达量均增高。结论 磷脂酶A2作为细胞内的重要信号分子 ,通过活性与表达量的改变参与苦参碱促K 5

小檗碱对铝过负荷致小鼠慢性脑损伤的保护作用及机制

目的观察小檗碱对铝过负荷致大鼠慢性脑损伤的保护作用及机制。方法采用AlCl3(Al3+,400mg/kg)ig大鼠,建立铝过负荷致大鼠慢性脑损伤的动物模型,并在每次铝给予4h后,小檗碱(100mg/kg)ig大鼠;观察大鼠行为学、组织病理学、生化酶学、单胺氧化酶-B(MAO-B)mRNA及蛋白表达水平变化。结果铝过负荷能明显导致大鼠被动回避性学习记忆能力和空间识别能力障碍、海马神经元损伤,使其脑组织乙酰胆碱转移酶(ChAT)活性显著降低,而胆碱脂酶(AchE)活性显著升高,超氧化物歧化酶(SOD)活性显著降低,而丙二醛(MDA)水平显著升高,MAO-B活性与MAO-BmRNA及蛋白表达水平显著增加;小檗碱能明显改善铝过负荷大鼠的学习记忆能力障碍,明显减轻铝过负荷大鼠海马神经细胞的损伤,明显阻遏铝过负荷大鼠海马组织ChAT与SOD活性的降低、AchE活性与MDA水平的增高、MAO-B活性及其mRNA与蛋白表达的增加。结论小檗碱对铝过负荷致大鼠慢性脑损伤有明显的保护作用,其作用机制除了与抗氧化应激损伤有关外,尚与增强胆碱能神经元功能与多巴胺神经功能有关。

生物医学仪器及其实用技术课程建设

通过生物医学仪器及其实用技术课程的建设与实践,探讨该课程开设的必要性、课程组织、实践效果与改进思路,为进一步提高研究生的科研能力和加强实验室的技术队伍建设与仪器设备管理提供保障。

苦参碱对K562细胞培养液中PGE_2含量的影响

目的 :研究苦参碱诱导 K5 62细胞分化的胞外信号。方法 :运用酶联免疫法 ,动态检测苦参碱作用于 K5 62细胞后 ,培养液中 PGE2 含量的变化。结果 :培养液中 PGE2 含量在苦参碱作用于K5 62细胞 2天后有增高 ,并与苦参碱浓度有关。结论 :在苦参碱诱导 K5 62细胞分化的过程中 ,PGE2 含量的增高可能涉及到 PLA2 的激活 ,并且 PGE2 可能作为胞外信号影响 K5 62细胞的增殖与分化。

酵母双杂交系统的发展与细胞信号转导研究

酵母双杂交系统是一种建立在酵母菌基础上的遗传学分析方法,主要用于检测蛋白间的相互作用及克隆与已知蛋白相关的未知新基因。在功能基因组学和蛋白质组学的研究中起积极的促进作用。在细胞信号转导研究中,通过酵母双杂交系统能较全面真实地反映细胞内信号蛋白的网络性联系与调节。

对现阶段临床生物化学双语教学模式的思考与探索

目前高校专业课的双语教学既存在可行性的问题,又存在相当多的误区,使得教学质量难以保证。笔者率先提出的"1+1"双语教学新模式,不但可以保证教学质量,又能潜移默化地达到双语教学的目标,有效地促进临床生物化学专业课的教学改革与实践,提高学生的学习兴趣和专业外语水平,亦能增强教师的教学积极性和执教能力,从而在教学的发展与改革中,不断在更高层面上达到新的教与学的和谐统一,为检验医学的人才培养探索一条新的教学模式。

未知KL基因cDNA片段的末端快速扩增

目的:为研究白血病K562细胞中未知KL基因的结构与功能,对其cDNA片段进行全长克隆。方法:采用3种RACE策略,对未知KL基因的cDNA片段进行末端的快速扩增。结果:网上LabOnWeb的instant RACE与传统的3′-RACE使未知KL基因的cDNA片段向5′末端与3′末端各自延伸了156bp与350bp。结论:通过末端快速扩增,表明白血病K562细胞中未知KL基因的全长cDNA大小约为1Kb,这为我们进行该基因的全长克隆,进而研究其结构与功能奠定了基础。

白血病部分未知基因片段与公共生物信息资源的比较与分析

目的 快速分析白血病K5 6 2细胞中未知基因的结构与功能。方法 用白血病未知基因片段的碱基序列与网上多种公共生物信息资源进行比较 ,分析未知基因的结构与功能。结果 有四个基因片段与已知的蛋白或蛋白酶的碱基序列完全相符或高度同源 ;有一个基因片段除与 17号染色体高度同源外 ,与其它数据库均无显著同源性。结论 四个基因片段为与细胞的增殖与分化相关的已知基因 ,有一个基因片段可能为新的功能性的白血病基因。

重视临床生化分析技术 合理安排组织教学内容

笔者针对临床生化分析技术在教学与实践中的重要性,以蛋白质为中心对该课程的内容进行组织与安排。通过列举蛋白质的分离纯化教学内容的安排,阐述教学内容安排要突出中心,层次分明,内容连贯统一。这有利于调动教与学两方面的积极性,有利于加深学生对教学内容的把握,最终有利于提高教学质量和人才培养的质量。

酵母双杂交系统在细胞信号转导中的应用

酵母双杂交技术是一种建立在酵母菌基础上的遗传学分析方法，主要用于检测蛋白间的相互作用及克隆与巳知蛋白相关的未知新基因。在功能基因组学和蛋白质组学的研究中起积极的促进作用。在细胞信号转导研究中，通过酵母双杂交技术能较全面地反映细胞内信号蛋白的网络性联系与调节。

苦参碱诱导K562白血病细胞分化和凋亡的实验研究

研究苦参碱的抗肿瘤作用。方法 :以人红白血病细胞株K562为研究对象,通过形态学观察和细胞化学染色了解不同浓度的苦参碱对肿瘤细胞的诱导分化作用,并利用程序性细胞死亡检测试剂盒检测肿瘤细胞凋亡的情况。结果 :0 1g/L苦参碱能够诱导K562白血病细胞分化,形态学上类似中幼红和晚幼红细胞,联苯胺染色阳性率由1 %～2 %上升至7 %,细胞化学染色显示糖原由阴性转为强阳性且阳性率为100 %;1 0g/L苦参碱作用24h,30 %的K562细胞可出现明显的空泡,并有凋亡小体出现,末端标记法也检测到凋亡的出现。结论 :0 1g/L苦参碱能够诱导肿瘤细胞的分化,1

全科医学临床基地师资培训的实践与探索

全科医师规范化培训的大多数内容在临床基地完成.临床基地教师（以下简称临床教师）的带教水平,在很大程度上影响着全科医师规范化培训的质量.加强对临床教师的培训,增强其带教能力,对培养合格的全科医师具有重要意义.本院作为卫生部全科医师规范化培训试点基地,承担着全科医师规范化培训的任务,在临床基地师资培训方面进行了实践与探索,现探讨如下.

定向医学生服务基层意愿及相关因素研究

目的调查定向医学生服务基层意愿,并对其影响因素进行分析,从而提出有针对性的建议和措施。方法于2013年10月选取重庆医科大学2010—2013级950名定向医学生、均属于全科定向生。在查阅文献的基础上自行设计调查问卷与访谈提纲,对定向医学生采用问卷调查法与座谈法进行调查,内容包括出现违约想法原因、定向服务单位是否为生源地区县、对相关政策了解程度、职业规划。对定向医学生是否存在违约意愿及其相关影响因素进行分析。结果共发放问卷950份,回收939份,回收率为98.8%;有效问卷873份,有效率为93.0%。被调查者中男386名(44.22%),女487名(55.78%)。共308名(35.28%)定向医学生出现违约想法,出现违约想法的原因居前三位的是不能考研(45.13%,139/308)、服务时间太长(27.60%,85/308)、待遇太低(14.94%,46/308)。873名定向医学生中有476名(54.52%)定向服务单位不是生源地区县,有729名(83.51%)不了解"基层医务人员的工资水平要与当地事业单位工作人员平均工资水平相衔接"这一政策;308名存在违约想法的定向医学生中有172名(55.83%)定向服务单位不是生源地区县,有273名(88.64%)不了解上述政策。873名定向医学生中,选择成为定向医学生的原因居第一位的是定向医学生享有经济补助与就业政策优惠(27.60%,241/873);308名存在违约想法的定向医学生中,选择成为定向医学生的原因居第一位的是高考误填提前批(28.57%,88/308)。定向期满后的职业规划:873名定向医学生中,有284名(34.94%)选择根据六年后的实际情况再做决定,仅72名(8.25%)表示如果发展得好会选择留在乡镇卫生院;308名存在违约想法的定向医学生中,有111名(36.04%)争取进入县级以上的高等级医院工作,有17名(5.52%)表示如果发展得好会选择留在乡镇卫生院。多因素Logistic回归分析结果显示,对医学专业的看法、定向政策认同程度、基层医疗工作认可度、基层职业发展前景是影响定向医学生到基层就业的因素,且对定向政策认同程度越高、对基层职业发展前景越有信心、对基层医疗工作认可度越高的学生越愿意去基层就业,越喜欢医学专业的学生越不愿意去基层就业。结论定向医学生中有违约想法者所占比例较高,对医学专业的看法、定向政策认同程度、基层医疗工作认可度、基层职业发展前景是影响定向医学生到基层就业的因素,相关部门应完善定向政策与长效激励机制、提高基层医生待遇、加强定向医学生职业道德教育。

白芍总苷对肝癌耐药细胞BEL-7402/ADM耐药性的逆转作用及机制探讨

目的观察白芍总苷(TPG)对肝癌耐药细胞BEL-7402/ADM耐药性的逆转作用,并探讨其作用机制。方法体外培养人肝癌ADM敏感细胞BEL-7402(亲本组)和ADM耐药细胞BEL-7402/ADM(耐药组),将BEL-7402/ADM细胞转染HDAC3基因siRNA干扰质粒(干扰组)及空载质粒(空载组)24 h,用白芍总苷孵育BEL-7402/ADM细胞48 h(用药组)。取亲本组、耐药组、用药组细胞,分别以不同浓度ADM作用48 h;MTT法测算增殖抑制率,计算各组ADM的半数抑制浓度(IC_(50))。取亲本组、耐药组、空载组、干扰组及用药组细胞,分别采用RT-q PCR法和Western blot法检测细胞多药耐药基因MDR1和去乙酰化酶(HDAC3)mRNA和蛋白。结果亲本组、耐药组和用药组细胞ADM的IC_(50)分别为0.139、8.807、4.890 nmo L/L;用药组细胞对ADM耐药的逆转倍数为1.80倍,逆转率为45.23%。MDR1 mRNA及蛋白相对表达量耐药组、空载组>用药组>干扰组>亲本组(P均<0.05或0.01),HDAC3 mRNA及蛋白相对表达量耐药组、空载组>干扰组>亲本组、用药组(P均<0.05或0.01)。结论白芍总苷通过抑制HDAC3的表达,引起MDR1表达下调,从而逆转BEL-7402/ADM细胞的耐药性。

综合医院全科医学科的定位与发展

随着医学模式的转变，全科医学已受到广泛关注和高度重视，必须大力发展全科医学得到共识。国内专家学者普遍的观点表明，综合医院设置全科医学科并进行规范化的学科建设，开展全科医学医、教、研工作，是全科医学发展的重要保障，也是21世纪医学发展的要求。