Tw近交系小鼠的遗传鉴定和罕见基因分析

目的通过等位基因酶的生化多态性可以发现小鼠DNA的序列多态性,为人类疾病基因鉴定和动物实验的研究提供丰富的动物基因库,为科研工作提供宝贵资源。方法应用国产生化标记检测试剂盒,采用遗传生化检测方法,对天津市卫生防病中心自主培育的近交系小鼠进行Akp-1(碱性磷酸酶-1)等二十五个生化位点标记基因检测。结果经检测发现TW(Tianjin wild)小鼠在Amy1(淀粉酶-1),Es2(酯酶-2),Es3(酯酶-3),Es10(酯酶-10),Gpd1(葡萄糖磷酸脱氢酶-1),Hbb(血红蛋白β链),Np1(核苷酸磷酸化酶-1),Pgm2(磷酸葡萄糖变位酶-2)共八个生化位点发现罕见基因。结论检测国内新品系的遗传生化基因位点,发现罕见基因型。

实验家兔遗传质量检测方法的建立

目的建立实验家兔遗传生化位点的同工酶醋纤膜电泳法并用此法对实验家兔的Adh(乙醇脱氢酶)等9个生化位点的等位基因分布进行分析测定。方法利用同工酶醋纤膜电泳法对实验家兔进行Adh等多个生化位点进行检测。结果Adh等5个生化位点呈多态性,各群体之间基因频率分布有差异。结论通过对现有远交系封闭群的实验家兔进行生化监测,反应出该种群同工酶的等位基因频率,根据等位基因频率判断其是否符合群体遗传平衡,适当地对某些等位基因加以扩大,以求达到远交系家兔种群的遗传稳定性。

遗传生化标记检测试剂盒的对比研究

目的对自行研制的遗传检测试剂盒与日本进口试剂盒进行比较,以便推广应用。方法按照国家标准规定的方法,对Akp1等十三个生化位点进行检测。结果经过多方面的对比研究证实,国产试剂盒具有使用方便、稳定性好、检测结果准确等优点。结论国产试剂盒操作简便,易于储存和运输,结果准确,便于推广应用。

BALB/c小鼠遗传污染对单克隆抗体制备的影响

目的检测BALB/c小鼠遗传污染对单克隆抗体制备实验的影响。加强近交系小鼠的饲养管理和重视实验动物的遗传质量检测。方法使用遗传生化标记方法对购进的两批BALB/c小鼠进行了碱性磷酸酶-1(Akp-1)等13个生化位点的检测。结果注射杂交瘤细胞后不产生腹水,经生化检测发现,购买的第一批BALB/c小鼠,在过氧化氢酶-2(Ce-2)等4个生化位点发现杂合基因,第二批BALB/c小鼠在过氧化氢酶-2(Ce-2)等8个生化位点发现杂合基因。结论本实验说明在实验动物的饲养管理上存在漏洞,上述两批BALB/c小鼠未严格按照国家实验动物管理操作规程操作,必须规范实验动物饲养管理,加强实验动物遗传检测,这是保证动物试验结果准确可靠不可或缺的重要环节。

实验小鼠遗传检测试剂盒的研制及应用

本文研制的遗传监测试剂盒，包括生化试剂盒和标准样品盒两部分。用生化试剂盒对碱性磷酸酶－１（Ａｋｐ－１）等２１个生化位点进行检测，效果良好。标准样品盒，经两年的保存后，仍保持与新鲜组织相同的酶的活性、试剂盒使用操作简单，便于运输和保存，为实验小鼠的遗传常规检测和新品系的鉴定提供了有利的条件。

手足口病的观察与护理

手足口病是一种常见多发性传染病，以3岁以下婴幼儿发病为主，多种肠道病毒都能引起，EVTI病毒是其中一种，一般全年均有发生，5—7月份为高发期。手足口病一般症状较轻，大多数患者发病时往往会出现发热，精神及食欲差，恶心、呕吐，手掌、足底出现斑疹和疱疹，周围红晕，口腔黏膜出现疱疹或溃疡。

新生儿缺氧缺血性脑病的观察与护理

临床资料 我科2001年1月～2006年1月收治新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿89例，其中男52例，女37例，年龄为出生后20分钟-7天。其中早产儿21例，足月儿68例，生后5分钟评分0—3分16例，〈7分6例，〈9分12例。根据HIE诊断依据及分度标准，轻度44例，中度30例，重度15例。全部病例根据临床表现结合CT检查确诊。

荷叶黄酮对乳酸杆菌和双歧杆菌抗氧化能力的协同作用研究

为研究荷叶黄酮对乳酸杆菌和双歧杆菌抗氧化能力的影响,0.25 mg/m L的荷叶黄酮添加至培养基培养保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus A105)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis B211),并提取细胞裂解液,依次从自由基清除能力、抗脂质过氧化能力及抗氧化物质活性三方面评估其抗氧化能力。结果显示,0.25mg/m L的荷叶黄酮提高了动物双歧杆菌(54.9%)及保加利亚乳杆菌(14.8%)对O-·2清除能力;其对保加利亚乳杆菌清除DPPH自由基能力稍有提升,对动物双歧杆菌清除DPPH自由基能力稍有抑制;其对保加利亚乳杆菌抗脂质过氧化能力提升率达658%,具有显著的协同增效作用。同时发现:经添加0.25 mg/m L的荷叶黄酮至培养基后,动物双歧杆菌和保加利亚乳杆菌胞内超氧化物歧化酶(SOD)酶活及谷胱甘肽(GSH)活力得到显著的提高。结果表明,荷叶黄酮的添加对保加利亚乳酸杆菌和动物双歧杆菌的抗氧化活性具有促进作用,且对保加利亚乳酸杆菌抗脂质过氧化能力具有明显的协同促进作用,可能与其胞内SOD酶活及GSH活力得到的显著的提升有关,具有潜在的应用价值。

应用RAPD方法对近交系小鼠进行遗传检测的研究

目的 为实验室日常检测近交系小鼠的遗传背景提供一种分子生物学方法。方法 用 6条随机引物对 6个品系近交系小鼠基因组DNA进行PCR扩增。结果 6条随机引物中p2、p3、p5和p6四引物扩增的条带差异较为明显。

10种常见SPF级实验大、小鼠血液学及生化指标正常参考值的探讨

目的建立10种常见SPF级实验大、小鼠血液及生化正常参考值。方法采用半自动生化测定仪及血球计数仪对不同周龄、不同性别的常见10种SPF大鼠的血液学指标及生化指标值进行测定。结果取得4周龄和8周龄不同周龄、不同性别大、小鼠血液学及生化值平均值及正常参考范围;多数生化指标受年龄及性别的影响,除了不同品系、年龄和性别的大、小鼠ALP呈现规律性变化,其他指标也与相关报道有差异。结论在基础生物学研究中,要充分考虑到性别和年龄对实验动物血液学及血清生化指标的影响。

雌雄金黄地鼠血液生理生化指标的比较分析

目的测定金黄地鼠的血液生理生化参考值,并对两性的参考值进行比较。方法将88只4周龄金黄地鼠,80只8周龄金黄地鼠,采血后,用日本光电MEK-7222K血球分析仪测定血液生理指标,用Olympus AU400全自动生化分析仪测定血清生化指标。结果4周龄金黄地鼠血液生理指标中RBC、HGB、HCT、MCV和RDW性别差异有显著性(P<0.05),而WBC、MCH、MCHC、PLT、PCT、MPV和PDW等性别差异无显著性(P>0.05);4周龄金黄地鼠血清生化指标中ALB、ALP、GLU、CA、P、CHO和TG性别差异有显著性(P<0.05),而ALT、AST、TP、BUN和CREA等性别差异无显著性(P>0.05)。8周龄金黄地鼠血液生理指标中WBC、LYM、MON、BAS、LYM%、NEUT%、MCH、RBC、HGB、HCT、MCV、PDW和RDW性别差异有显著性(P<0.05),而MCHC、PLT、MPV、PCT、NEUT、EOS、BAS、MON%和EOS%等性别差异无显著性(P>0.05);8周金黄地鼠血清生化指标中ALT、ALB、BUN、GLU、CREA、P、CHO和TG性别差异有显著性(P<0.05),而AST、TP、ALP和CA等性别差异无显著性(P>0.05)。结论金黄地鼠血液的生理生化值受多种因素影响,部分指标两性间测定值有差异,但多数指标差异不显著。

小鼠11个品系20个微卫星基因位点的遗传分析

目的利用PCR对近交系小鼠11个品系的20个微卫星基因座进行遗传检测,为实验室日常检测近交系小鼠的遗传背景提供一种分子生物学方法。方法用20个微卫星引物对11个品系近交系小鼠的基因组DNA进行PCR扩增。根据MMDBJ数据库信息,已知品系C3H、DBA、BALB/c和C57BL/6的多态性位点大小,由此可推知其他品系C57BL/6-Bg、C57BL/10、TA1、TA2、T739、M615和SCID的多态性位点大小。结果应出现的220条条带中有193条与预期的一致。结论利用这20个微卫星基因位点可以将11个品系的近交系小鼠区分开来,近交系小鼠具有丰富的遗传多样性,这些结果对于近交系小鼠的遗传检测具有重要指导意义。

10种常用SPF级实验大、小鼠体重及主要脏器的测定

目的测定10种常用SPF级大、小鼠体重、脏器及肠道等正常参考值。方法解剖10种品系实验动物,称量各组织脏器的相对重量,用尺测量肠道长度,共对9种脏器指标进行了测定。结果不同品系动物的各种脏器指标有明显差别,即使是同种品系,不同性别间也存在差异。

不同周龄大耳白兔血液生理生化指标的测定

为了明确大耳白兔中国兽药监察所封闭群的生物学特性 ,对其血液生理生化指标进行了测定。选 5、1 0及 1 3周龄的雄兔和雌兔 ,空腹采血测定红细胞、白细胞等 1 6项血液生理指标和血糖、总蛋白等 1 6项生化指标。 1 0周龄的红细胞数、白细胞数、红细胞压积和平均红细胞血红蛋白含量高于 5周龄和 1 3周龄 ,雌雄间血液生理指标无明显差异 ;血清丙氨酸转氨酶含量随着周龄的增加而升高 ,碱性磷酸酶则随着周龄的增加而下降。与日本大耳白兔相比 ,主要血液生理指标比较接近 ,丙氨酸转氨酶、白蛋白、尿素氮、直接胆红素等血液生化指标相近 ,其他指标有所不同。测定结果表明 ,该封闭群具有不同于日本大耳白兔 (Slc:JW/ CSK)

两个NIH小鼠种群对不同种类的乙肝疫苗免疫应答效应的比较

目的比较两种不同的NIH小鼠种群基因组DNA中H-2q单倍型的百分比,对重组基因乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)、重组基因乙型肝炎疫苗(CHO)、重组基因乙型肝炎疫苗(汉逊酵母)和治疗性乙型肝炎疫苗(乙克)免疫应答的影响。方法检测乙肝疫苗免疫效力用酶标法,测定乙肝疫苗的ED50值,再通过微量细胞毒法和PCR方法检测小鼠的H-2单倍型,计算不同品系小鼠H-2q的百分数,得出乙肝疫苗与不同动物种群的相关性。结果经验证,经1号NIH小鼠检测结果证实,重组基因乙型肝炎免疫效力依次为CHO>汉逊>酿酒,疗性乙型肝炎疫苗(乙克)效力检测合格,但经2号NIH小鼠检测结果显示除CHO疫苗合格外,其他三种疫苗检测结果均为不合格。基因检测结果为,1号种群NIH鼠含有H-2q型基因的百分比是96%,而2号种群NIH小鼠含有H-2q型基因基因百分比为30%,因此不同的q型基因百分比导致了不同的检测结果。结论根据本研究结果表明虽然NIH鼠的H-2单倍型中有q型基因,但不同来源的小鼠种群之间会存在差异,经不同的环境饲养后,小鼠的基因会发生不同的变化,因此在进行生物制品检定时,要注意不同品系小鼠及同一品系小鼠不同种群之间的差异对试验本身的影响。建立一种"动物免疫"的概念。

Wistar大鼠超数排卵及胚胎移植

不同剂量激素对Wistar雌鼠超数排卵 ,并与正常雄鼠交配 ,收集 2 -细胞胚胎进行输卵管移植 ,收集 8-细胞胚胎进行子宫移植 ,结果发现每只Wistar雌鼠间隔 4 8h分别腹腔注射 5 0IU的PMSG与hCG ,Wistar大鼠的超数排卵效果最好 ,平均可获得 2 -细胞胚胎 36 .3± 15 8枚 ,输卵管移植后产仔率为 73 33% ,平均可获得 8-细胞 2 2 6±13 1枚 ,子宫移植产仔率为 75 0 0 %。

野生来源TW近交系小鼠的遗传监测

目的 对中国特有野生来源的TW (TianjinWild)小鼠近交系进行遗传质量检测。方法 按照国标GB T14 92 7 1 2 0 0 1、GB T14 92 7 2 2 0 0 1及WHO(国际实验动物科学理事会 )遗传检测操作规程 ,对TW近交系小鼠进行Akp1等 2 5个遗传生化标记基因纯合度测定 ,进行组织相容性基因纯合度的测定。结果 对TW近交系小鼠进行Akp1等 2 5个遗传生化标记基因的测定 ,所检基因均为纯合体。同时 ,在所检的 2 5个遗传位点中 ,发现有 8个罕见生化标记基因多态性位点 ;检测的组织相容性基因为纯合。结论 按照国家标准 ,野生来源的TW小鼠近交系遗传纯合度已达国标 ,成为高度纯合的近交实验小鼠品系 ,并可望成为具有标准基因库 (型 )

清洁级与普通级小鼠检测乙肝疫苗生物效价的对比研究

清洁级小鼠对乙肝疫苗免疫应答比普通级小鼠敏感，用清洁级小鼠检测乙肝疫苗的效价结果准确并且稳定，表明了实验动物升级换代的重要性。

五个昆明小鼠封闭群遗传生化位点比较研究

目的 为了进行昆明小鼠标准化研究 ,探讨了不同种群遗传生化位点的差异。方法 随机选取北京生物制品研究所、长春生物制品研究所、华北药厂、中国医学科学院实验动物研究所和中国药品生物制品检定所昆明小鼠各 4 0只 (雌雄各半 ) ,测定Es3等十三个生化位点的基因型分布。结果 各群在AKP1、Es1和Trf位点均为一个表现型 ,即b型 ;北京生物制品研究所、长春生物制品研究所和华北药厂的Ce2为单一的a型 ;Es3位点除北京生物制品研究所和长春生物制品研究所外 ,均无a型、ac和ab型 ;中国医学科学院实验动物研究所种群还在Hbb(s)和Idh1(a)位点只有一种表现型。各封闭群的基因频率在多数位点上处于平衡状态 ,遗传距离计算的结果表明 ,基因分布与种群的来源有密切关系。结论 不同昆明小鼠种群之间存在差异 。

灰仓鼠血液生理生化指标及脏器系数性别间比较

目的测定灰仓鼠的血液生理生化正常值，测定灰仓鼠的体重和内脏器官（心、肝、脾、肺、肾、肾上腺和胸腺）的重量，统计各内脏器官的相对重量，并对两性的正常值进行比较。方法将41只8周龄灰仓鼠，采血后，测定血液生理指标和血清生化指标。用天平称量灰仓鼠的体重，解剖后称量各内脏器官的重量。结果8周龄灰仓鼠血液生理指标中白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白浓度（HGB）和红细胞压积（HCT）性别差异有显著性（P〈0．01），红细胞分布宽度（RDW）的性别之间有差异（P〈0．05）；8周灰仓鼠血清生化指标中天冬氨酸氨基转移酶（AST）、尿素（BUN）、肌酐（CREA）和葡萄糖（GLU）性别之间有差异（P〈0．05）；8周龄灰仓鼠的脏器系数中，脾、右肾和右肾上腺的脏器系数性别差异极显著（P〈0．001），肺的脏器系数性别差异显著（P〈0．01），心的脏器系数性别之间有差异（P〈0．05）；脾的绝对重量性别之间有差异（P〈0．05）。结论灰仓鼠的脏器系数、血液生理指标和血清生化指标受多种因素影响，部分指标两性间测定值有差异。