黑曲霉菌丝体及发酵液抗菌活性初步研究

对黑曲霉(Aspergillus niger xj)抗菌活性进行研究以筛选天然抗菌药物。利用PDA液体发酵培养黑曲霉,菌丝体用90%乙醇加热回流提取,减压回收溶剂得浸膏,浸膏用水分散,依次用石油醚和醋酸乙酯萃取,分别回收溶剂得到石油醚、醋酸乙酯和水部分。另设发酵液直接用石油醚和醋酸乙酯萃取,分别回收溶剂得到石油醚、醋酸乙酯和水部分。采用滤纸片扩散法对得到的粗提物进行抗菌活性测定。结果表明,在供试浓度为50 mg/mL、指示菌为金黄色葡萄球菌的检测条件下,发酵液醋酸乙酯部分具有明显的抗菌活性,菌丝体及发酵液石油醚部分的抗菌活性相对较弱,其余粗提物未检测到抗菌活性。

响应面法优化黑曲霉产纤维素酶的发酵条件

采用单因素试验和响应面法对黑曲霉(Aspergillus niger)xj产纤维素酶的液体发酵条件进行优化并以羧甲基纤维素酶活力作为响应值。首先通过单因素试验初步确定葡萄糖2g/100mL、酵母膏1g/100mL和聚乙二醇体积分数0.1%,初始pH7.0,250mL三角瓶装30mL液体培养基、接种种龄为24h、接种量10%。再利用PlackettBurman(PB)设计筛选出影响羧甲基纤维素酶(CMCase)活力的显著因素:接种量和碳源。通过最陡爬坡试验逼近最大酶活力区域。最后用中心复合设计及响应面分析确定产酶的最佳发酵条件为在PDA的基础上,葡萄糖2.7g/100mL、酵母膏1.25g/100mL和聚乙二醇0.1%、种龄30h、装液量37.5mL(250mL三角瓶)、接种量8%(3.3mL)、初始pH7.0、28℃、150r/min培养96h。经过优化,CMCase活力最高为(63.5±1.7)U/mL,比未优化的条件(在PDA的基础上,种龄24h、装液量30mL(250mL三角瓶)、接种量10%(3mL)、葡萄糖2g/100mL、初始pH7.0、28℃、150r/min培养96h)得到的酶活力最高值(49.0±1.7)U/mL提高了29.59%。

黑曲霉发酵液抗真菌活性及稳定性研究

研究黑曲霉xj菌株发酵液的抗真菌活性及稳定性。以常见的病原真菌作为测试菌株,滤纸片法测定xj菌株发酵液的抑菌谱,通过温度、光照以及pH的变化测定发酵液中抗菌成分的稳定性。结果表明x:j菌株发酵液对5种病原真菌均有不同程度的抑菌活性,其中对茄病镰刀菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径达到了(45.11±0.21)mm。发酵液中的抗菌成分对光照稳定,但对温度及pH不稳定。xj菌株发酵液的抗菌范围较广,提取发酵液的抑菌成分时应尽量在低于80℃以下,pH中性的环境中进行。

邻苯二甲酸二丁酯对蛹虫草产虫草菌素的影响

以蛹虫草(Peacilomyces militaris)08-03为材料,在有机溶剂油酸,十二酸及邻苯二甲酸二丁酯中,选择合适的有机溶剂及浓度并确定最适合的加入时间,对蛹虫草菌株进行两相发酵培养。结果显示:选用浓度为6%的邻苯二甲酸二丁酯分别在08-03摇瓶培养到24 h和120 h时加入,继续培养到196 h,收集菌丝体,虫草菌素总产量分别达到了(0.226±0.211)mg/g和(0.226±0.211)mg/g,分别比未添加有机相的对照组(0.030±0.004)mg/g提高了7.48倍和7.09倍。

轮枝拟青霉中虫草素的微波提取工艺优化

采用微波提取轮枝拟青霉发酵菌丝体中的虫草菌素,HPLC法测定提取液中的虫草素含量,在单因素试验的基础上,用正交试验进行工艺参数的优化。优选出的最佳提取工艺为蒸馏水40mL,固液比1∶200,中火(P50)处理3min。在此最佳条件下,轮枝拟青霉中虫草素含量为3.247mg/g,工艺简便可行。

响应面法优化黑曲霉产抗菌物质的发酵培养基

以抑菌圈直径为响应值,采用响应面法对黑曲霉（Aspergillus niger）xj产抗菌物质的发酵培养基进行优化.首先通过单因素试验确定最适碳源和氮源分别为麦芽糖和麦麸,并初步考察了麦芽糖、麦麸、无机盐、生长因子及表面活性剂的最适添加量.通过Plackett-Burman设计筛选出影响抗菌物质活力的显著因素：无水硫酸镁、氯化钙和吐温-80.最后通过中心复合设计及响应面分析确定产抗菌物质的的最优发酵培养基组分为麦芽糖30.00g/L、麦麸7.50g/L、酵母膏1.00g/L、磷酸氢二钾1.00g/L、无水硫酸镁0.2982g/L、吐温-80 0.24mL/L、微量元素液2.00mL/L、氯化钾0.50g/L.采用滤纸片扩散法检测优化后的发酵液抗菌活性,抑菌圈直径为（27.26±0.41）mm,比未经优化测得的抑菌圈直径提高了83％.

黑曲霉单孢子株的分离及其性状

对黑曲霉xj菌株进行单孢子分离,获得8个单孢子株,分别记为xj-1、xj-2、xj-3、xj-4、xj-5、xj-6、xj-7、xj-8。再对其菌落生长情况、产孢量、分生孢子的萌发率、抑制活性进行综合比较。结果表明:xj-5为优势单孢子株,其继代培养后遗传性状较为稳定;所产生的抑菌圈直径[(20.13±0.09)mm]高于对照xj菌株[(18.28±0.21)mm]。

两相培养用于提高植物次生代谢物产量的研究进展

论述了两相培养的原理,及运用两相培养来提高次生代谢产物所取得的一些成果,对两相培养今后的研究发展进行了展望。

黑曲霉发酵液中脂肪酸化学成分的研究

目的:分析黑曲霉(Aspergillus niger x)j发酵液中的脂肪酸成分。方法:液体发酵培养黑曲霉(Aspergillus niger x)j,发酵液通过石油醚萃取,硅胶柱层析,石油醚-乙酸乙酯洗脱,得到的脂肪酸经甲酯化处理,通过气相色谱-质谱联用技术对其进行鉴定。结果:鉴定出4种脂肪酸成分。结论:黑曲霉(Aspergillus niger x)j发酵液中的脂肪酸成分主要为亚油酸、6-十八碳烯酸、14-甲基十五烷酸和硬脂酸。

两相法提高轮枝拟青霉中虫草菌素含量的研究

以轮枝拟青霉(Paecilomyces verticillatus GZ)为材料,分别考察油酸和邻苯二甲酸二丁酯添加量以及添加时间对轮枝拟青霉产虫草菌素的影响。结果表明,接种GZ的同时添加6%(V/V)油酸,虫草菌素产量达到71.33(±2.61)mg/L,比对照组提高44%;接种GZ的同时添加6%(V/V)邻苯二甲酸二丁酯,虫草菌素产量达到59.21(±2.50)mg/L,比对照组提高20%。此法为简化虫草菌素的下游提取工艺提供了依据。

发酵成分对轮枝拟青霉中虫草菌素含量的影响

以轮枝拟青霉(Paecilomyces verticillatus GZ)为材料,通过单因素、正交实验考察不同的发酵成分对提高GZ高产虫草菌素的条件,通过发酵动力学考察GZ菌株的收菌时间。结果表明:以白砂糖2%、麦芽糖1%、牛肉膏3%、酵母膏2%为发酵培养基,140r/min,26℃,摇瓶培养7d,虫草菌素产量为(69.1±0.921)mg/L。

几种有机溶剂对轮枝拟青霉产虫草菌素的影响

以轮枝拟青霉(Paecilomyces verticillatus)GZ为材料,通过对两相培养体系中有机相的考察,找到能够较大幅度提高虫草菌素产量的有机相。结果显示:从6种有机溶剂中筛选出十六烷,将十六烷以8%(v/v)的浓度添加到培养基中,接种GZ,26℃下140r/min摇瓶培养7d,虫草菌素产量达到(116.78±7.81)mg/L,比未添加有机相的对照组提高224%。

探析柔性思维在小学班主任管理工作中的应用

随着我国素质教育改革的不断深入,班主任对于班级的管理工作也成为社会关注的热点,将柔性工作引进班级管理工作,能够有效促进班级管理工作与管理方式朝多元化方向发展,也能在确保学生主体地位的基础上,提高学生管理工作的落实性以及班主任管理工作的社会价值性。提出柔性思维的概念、特征及在班级管理工作中的有效运用,必将对班主任的管理工作提供些许帮助。

成就感 参与感 荣誉感

“小班化”教学日渐成为当前小学教学的潮流,也是农村教学的总体发展趋势所在。如何根据农村的教学基础状况,结合农村学生的学习习惯进行分析,对于教师而言是一项艰巨而有意义的教学任务。教师需要在充分了解农村学生的学习生活情况的基础上,展开深入的分析,并以此进行农村小学“小班化”课堂教学的教学探索活动。

黑曲霉菌丝体抗菌活性及石油醚部分化学成分

目的:对黑曲霉Aspergillus niger xj抗菌活性及化学成分进行研究以筛选天然抗菌药物。方法:采用滤纸片扩散法对黑曲霉菌丝体石油醚、醋酸乙酯和水提取物进行抗菌活性测定,并对石油醚部位活性部位进行硅胶柱色谱,甲酯化,通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对其化学成分进行分析。结果:菌丝体石油醚部分具有一定抗菌活性,从中鉴定出10个化合物。结论:黑曲霉菌丝体的石油醚部分存在抗菌活性物质,其化学成分以脂肪酸占较大比例。

HPLC测定轮枝拟青霉菌丝体中虫草菌素含量

目的:建立轮枝拟青霉菌Paecilomyces verticillatus发酵菌丝体中虫草菌素含量测定的反相高效液相色谱方法。方法:样品用20%乙醇超声提取,采用Spheriorb C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以0.02 mol·L-1乙酸铵-甲醇(85∶15)为流动相,柱温30℃,流量1 mL·min,检测波长260 nm。结果:在上述色谱条件下,虫草菌素回收率为94.0%～98.3%,RSD为0.98%,最低检出浓度为0.01 mg·kg-1。测得菌丝体中虫草菌素含量为3.12 mg·kg-1。结论:方法简便、快速、分离效果好、准确可靠,可作为发酵生产中虫草菌素的质量控制监测手段。