貉源细小病毒的分离鉴定

从大庆某貉养殖场采集病貉的病理病料，处理后接种于犬肾细胞（MDCK），分离到8株病毒。对分离毒株进行了中和试验、血凝试验、理化性质的鉴定试验，应用PCR方法扩增分离毒株VP2部分基因并进行序列分析。结果显示，病料接种MDcK细胞72h后产生了明显的细胞病变（CPE）；分离毒株可以被犬细小病毒阳性血清中和，中和效价为1：10^6—1：10^7；分离毒株对氯仿、乙醚不敏感，耐酸耐热，可以凝集猪红细胞，其凝集作用可被犬细小病毒阳性血清抑制；用PCR检测病毒的细胞培养液，可扩增出长531bp的片段，该片段的核苷酸序列与吉林分离的犬细小病毒株（EU310373）的同源性为99.6％。表明，分离的这8株病毒均为貉源细小病毒。

貉源犬瘟热病毒的分离鉴定

采集大庆某貉养殖场病貉的病料,处理后接种于非洲绿猴肾细胞(Vero)进行病毒分离。对分离毒株进行了中和试验、血凝试验、理化性质的鉴定,并用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测感染细胞中的病毒核酸。病料接种Vero细胞72h后产生明显的细胞病变(CPE);病毒分离株可以被犬瘟热病毒阳性血清中和,中和效价为1∶25;分离株对氯仿、乙醚敏感,对酸和热抵抗力弱,可以凝集鸡红细胞,其凝集作用可被犬瘟热病毒阳性血清所抑制;RT-PCR检测病毒细胞培养液,扩增出的片段长287bp,与预期设计的长度相同,经测序发现与MS01株的同源性为99%。结果表明,分离的病毒株为犬瘟热病毒,命名为CDV-DQ株。

一维Cu-Zn-Al合金纳米结构的制备

在常温常压下以Cu-Zn-Al合金为基体,用混合酸适当处理,制得了两种不同形貌、结构新颖的一维合金纳米结构。通过透射电子显微镜对它们的形貌和结构进行观察,发现其为中空圆柱结构,接近纳米管,但管壁较厚,中空程度小。根据EDX以及选区衍射确定了产物为一维Cu-Zn-Al合金纳米结构。初步分析了一维Cu-Zn-Al合金纳米结构的形成机理。

牛冠状病毒重组N蛋白间接ELISA检测方法的建立

为建立牛冠状病毒(BCV)检测方法,利用构建的pET30a-N重组质粒高效表达了BCV重组N蛋白,western blot检测该重组蛋白具有很好的免疫活性。以纯化的蛋白作为包被抗原,通过方阵试验确定了抗原的最适包被浓度为1.75μg/mL,血清最佳稀释倍数为1∶200,酶标二抗最佳稀释倍数为1∶8000,建立了检测BCV抗体的间接ELISA方法。用该法对黑龙江一些地区采集到的256份牛血清样品进行检测,结果阳性率为65.23%,与病毒中和试验方法的检测结果符合率达95.31%。本研究建立的间接ELISA方法为BCV的检测和区域流行病学调查提供了一种快速简便的血清学诊断方法。

牛冠状病毒和轮状病毒的双重RT-PCR检测方法的建立及应用

为建立一种快速诊断牛病毒性腹泻疾病的方法,利用本研究室分离鉴定的牛冠状病毒(BCV)和牛轮状病毒(BRV)毒株,根据GenBank中登录的BCV、BRV核苷酸序列分别设计并合成了两对能特异性扩增BCV、BRV的引物,经过条件优化,建立了检测BCV、BRV的双重PCR方法,扩增两种病毒的片段分别为244bp和382bp。该方法检测BCV和BRV的敏感度分别为1个和100个TCID50/100μL。应用这一方法能从病料中检测出这2种病毒。结果表明该双重RT-PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于这2种病毒性疾病的快速诊断。

常温常压下 Cu-Zn-Al合金一维纳米结构的制备

常温常压下,以Cu-Zn-Al合金为基体,经过适当的混和酸处理,制得了几种形貌和结构不同的一维合金纳米结构.通过能量弥散X射线(EDX)分析表明它们的主要成分是Cu、Zn、Al,其直径一般在20～50nm左右,最长长度达1600nm.合金中存在的非线性振荡,以及酸处理后产生纳米粒子是生成一维合金纳米机构的关键.结合透射电子显微镜照片初步分析了一维合金纳米结构的生长机制并给出了生长模型.

牛冠状病毒N基因的原核表达及初步应用

目的获得牛冠状病毒N基因的全长序列,实现N基因在大肠杆菌中的高效表达,并进行初步应用。方法根据已发表的牛冠状病毒Mebus株的序列设计引物,对BCV-DQ株进行RT-PCR扩增、克隆和测序;将该基因插入到原核表达载体pET-30a(+)上进行原核表达,SDS-PAGE和Western blot检测;用纯化的重组N蛋白作为包被抗原,建立ELISA检测方法,对部分临床样本进行检测。结果BCV-DQ株N基因全长1347bp,与GenBank已发表的6株BCV的N基因相比较,核苷酸同源性98.3%以上。构建的重组质粒pET-N能表达出一条大小约为60ku的蛋白,且能与鼠抗BCV血清发生特异性反应。用建立的ELISA方法对黑龙江不同地区送检的共256份牛血清样品进行检测,结果阳性率65.23%,与病毒中和试验的符合率达95.31%。结论BCV N基因保守性很高,并在原核表达系统中获得了高效表达,其表达产物具有良好的免疫反应原性。临床检测结果表明N蛋白可作为诊断抗原用于牛冠状病毒病的流行病学调查。

一维非碳纳米结构材料研究的动向

总结了近几年来国内外一维非碳纳米结构材料领域研究的最新进展 ,其中包括纳米管、纳米线、纳米带等一维非碳纳米结构的合成与表征及其适用化的可能性 ;评述了一种结构和形状新颖的纳米材料———Cu -Zn -Al合金一维纳米结构 ;

新城疫特异性转移因子的免疫作用研究

将新城疫特异性转移因子（Newcastle disease-specific transfer factor，ND-STF）1mL单独或与La Sota弱毒疫苗一起，分别口服和注射试验鸡，然后用MTT法检测各组鸡外周血淋巴细胞转化率；用La Sota疫苗免疫鸡，同时口服或注射0．1、0．5、1mL 3种不同剂量的ND-STF，然后检测血清中新城疫病毒HI抗体效价。在使用ND-STF后第5天，试验组鸡的淋巴细胞转化率达到高峰，刺激指数（stimulation index，SI）可达1．68-1．71，对照组的SI值为1．24～1．34，试验组与对照组差异显著（P〈0．05），各试验组之间差异不显著（P〉0．05）；鸡的HI抗体效价（log2 X）在免疫后第28天达到高峰，口服或注射ND-STF 3种不同剂量组HI抗体效价分别为10、9．25、10和6．3、9、8．3，使用ND-STF各组与未使用组相比较差异显著（P〈0．05），且口服的效果更好。表明ND-STF能够增强鸡的细胞免疫和体液免疫能力。

牛腺病毒7型PCR检测方法的建立

根据GenBank中牛腺病毒7型(BAdV-7)的蛋白酶基因序列,设计一对特异性的引物,扩增该序列中775 bp的片段,建立了BAdV-7的PCR检测方法。以Fukuroi株BAdV-7 DNA为模板进行特异性和敏感性试验,结果显示,该方法检测BAdV-7 DNA最小检测量为1 ng;与牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛冠状病毒(BCV)、牛轮状病毒(BRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)和鸡产蛋下降综合征病毒(EDSV)无交叉反应。方法为BAdV-7感染的临床诊断和流行病学调查奠定了基础。

一维Cu-Zn-Al合金纳米结构的低温制备

在常温常压下 ,利用简单的化学方法成功地在铜锌铝合金基体上生长出长 16 0 0nm ,直径 4 0nm的一维Cu Zn Al合金纳米结构。利用扫描电镜 (SEM) ,透射电镜 (TEM) ,能量分散X射线 (EDX)等研究了这些一维纳米结构的微观形貌和结构。该方法合成的一维Cu Zn Al合金纳米结构具有纯度高 ,管径均匀等特点。初步探讨了一维Cu Zn Al合金纳米结构的低温生长机理。

一维Cu-Zn-Al合金纳米结构的合成及表征

以铜锌铝合金为基体,利用简单的化学方法,在基体上生长出直径为十几纳米,长度达800nm的一维Cu-Zn-Al合金纳米结构。研究了一维Cu-Zn-Al合金纳米结构的形貌和结构,发现一维Cu-Zn-Al合金纳米结构的顶部呈自然开口状态。初步讨论了开口一维Cu-Zn-Al合金纳米结构的生长机制。

基于SOA的电子政务系统研究

SCA是目前实现SOA构架的新技术。通过研究当代SOA特征及其实现技术,并针对当代SOA技术标准提出了基于SCA和BPEL的SOA解决方案。该构架实现业务组件的虚拟化,消除了服务集成的障碍,为在电子政务系统中的服务集成应用提供了新的思路。

Cu-Zn-Al合金纳米分叉结构的制备及显微分析

通过对Cu-Zn-Al合金进行简单的化学处理,得到了具有分叉结构的Cu-Zn-Al合金纳米结构,用透射电镜考察了分叉纳米结构的形貌及其微结构特征.实验表明:分叉纳米结构的形态与化学处理工艺有关,有的分支纳米结构与未分支的形态类同,分支的顶端呈开口状态;有的沿生长方向呈规则的同向排列,各分支的形态相近,端部呈封闭状态.Cu-Zn-Al合金纳米分叉结构的形成可能与制备条件的扰动有关,对Cu-Zn-Al合金纳米结构的分叉生长机制进行了初步探讨.

固体表面动态现象的研究进展

总结了近年来国内外固体表面动态现象研究的最新进展,其中包括金属和半导体表面原子岛的塌落现象、金属和半导体表面台阶波动、半导体表面特异集团的跳跃、金属袁面非线性振荡现象及其它一些动态现象;描述了这些动态现象特征及形成机制,并展望了动态现象的研究方向和应用前景。

基于Spring的电子政务设计与实现

Spring是J2EE开发的一种轻量级框架,它是为简化传统J2EE的开发过程复杂性而创建的。通过分析Spring框架结构及其特点和构建一个多层体系结构的电子政务系统,展示了Spring框架技术在J2EE开发过程中的强大优势。实践表明,使用Spring可以降低Web应用开发的复杂性,提高开发效率和质量。

一维Cu-Zn-Al合金纳米结构的制备及生长机理研究

Cu Zn Al合金经过简单的混合酸处理后,成功地在常温常压下制备出两种形态、组成不同的纳米管。能量衍射谱表明其主要成分是Cu,Zn,Al和Si,Al,O。其管径一般在20～50nm左右,最长长度达1600nm。研究发现,在混和酸处理后产生的分散程度很高的纳米粒子在纳米管的生长中起了重要作用,结合生长模型和透射电子显微镜照片初步分析了这种作用的机理和合金纳米管的生长机理。

表达ETEC F41的干酪乳杆菌免疫小鼠后的黏膜免疫应答

将SPF级Balb/c小鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组小鼠以pLA-F41/L.casei重组干酪乳杆菌滴鼻免疫,对照组用pLA/L.casei干酪乳杆菌滴鼻免疫,应用间接ELISA测定血清中特异性IgG抗体水平和鼻咽部冲洗液、肠道冲洗液、阴道冲洗液及粪便中ETEC F41特异性SIgA抗体水平。分离并计数NALT、NC及PP、IEL淋巴细胞数目,利用免疫细胞化学法检测CD4+、CD8+T细胞亚群水平,观察重组干酪乳杆菌滴鼻免疫小鼠诱导的鼻相关淋巴组织(NALT)和肠相关淋巴组织(GALT)黏膜部位的免疫应答。结果表明重组干酪乳杆菌滴鼻免疫小鼠可有效诱导NALT和GALT黏膜部位免疫应答。