模拟微重力条件下小鼠拟胚体形成及分化的初步观察

目的研究模拟微重力条件下小鼠胚胎干细胞（embryonic stem cell，ESc）拟胚体（embryoid bodies，EBs）的形成及分化。方法胰酶消化普通培养的小鼠胚胎干细胞，调整细胞数为1×10^6·ml^-1，移入可模拟微重力的旋转型生物反应器内进行培养，显微镜动态观察鼠EBs的形成，苏木精-伊红染色观察ESc的组织细胞分化情况，检测培养过程中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）的漏出量。取不同时相的EBs，接种6孔培养板培养3～5d，倒置相差显微镜观察EBs来源细胞的分化。结果生物反应器旋转培养24h即可肉眼观察到大量多细胞聚集体形成，相差显微镜和立体显微镜下发现，72h后细胞聚集体进一步形成均一的EBs。随培养时间延长EBs体积不断增大，并不断有新的EBs出现。HE染色显示，EBs中的ESc呈现多组织多细胞分化特征，培养后期（12d以后）较大EBs中心有不同程度的坏死，伴LDH漏出量的明显升高。接种EBs于6孔培养板后，镜下观察到不同类型的细胞，如内皮样细胞、成纤维样细胞、肝细胞样细胞、血管样结构以及可自发性搏动的心肌样细胞。结论ESc在模拟微重力条件下可大量快速形成EBs，伴有不同类型的组织细胞分化。旋转型生物反应器可作为ESc研究的有用工具。

骨髓间充质干细胞在心肌梗死犬心肌内分化及对心肌细胞凋亡的影响

背景：体内移植骨髓间充质干细胞对实验动物的心肌梗死和心力衰竭有较好的改善作用，但具体机制尚不清楚。目的：观察骨髓间充质干细胞在心肌梗死犬梗死区的分化以及对心肌细胞凋亡的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005—03／2007—12在美国Texas Heart Institute干细胞研究室进行骨髓间充质干细胞移植，在第三军医大学完成免疫组织化学染色。材料：成年杂种犬，平均体质量25～35k。方法：采用密度梯度离心法提取犬骨髓间充质干细胞，移植前以BrdU标记骨髓间充质干细胞。采用外科手术于近端冠状动脉左前降支植入布洛芬缩肌装置并结扎相连分支的方法制作犬心肌梗死模型。造模后分为实验组与对照组，实验组于损伤缺血部位注射同种异体骨髓间充质干细胞。对照组注射等量生理盐水。主要观察指标：对移植BrdU标记的骨髓间充质干细胞的心肌梗死犬心肌梗死区组织细胞进行免疫组织化学染色，同时采用DeadEnd^TM Colorimetric TUNEL System对心梗标本进行凋亡细胞的染色观察。结果：注射骨髓间充质干细胞的心脏组织切片BrdU免疫组织化学染色可见大量细胞核呈现深褐色或黑色的阳性反应，在心脏组织的不同区域表现出不同的形态特征，其中大多数植入心肌细胞间的骨髓间充质干细胞，形态上与心肌细胞无异，而其他区域的骨髓间充质干细胞则与间质细胞较相似，无特定的形状。骨髓间充质干细胞移植组心肌梗死区凋亡的心肌细胞数少于未移植组。结论：骨髓间充质干细胞心肌内移植后可在心肌梗死区分化成心肌细胞，并减轻犬心肌梗死后的细胞凋亡。

局麻下行带膜支架术治疗急性StanfordB型胸主动脉夹层的疗效

目的探讨急性StanfordB型胸主动脉夹层(TAD)腔内隔绝术的方法、院内及中期临床疗效。方法对近5年完成的局麻下行腔内隔绝术治疗的30例急性StanfordB型胸主动脉夹层患者的资料进行分析。结果住院期间及随访1～53个月,平均随访16±15个月,结果表明:30天内无死亡病例,随访6个月时所有患者均成功封堵了破口,胸降主动脉和腹主动脉真腔扩大,假腔内血栓形成,支架位置、形态正常。2例左锁骨下动脉被封闭,术后无左上肢缺血表现,随访期间2例死亡,平均16±15个月生存率93.10%。结论带膜支架置入术治疗急性StanfordB型胸主动脉夹层是一种安全有效的方法。

鼠拟胚体来源细胞向肝细胞及心肌细胞分化的初步观察

目的观察微重力生物反应器内拟胚体(EBs)的形成及其EBs来源细胞的肝细胞与心肌细胞分化。方法将未分化鼠胚胎干细胞(ES细胞)以1×106/mL移入微重力反应器内旋转培养,6d后取出反应器内形成的EBs接种于培养板培养,使用含DMSO、地塞米松等IMDM培养液继续培养10d。动态观察EBs形成和EBs来源细胞分化细胞形态特征,采用Western blot、免疫荧光染色方法检测EBs来源细胞肝细胞及心肌细胞标志物的表达。结果生物反应器旋转培养6d形成均一的拟胚体,接种后移行细胞中出现肝细胞特征样细胞和自发性搏动细胞,Western blot检测到EBs来源细胞肝细胞标志物Alb表达,免疫荧光染色分别检测出肝细胞标志物Alb、AFP和心肌细胞标志物GATA4的表达。结论微重力生物反应器可加快EBs的形成,EBs来源细胞可有效地向肝细胞及心肌细胞分化,两种细胞之间可能存在相互作用。

胚胎干细胞在可降解聚合三维支架上的生长增殖与分化

目的：三维可降解生物材料是组织工程的重要载体,观察胚胎干细胞在聚合三维支架上的生长、增殖和分化状态,为胚胎干细胞分化形成任何组织修复替代治疗机体组织器官的损伤和功能衰竭提供实验学依据。方法：实验于2007-05/09在解放军第三军医大学西南医院感染病研究所人工肝实验室完成。①材料：鼠胚胎干细胞CCE株为加拿大Stem Cell Technologies公司产品,由聚乳酸和聚乙醇酸聚合而成的非编织型三维支架为美国Synthecon公司产品,细胞外基质Matrigel TM由BD Biosciences公司提供。②实验方法：将鼠胚胎干细胞株接种于被覆明胶的培养瓶内,加入含0.1mmol/L非必需氨基酸、2mmol/LL-谷酰胺、0.1mmol/L二羟基丙硫醇、15%胎牛血清、1000U/mL白血病抑制因子的IMDM培养液。3d后采用＂悬滴法＂使细胞在不含白血病抑制因子的上述IMDM培养液中形成胚胎体,6d后胰酶消化得到胚胎干细胞,浓度调整为（3-4）×109L-1,与Matrigel TM按1∶1混合并接种于剪成5mm×4mm×1mm小片的三维支架内,加入含1%二甲基亚酚、10-7mol/L地塞米松、5mg/LITS、15%胎牛血清的IMDM培养液进行诱导分化。③实验评估：激光共聚焦显微镜观察胚胎干细胞在三维支架上的生长与增殖情况;应用荧光染色检测细胞活性;苏木精-伊红染色光镜下观察胚胎干细胞的组织分化情况。结果：①细胞生长与增殖：接种培养1d多数胚胎干细胞粘连在一起形成聚集体,状似球形,附着于三维支架的纤维上。7d时聚集的胚胎干细胞开始沿纤维支架生长,互相粘连,呈片状和网状。细胞数随培养时间延长而不断扩大,至14d细胞交织在一起呈现多层面立体景象,布满整个三维支架。②活细胞观察：接种培养1,7,14d的胚胎干细胞绝大多数发出绿色荧光,始终保持良好的细胞活性。③胚胎干细胞的组织分化：在非特异诱导培养液作用下,胚胎干细胞可向原始血细胞样细胞、血管样结构、软骨样结构和腺样结构分化。结论：胚胎干细胞能够附着于可降解聚合三维支架上生长增殖,并在保持细胞活性的情况下呈现向多细胞、多组织分化的良好态势。

射频消融治疗阵发性室上性心动过速331例

目的研究射频消融治疗阵发性室上性心动过速的临床疗效总结经验。方法对331例阵发性室上性心动过速患者行心内电生理检查和射频消融治疗。结果对331例阵发性室上性心动过速患者行心内电生理检查和射频消融治疗。结论对331例阵发性室上性心动过速患者行心内电生理检查和射频消融治疗。结论射频消融是治疗阵发性室上性心动过速的一种有效方法。

抗坏血酸增强三氧化二砷诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡

目的:探讨抗坏血酸(AA)对三氧化二砷(As2O3)诱导人多发性骨髓瘤(MM)细胞株RPMI8226细胞凋亡的作用及其分子机制。方法:采用细胞计数、细胞形态学、透射电镜、吖啶橙溴化乙锭(AOEB)染色、AnnexinⅤ染色以及细胞周期测定,观察As2O3联合AA对RPMI8226细胞的增殖抑制及促凋亡作用;应用流式细胞仪检测RPMI8226细胞死亡受体DR4分子的表达。结果:单用AA对RPMI8226细胞的生长无影响;As2O3抑制RPMI8226细胞的生长,其作用呈时间和剂量依赖性;As2O3联合AA较单用As2O3对RPMI8226细胞的抑制作用强(P<0.01)。单用5μmol/L的As2O3对靶细胞作用后,无明显凋亡形态学改变;100μmol/L的AA联合5μmol/L的As2O3作用靶细胞后:光镜、电镜和AOEB染色显示出典型的凋亡形态学改变;AnnexinV染色检测到早期凋亡细胞;细胞周期显示:G1期细胞比例增高,S期减低,并有凋亡峰。As2O3能上调RPMI8226细胞表达DR4分子,AA联合As2O3可以增强上述效应(P<0.05)。结论:AA对As2O3诱导RPMI8226细胞凋亡有增敏效应,该效应过程可能依赖于死亡受体DR4的过度表达。

卡维地洛治疗慢性充血性心力衰竭患者的临床疗效

目的:探讨卡维地洛对慢性充血性心力衰竭(CHF)患者的症状、心功能、心室重构和细胞因子的影响。方法:随机选择CHF患者72例随机分为心力衰竭常规治疗组(n=34)和卡维地洛治疗组(n=38),后者在常规抗心力衰竭治疗基础上加用卡维地洛,剂量平均为12.5～37.5mg/次,2次/d,患者经治疗随访达6～12个月,观察两组治疗前和治疗后6个月、12个月,对患者症状、心室重构及心功能的影响,分别测定左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)和6min步行距离。测定健康对照组(n=35)和两组心衰患者治疗前和治疗6个月血浆肿瘤坏死因子(TNF-α)、B形脑钠尿肽(BNT)和白细胞介素-6(IL-6)的浓度。结果:CHF患者在强心、利尿和血管紧张素转换酶抑制剂治疗基础上,用卡维地洛治疗6、12个月后,能显著改善慢性心力衰竭患者的运动耐量、心功能和心室重构,LVEDD、LVESD、LVEF和6min步行距离的改善均优于常规治疗组(P<0.01,P<0.05)。心衰患者3种细胞因子血浆浓度均高于对照组(P<0.001),卡维地洛治疗后细胞因子的下降明显优于常规抗心力衰竭治疗(P<0.01)。结论:卡维地洛可明显改善CHF患者心功能,提高运动耐量,抑制左室重构,降低细胞因子TNF、BNT和IL-6的浓度。

高血压患者血压变异性临床分析

目的探讨高血压病人血压变异的特点与高血压靶器官损害的关系。方法选择高血压病人Ⅰ期50例,Ⅱ期44例和血压正常人26例进行动态血压检测。结果高血压组血压变异各参数均显著大于正常组。三组间血压变异相同,白天增高夜间下降,收缩压变异大于舒张压变异。Ⅱ期高血压组血压变异各参数显著大于Ⅰ期高血压组。结论血压变异增大是高血压患者的一个重要临床特征,血压变异增大与靶器官损害有关。

冠心病合并高血压、糖尿病患者冠状动脉病变特点

目的 :探讨冠心病合并高血压、糖尿病患者冠状动脉病变特点。方法 :统计分析1 67例冠心病及冠心病合并高血压、糖尿病患者冠状动脉造影显示的冠状动脉病变分布及狭窄程度。结果 :1冠心病合并糖尿病组 :三支病变、重度、弥漫性病变的发生率明显增高 ,与单纯冠心病组有极显著性差异 ;双支、中度病变亦增多 ;2冠心病合并高血压组 :双支、重度、弥漫性病变较单纯冠心病组明显增多 ;3冠心病合并糖尿病组与合并高血压组比较 :前者较后者三支病变发生率明显增多 ,有极显著性差异 ;重度、弥漫性病变亦增多。结论 :冠心病合并高血压、糖尿病后 ,冠状动脉病变程度明显加重 ,而合并糖尿病者表现尤为严重 ,以三支、重度。

64层螺旋CT在冠心病诊断中的价值

目的评价64层螺旋CT增强扫描对冠状动脉狭窄的诊断意义。方法156例患者分别行64层螺旋CT增强扫描和经皮冠状动脉血管造影术(CAG),由两位不知造影结果的医师进行阅片,并以CAG结果作为标准进行对比分析。结果64层螺旋CT判断近段血管狭窄(管腔狭窄≥50%)的灵敏度是:左主干(LM)99%,右冠状动脉(RCA)93%,左前降支(LAD)89%,左回旋支(LCX)82%,判断远段血管狭窄的灵敏度为:RCA56%,LAD45%,LCX43%(P<0.05)。结论64层螺旋CT增强扫描及其三维重建与冠状动脉血管造影结果具有高度的相关性,通过经静脉增强造影,64层螺旋CT可以清楚显示冠状动脉并判断管腔的狭窄,尤其是近段的重度狭窄。

心血管危险因素对老年人群心血管功能及脑血管血流动力学指标的影响

目的探讨不同心血管危险因素对老年人群心血管功能及脑血管血流动力学指标(cerebral vascular hemodynamics index, CVHI)的影响。方法选取2016年4月至2018年5月在延安大学附属医院行健康体检的老年人160例,按照心血管危险因素不同将其分为低危组(n=52)、中危组(n=54)和高危组(n=54),分析每组不同心血管因素暴露下的CVHI评分及差异。结果 3组中高BMI和空腹高血糖(fasting plasma glucose, FPG)同时存在,高危组血脂指标异常数量高于中危组,高危组CVHI更低。3组血管的平均流量(Qmean)、平均血流速度(Vmean)、临界压(CP)、压差(DP)指标差异无统计学意义,而最大血流速度(Vmax)、最小血流速度(Vmin)等比较,差异有统计学意义(P<0.05);血流动力学指标包括[脉搏波速度(pulse wave velocity, Pwv)、特性阻抗、外周阻力(vascular resistance, RV)、动态阻力(dynamic resistance,DR)]随着心血管疾病危险程度的加重均升高。结论老年人群的CVHI评分受心血管危险因素的影响,老年人群危险因素的暴露与CVHI变化及其总分降低之间存在密切关系,CVHI可作为老年人群心脑血管疾病风险评估和干预的良好指标。

急性心肌梗死合并心原性休克的治疗和预后原因分析

目的评价急性心肌梗死合并心原性休克45例患者的临床疗效,寻求改善预后、降低病死率的措施。方法回顾性分析2004-01～2008-1245例心肌梗死合并心原性休克患者,运用心血管活性药物、药物溶栓、主动脉内球囊反搏(IABP)、经皮冠脉介入治疗术(PCI)的治疗效果。结果IABP治疗42例(93.3%),(PCI)再灌注治疗39例(86.7%),溶栓治疗11例(24.4%),共死亡16例(35.6%)。经药物和IABP治疗,在接受再血管化前死亡的患者占死亡数的31.3%(5/16),血管再灌注后死亡的患者占死亡数的68.7%(11/16)。死于心功能衰竭者9例,死于肾功能衰竭和呼吸功能衰竭者7例。10例出现急性肾功能衰竭的患者全部死亡。急性肾功能衰竭(r=0.743,P=0.001)、急性呼吸功能衰竭(r=0.605,P=0.001)、糖尿病(r=0.368,P=0.002)和年龄与死亡有相关关系。结论急性心肌梗死合并心原性休克的治疗有了很大的发展,但病死率仍然较高,主要死因是急性心力衰竭、急性肾功能衰竭和急性呼吸功能衰竭。要进一步降低急性心肌梗死合并心原性休克患者住院病死率,需要更早、更好的循环辅助装置下的再灌注和综合治疗措施。

房内折返性心动过速的电生理及射频消融特点与临床分析

目的:探讨房内折返性心动过速的电生理特征及导管消融治疗的疗效。方法:通过激动顺序标测法定位14例房内折返性心动过速起源部位,并进行射频消融术,消融终点为终止房内折返性心动过速。结果:14例房内折返性心动过速起源于左心房10例,右心房4例。结论:激动顺序标测消融靶点,此法简便直观、准确、成功率高。

强烈化疗治疗急性白血病初步观察(附45例报告)

采用强烈化疗方案可以提高急性白血病的缓解率,笔者共观察45例,现报道如下。材料与方法一、患者:1986年1月～1989年12月均为住院初治患者,经血象、骨髓象、临床而确诊。共45例,男25例,女20例。年龄:16～75岁,平均年龄46岁。急淋(ALL)17例,急非淋(ANLL)25例。