中国毛虾酶解工艺优化及其酶解条件对风味的影响

【目的】筛选一种可直接使用、效果明显的蛋白酶酶解中国毛虾(Acetes chinensis),并分析不同酶解条件变化对风味的影响,以达到不需控制pH值且可降低工艺成本、改善风味效果,为毛虾酶解方面的利用提供理论依据。【方法】以福林-酚法、甲醛滴定法筛选酶活力最优的蛋白酶,以氨基酸态氮(AAN)质量分数、水解度(DH)、感官评分为指标进行工艺单因素实验,并利用正交实验法[L9(34)]优化酶解工艺。借助气象色谱-离子迁移谱仪(GCIMS)结合OPLS-DA法分析其单因数实验过程挥发性物质变化。【结果与结论】维持毛虾原始pH值条件下,碱性蛋白酶活力为28 435 U/g,确定为最适酶,最佳工艺为55℃、4 h、加水量20%、加酶量0.8%(227.48 U/g),所得毛虾AAN质量分数为1.11 g/100 g。GC-IMS结果表明,酶解过程显著改变毛虾气味表现,时间、温度的梯度变化是毛虾酶解液气味差异化的主要原因。其中变量投影重要性因子分析表明,温度主要影响醛类、醇类变化,时间主要影响酯类、酮类变化,加酶量、加水量主要影响醇类变化。结果表明,碱性蛋白酶酶解毛虾效果明显,工艺简单,其对酶解液风味改善作用显著。

产胞外多糖海洋乳酸菌的筛选及其多糖发酵工艺优化

【目的】筛选产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的海洋乳酸菌,优化产EPS的发酵工艺,为海洋源乳酸菌胞外多糖的开发利用提供参考。【方法】通过菌落观察、革兰染色、接触酶检验,从湛江沿海的海水、海泥、红树林土壤及鱼肠中初步分离乳酸菌;利用菌落拉丝法结合多糖产量筛选出产EPS的乳酸菌;对EPS产量最高的菌株进行16S rDNA鉴定;以DPPH自由基清除率和总还原力为判据初步评估EPS的抗氧化能力;采用单因素及正交实验得到该菌株产EPS的最佳条件。【结果与结论】共筛出4株产EPS的乳酸菌,分别命名为LAN4、LAH5、LAF1和LAY1。其中以菌株LAN4的EPS产量最高,为(94.63±5.86)mg/L。经16S rDNA鉴定,LAN4为发酵黏液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)。5 mg/mL的LAN4 EPS可清除50.02%的DPPH自由基,总还原力相当于224.74μg/mL的维生素C。菌株LAN4产EPS的最佳培养条件为:葡萄糖添加量30 g/L,酵母蛋白胨添加量40 g/L,发酵时间16 h,发酵温度41℃,在此条件下培养LAN4菌株EPS的产量为(307.53±26.78)mg/L。

产细菌素海洋乳酸菌的筛选及细菌素抑菌机制

【目的】筛选海洋源产细菌素乳酸菌,探讨细菌素抑菌机制。【方法】从市售海鱼的肠道中筛选出一株对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠埃希菌(Escherichia coli)有较强抑菌效果的菌株GOFEL226,通过16S rDNA序列鉴定乳酸菌,用乙酸乙酯提取细菌素,利用分光光度法、电导率法、扫描电镜技术探究细菌素的抑菌机制。【结果】菌株GOFEL226为戊糖乳植物杆菌(Lactiplantibacillus pentosus),GFEB226细菌素对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的最小抑菌质量浓度为0.883 mg/mL;其对指示菌的生长有明显的抑制作用,可导致细胞的蛋白质、核苷酸、带电离子泄漏到细胞外,对细胞膜具有破坏作用。【结论】GFEB226细菌素可通过破坏革兰阳性和革兰阴性菌的细胞膜,使其胞内物质泄漏到胞外,进而导致细胞的死亡。

脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应和机理

研究脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应和机理,为脂肽协同茶多酚应用于副溶血弧菌的控制提供理论依据。利用"棋盘法"研究脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应;通过研究脂肽和茶多酚独立作用及协同作用对细胞膜完整性、细胞蛋白质合成及磷代谢方面影响来研究二者的协同抑菌机理。结果表明:脂肽和茶多酚对副溶血弧菌存在强烈的协同抑菌效应,部分抑菌浓度指数达到0.19;与1/16最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)脂肽或1/8 MIC茶多酚各自独立作用相比,在1/16 MIC脂肽和1/8 MIC茶多酚协同作用下,副溶血弧菌的细胞膜通透性显著增强,细胞部分蛋白质合成的抑制作用得到进一步加强,并且细胞的磷代谢完全受到抑制。结果表明,脂肽和茶多酚对副溶血弧菌具有强烈的协同抑菌效应,其协同抑菌作用主要通过二者协同破坏细胞膜的完整性,从而影响细胞部分蛋白质的合成与正常代谢实现的。

纳豆菌抗菌脂肽对副溶血弧菌的抑菌机理

目的:对纳豆菌抗菌脂肽抑制副溶血弧菌的抑菌机理进行探讨。方法:通过纳豆菌抗菌脂肽对副溶血弧菌生长曲线、细胞超微结构、细胞膜通透性、细胞DNA的作用、细胞蛋白的合成、细胞代谢的影响等方面的研究,探讨纳豆菌抗菌脂肽抑制副溶血弧菌的机理。结果:抗菌脂肽可以使副溶血弧菌细胞膜通透性增加,使得细胞内具有紫外吸收的大分子物质泄漏到细胞外;扫描电镜结果表明抗菌脂肽可以导致副溶血弧菌细胞壁破裂或形成孔洞;抗菌脂肽能够和副溶血弧菌DNA体外结合,导致DNA最大吸收峰发生了轻微的蓝移,且产生增色效应;SDS-PAGE分析表明抗菌脂肽对副溶血弧菌蛋白表达未见有明显影响;当抗菌脂肽的质量浓度达到0.6 MIC以上时,其对副溶血弧菌代谢活力的抑制作用显著。结论:纳豆菌抗菌脂肽可使副溶血弧菌的细胞膜通透性增加,或形成孔洞导致细胞内一些物质泄漏,使细胞生长受到抑制,进而导致死亡。

纳豆菌脂肽对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究

【目的】研究纳豆菌脂肽对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。【方法】通过对金黄色葡萄球菌生长曲线、细胞膜通透性、细胞蛋白的合成、细胞超微结构、细胞代谢的影响等方面的研究,探讨纳豆菌脂肽对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。【结果】脂肽可以使金黄色葡萄球菌的细胞膜通透性增加,使得具有紫外吸收的大分子物质发生泄漏;可以导致金黄色葡萄球菌细胞壁形成孔洞甚至使细胞断裂;脂肽对金黄色葡萄球菌蛋白表达未见有明显影响,但可抑制部分蛋白质的合成;对金黄色葡萄球菌代谢活力有较强的抑制作用。【结论】纳豆菌脂肽可使金黄色葡萄球菌细胞膜通透性增加,或细胞膜形成孔洞导致细胞内物质泄漏,使细胞生长受到抑制,进而导致死亡。

纳豆菌脂肽对分离于对虾养殖环境中产T-2毒素镰孢菌抑制效应的研究

为了探明纳豆菌脂肽对对虾养殖环境中的产T-2毒素镰孢菌分离株的控制效应,实验采用扫描电镜观察了镰孢菌孢子超微结构、普通显微镜观察了菌丝形态、荧光显微镜观察了菌丝通透性。结果显示,脂肽浓度为1 mg/mL时,脂肽对镰孢菌孢子萌发的抑制率达78.8%,镰孢菌培养到第3天的生物量为不加脂肽对照的24.5%。扫描电镜观察结果表明,1 mg/mL的脂肽可以使镰孢菌的孢子呈念珠状;普通显微镜观察结果显示,1 mg/mL脂肽处理能使菌丝隔膜消失;荧光显微镜观察结果表明,脂肽能增加镰孢菌菌丝细胞膜的通透性。

耐高温蛋白酶产生菌的筛选及酶学特性的初步研究

为了提供可用于水产饲料添加剂用途的蛋白酶,从玛珥湖环境中筛选出耐高温蛋白酶产生菌株。通过牛奶平板筛选的方法从土壤中分离获得30株产蛋白酶菌株,并通过摇瓶发酵复筛的方法筛选产酶最高的菌株HL-3,其发酵液的蛋白酶活性高达399.2 U/m L。通过生理生化特征鉴定、16S r DNA基因序列和系统发育分析,初步鉴定菌株HL-3为地衣芽孢杆菌。菌株HL-3所产蛋白酶的最适作用温度为70℃,最适p H为7.0,在90℃保温10 min后酶活力仍可保留75.12%。在离子浓度为1.0×10^(-3)mol/L时,Cu^(2+)和Mn^(2+)对该酶有较强的抑制作用,Fe^(2+)、Zn^(2+)、Ca^(2+)对该酶有激活作用,Mg^(2+)和K^+对该酶活性几乎没有影响。预期该菌株产的蛋白酶具有用于水产饲料添加剂的潜力。

木聚糖酶高产菌株的选育及其产酶条件的研究

以木聚糖酶酶活为20000U/g的黑曲霉P14为出发菌株,通过离子注入诱变,得到产木聚糖酶酶活32000U/g的菌株L15。在优化的发酵培养基:麸皮14g,玉米芯6g,豆粕1g,硝酸铵0.2g,KH2PO40.1g,水36mL中菌株L15产木聚糖酶酶活达52500U/g。

基于突显海洋水产特色的食品微生物学课程教学改革与实践

结合食品微生物学课程的教学实践,通过精选教学内容、改进教学方法及参观实践教学基地等措施,探讨了食品微生物学课程的教学改革。

苎麻酶法脱胶的研究

用果胶酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶进行苎麻酶法脱胶,分别进行每种酶的单一酶脱胶和3种酶联合脱胶实验,研究这3种酶对脱胶的作用。

发酵法生产大豆肽的研究

通过对培养基组成、pH值、接种时间、接种量、发酵时间等因素的研究,优化了发酵法制备大豆多肽的生产工艺。结果表明:在葡萄糖含量为2%,豆粕含量为12%,初始pH值为6.5,接入4%的菌龄为15h的液体种子,发酵时间为48h的条件下,豆粕蛋白的水解度达60%。

加酶提高发酵豆粕蛋白质水解度的研究

[目的]在枯草芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌这3种菌混合发酵生产发酵豆粕的基础上,通过添加酶来提高发酵豆粕的水解度。[方法]通过添加中性蛋白酶、酸性蛋白酶和纤维素酶进行单因子试验和正交试验优化。[结果]结果表明,最佳加酶条件为中性蛋白酶加酶量为20U/g,酸性蛋白酶加酶量为20U/g,纤维素酶加酶量为6U/g;并且在此加酶优化条件下,发酵豆粕的水解度由优化前的9.32%增加到19.65%。[结论]添加中性蛋白酶、酸性蛋白酶和纤维素酶能显著提高发酵豆粕蛋白质水解度。

响应面法建立脂肽对虾肉中假单胞菌抗菌活性的模型(英文)

本文研究了脂肽对虾肉中假单胞菌的抗菌活性模型。通过二倍稀释法测定抗菌脂肽对假单胞菌的最小抑菌浓度为0.6mg/mL,并采用响应面实验建立了抗菌脂肽对虾肉中假单胞菌的抗菌活性模型。验证实验结果表明实验值与预测值之间的相关系数(R)为0.998,这说明该模型的方程是准确的。通过分析该模型方程的响应面曲线和等高线可以得到,当温度低于5.4℃、时间高于6 h、抗菌脂肽浓度超过0.3 mg/g时,虾肉中的假单胞的杀灭对数值可超过2。

微生物工程教学改革的探索和实践

结合"微生物工程"课程的教学实践,优化教学内容、改进教学方法以及加强实践教育等方面的改革措施,以期达到提高了教学质量、提升学生的综合素质和创新能力的目的。

金鲳鱼肠道中乳酸菌的分离筛选及发酵工艺的优化

本研究对金鲳鱼肠道中的乳酸菌进行分离筛选并对其发酵工艺进行优化和改良。利用含有1%碳酸钙的MRS固体培养基筛选出能够产生溶钙圈的菌株T2-B-3,通过革兰氏染色、接触酶试验、16S rDNA序列和系统发育树分析对T2-B-3进行鉴定,进行单因素实验并在此基础上进行正交试验改良其发酵工艺。经过鉴定,菌株T2-B-3为戊糖片球菌,并确定菌株的发酵工艺最优条件:发酵温度为37℃、初始pH为6.5、发酵时间为54h、葡萄糖添加量为2%、蛋白胨添加量为1%、接种量为1%。以上条件下,发酵液中乳酸菌活菌数为2.41×10^(8)CFU·mL^(-1),为优化前的1.35倍。本研究的结果对鱼养殖中益生菌制剂的开发具有一定的参考价值。

食品微生物学课堂教学改革与实践

结合食品微生物学课程的课堂教学实践,介绍了从教学内容、教学方法和教学手段这3个方面进行改革,取得了较好的教学效果。

发酵工程实验教学改革尝试

在发酵工程实验教学中,通过精心选择实验内容,实行开放式实验教学,完善实验教学管理和改革考核方式,提高了教学效果。

发酵法生产乳蛋白肽的研究

研究了利用枯草芽孢杆菌进行发酵法生产乳蛋白肽的的影响因素,包括碳源、氮源、接种时间、接种量和发酵时间。通过单因子实验和正交实验优化,确定了最佳发酵条件:1.5%的蔗糖,9%的脱脂奶粉(均为质量分数)、接种时间为16 h,接种量为3%,发酵时间为43 h;并且在此发酵条件下,乳蛋白的水解度达35.9%。

枯草芽孢杆菌固态发酵工艺研究

对枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)的固态发酵工艺进行了研究,包括碳源、氮源、含水量、初始pH、接种时间、接种量等影响因素,并通过单因子试验和正交试验优化,确定了枯草芽孢杆菌的固态发酵工艺为:(1)培养基:麸皮19.5 g,稻谷壳0.5 g,豆粕1.0 g,水22 mL;(2)发酵条件:初始pH为7.0、接种时间20 h,接种量为0.9 mL。照此工艺发酵,枯草芽孢杆菌的活菌数高达435亿个/g。