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蛋白激酶与蛋白磷酸酶在细胞增殖分化中的机制研究 被引量:15
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作者 刘善荣 刘厚奇 +3 位作者 戚中田 赵兰娟 王凤玫 冯根生 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期550-552,共3页
细胞生长发育和癌变过程中有众多复杂的信号转导途径以及信号分子参与,其中最基本的生化反应过程是系列蛋白质(信号分子)的磷酸化.
关键词 蛋白激酶 蛋白磷酸酶 细胞增殖 细胞分化
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大鼠全脑缺血再灌注后海马区细胞凋亡及bcl-2和Bax的检测 被引量:14
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作者 刘善荣 孟璘 +1 位作者 刘厚奇 向正华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第7期435-437,F003,共4页
目的:证实缺血性脑损伤主要是以细胞凋亡的方式发生。方法:用TUNEL法标记检测损伤的神经细胞,用原位杂交组织化学法检测bcl-2mRNA,用免疫组织化学法检测Bax蛋白。结果:手术组检测到TUNEL标记的阳性神经细胞... 目的:证实缺血性脑损伤主要是以细胞凋亡的方式发生。方法:用TUNEL法标记检测损伤的神经细胞,用原位杂交组织化学法检测bcl-2mRNA,用免疫组织化学法检测Bax蛋白。结果:手术组检测到TUNEL标记的阳性神经细胞主要位于海马CA1区,渐进性增多,第3天达到高峰,可检测到凋亡小体和正在形成凋亡小体的神经细胞。bcl-2主要在海马CA3区表达,Bax则主要在CA1区表达,两者均于再灌注8h出现,24h阳性信号达到高峰,72h明显下降。结论:细胞凋亡是大鼠全脑缺血后海马区神经元丢失的重要原因,大鼠全脑缺血再灌注后海马区bcl-2和Bax的区域性表达可能参与海马不同区域缺血耐受性差异的形成。 展开更多
关键词 脑缺血 海马 再灌注损伤 细胞凋亡 BCL-2 BAX
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人胚胎生殖系细胞分离与体外培养的初步研究 被引量:8
3
作者 刘善荣 刘厚奇 +5 位作者 汤淑萍 惠宁 冀凯宏 熊俊 蒋正 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期941-943,共3页
目的 :初步探讨人胚胎生殖系细胞的分离与体外培养。 方法 :体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织 ,按单纯机械分离、酶消化分离、二者结合法及是否有饲养层将组织分为 5种不同的方式培养后 ,用碱性磷酸酶标记 ,计数阳性克隆并进行比较。 ... 目的 :初步探讨人胚胎生殖系细胞的分离与体外培养。 方法 :体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织 ,按单纯机械分离、酶消化分离、二者结合法及是否有饲养层将组织分为 5种不同的方式培养后 ,用碱性磷酸酶标记 ,计数阳性克隆并进行比较。 结果 :酶消化法培养所获得的克隆较单纯机械分离方法多 ,原代培养时种植到饲养层上效果较好。将分离到的组织用0 .2 5 %胰酶消化 3min ,种植到丝裂霉素C处理过的小鼠胚胎成纤维细胞上培养 3d ,挑取克隆传代 ,在第 1 0天形成 30 .7个阳性克隆 ,显著高于其他方法获得的阳性克隆数。用碱性磷酸酶标记的细胞 (克隆 )具有多样性 ,细胞胞体为圆形 ,分为有突起和无突起两种 ;阳性细胞克隆呈圆球形、条带形和块形 ,与周围细胞分界清楚。 结论 :人胚胎体内的微环境限制生殖系细胞的体外扩增培养 。 展开更多
关键词 胚胎 生殖系细胞 细胞分离 体外培养 碱性磷酸酶
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不同发育阶段人胚胎原始生殖细胞的定位及体外培养 被引量:4
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作者 刘善荣 刘厚奇 +5 位作者 汤淑萍 惠宁 冀凯宏 蒋正 戚中田 冯根生 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期944-946,共3页
目的 :对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞 (PGC)进行定位并比较其体外培养的差异。 方法 :取 4~ 7周发育阶段的人胚胎 ,应用组织化学法检测PGC内碱性磷酸酶 (AP)以对其定位。体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织进行培养 ,第 1次传代... 目的 :对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞 (PGC)进行定位并比较其体外培养的差异。 方法 :取 4~ 7周发育阶段的人胚胎 ,应用组织化学法检测PGC内碱性磷酸酶 (AP)以对其定位。体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织进行培养 ,第 1次传代后 ,用AP标记 ,计数不同发育阶段AP阳性的PGC和体外培养的阳性克隆并进行比较。 结果 :在卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处有AP强阳性细胞 ,阳性信号位于胞质内。阳性细胞散在分布 ,在生殖嵴处聚集成团。不同发育阶段的胚胎组织培养均有阳性克隆出现。统计学分析结果表明 ,4~ 7周人胚胎内AP阳性的PGC数目及细胞内信号强度无明显差异(P >0 .0 5 ) ;由胚胎组织培养获得的AP阳性克隆数也无显著差异。 结论 :人PGC位于卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处。 4~ 7周发育阶段 。 展开更多
关键词 胚胎 原始生殖细胞 定位 体外培养 碱性磷酸酶 组织化学法
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大鼠全脑缺血再灌后海马区bcl-2和Bax表达的检测 被引量:5
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作者 刘善荣 刘厚奇 +1 位作者 向正华 孟璘 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期381-384,共4页
目的:检测 bcl-2和 Bax在大鼠全脑缺血再灌后海马区的表达。方法:用原位杂交组织化学检测 bcl-2 mR-NA,用免疫组织化学检测Bax蛋白。结果:bcl-2主要在海马CA3区表达,再灌8小时出现,24小时阳性信... 目的:检测 bcl-2和 Bax在大鼠全脑缺血再灌后海马区的表达。方法:用原位杂交组织化学检测 bcl-2 mR-NA,用免疫组织化学检测Bax蛋白。结果:bcl-2主要在海马CA3区表达,再灌8小时出现,24小时阳性信号达到高峰,72小时明显下降;Bax则主要在CA1区表达,再灌8小时出现,24小时阳性信号达到高峰,72小时明显下降,CA2、CA4、DG区也有表达,但变化不明显。高倍镜下可见紫蓝色的阳性信号和棕黄色阳性信号位于胞浆和突起中,细胞核处淡染。结论:大鼠全脑缺血再灌后海马区 Bax和 bcl-2的区域性表达与缺血性损伤有一定的关系,可能参与海马不同区域缺血耐受性差异的形成。 展开更多
关键词 脑缺血 延迟性损伤 再灌注损伤 海马 BCL-2 BAX
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大鼠暂时性全脑缺血再灌后海马区凋亡检测 被引量:11
6
作者 刘善荣 孟琳 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期206-209,共4页
目的:检测四血管阻塞大鼠全脑缺血20分钟再灌后不同时间点海马区凋亡细胞.方法:TUNEL法标记,常规光镜观察.结果:再灌后第一天没有明显的阳性细胞,第二天出现散在的阳性细胞,主要位于海马的h1区;第三天阳性细胞分布范围扩至最大,见于海马... 目的:检测四血管阻塞大鼠全脑缺血20分钟再灌后不同时间点海马区凋亡细胞.方法:TUNEL法标记,常规光镜观察.结果:再灌后第一天没有明显的阳性细胞,第二天出现散在的阳性细胞,主要位于海马的h1区;第三天阳性细胞分布范围扩至最大,见于海马的pm区、h1区、h2区、h3~5区.但密度稍低,尤其是h2区;第四天阳性细胞达到高峰,第七天阳性细胞明显减少,仅见于pm区、h1区的前中2/3.TUNEL标记阳性的细胞以锥状神经元为主,主要位于海马h1区.高倍光镜显示阳性细胞呈坏死和凋亡两种状态.凋亡的阳性信号存在于核内、胞体和/或突起中.结论:实验提示大鼠全脑缺血再灌后海马区出现的延迟性缺血性损伤是由凋亡作为主要机制参与的神经元死亡方式,且以海马h1区锥状神经元为主. 展开更多
关键词 脑缺血 再灌注损伤 海马区 细胞凋亡
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人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文) 被引量:1
7
作者 刘善荣 王庆敏 +5 位作者 杨玲 汤淑萍 惠宁 蒋正 戚中田 刘厚奇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期937-940,共4页
目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。 方法 :取 4~ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫... 目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。 方法 :取 4~ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导使该基因在k80 2菌中表达。 结果 :用PCR方法扩增获得大小约 1 .1kb条带 ;全自动测序与GenBank中登录的序列 97%同源。获得了pGEX5T Oct4重组子并在k80 2菌中获得了表达 ,SDS PAGE分析有一特异性的 6 2 0 0 0条带。 结论 :扩增和克隆了人胚生殖系细胞多能性调节蛋白Oct4全长cDNA并在大肠杆菌中获得表达 。 展开更多
关键词 人胚生殖嵴干细胞 多能性调节基因 OCT4 克隆 基因克隆 基因表达
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Oct4调节胚胎干细胞全能性扩增的研究进展 被引量:1
8
作者 刘善荣 刘厚奇 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期963-965,共3页
Oct4是一种POU转录因子 ,属于Ⅴ类POU蛋白 ,在小鼠全能胚胎干细胞和生殖系干细胞表达。在早期鼠胚中 ,只有在ICM变成滋养层阶段 ,Oct4为维持其全能表型而发挥作用。Oct4表达可能是由位置效应引起的 ,还与特异调节Oct4活性的元件 ,如近... Oct4是一种POU转录因子 ,属于Ⅴ类POU蛋白 ,在小鼠全能胚胎干细胞和生殖系干细胞表达。在早期鼠胚中 ,只有在ICM变成滋养层阶段 ,Oct4为维持其全能表型而发挥作用。Oct4表达可能是由位置效应引起的 ,还与特异调节Oct4活性的元件 ,如近端、远端增强子元件有关。Oct4对转录的调节分为抑制转录和转录激活两种。Oct4的激活有 3种模式 :远端依赖性共激活 ,构象依赖性共激活 。 展开更多
关键词 OCT4 胚胎干细胞 全能性扩增 研究进展
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哺乳动物生殖细胞的形成、性分化和永生化
9
作者 刘善荣 胡凯猛 +1 位作者 刘厚奇 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期960-962,共3页
小鼠原始生殖细胞产生于原肠胚形成阶段 ,迁移到生殖嵴位置后获得性别分化决定。体外培养时原始生殖细胞可大量增殖 ,现在已经建立了人类EG细胞株 ,这些永生的EG细胞具有正常的核型和多向分化能力 ,它可分化为某些特定的细胞类型 。
关键词 原始生殖细胞 哺乳动物 生殖细胞 形成 性分化 永生化
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组织胚胎学《泌尿系统》授课模式改革
10
作者 刘善荣 刘厚奇 +1 位作者 杨玲 吴少戎 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期515-516,共2页
目前全国高等院校正在大力进行教育改革,素质教育将最终取代应试教育.所谓素质教育,简而言之,就是以提高学生的学习能力(会学习)、处世能力(会生活)、创新能力(会创造)为目的的一种教育模式,这同过去"填鸭式"教育方式是截然... 目前全国高等院校正在大力进行教育改革,素质教育将最终取代应试教育.所谓素质教育,简而言之,就是以提高学生的学习能力(会学习)、处世能力(会生活)、创新能力(会创造)为目的的一种教育模式,这同过去"填鸭式"教育方式是截然不同的.为了全面提高学生的各项能力,我们在组织胚胎学授课过程中做了不懈的努力. 展开更多
关键词 组织胚胎学 《泌尿系统》 授课模式 改革 医学教育
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人胚胎原始生殖细胞的定位与体外分离培养的初步研究
11
作者 刘善荣 刘厚奇 +5 位作者 汤淑萍 惠宁 冀凯宏 蒋正 戚中田 冯根生 《解剖科学进展》 CAS 2004年第B08期39-39,共1页
目的:对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞进行定位并比较其体外培养的差异,探讨不同分离方法对人胚胎生殖系细胞体外培养的影响。方法:取4~8周发育阶段的人胚胎,利用组织化学法通过检测原始生殖细胞内碱性磷酸酶及其定位。体外分... 目的:对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞进行定位并比较其体外培养的差异,探讨不同分离方法对人胚胎生殖系细胞体外培养的影响。方法:取4~8周发育阶段的人胚胎,利用组织化学法通过检测原始生殖细胞内碱性磷酸酶及其定位。体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织培养,第一次传代后,用碱性磷酸酶标记。 展开更多
关键词 人胚胎 原始生殖细胞 碱性磷酸酶 体外分离 组织化学法 生殖系 肠系膜 胎生 发育阶段 初步研究
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胸腺嘧啶激酶/丙氧鸟苷体外杀伤携带胸腺嘧啶激酶基因的C6胶质瘤细胞时细胞凋亡的检测
12
作者 刘善荣 刘淑琴 +5 位作者 刘厚奇 汤淑萍 向正华 胡世杰 王巨 朱诚 《解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第3期195-198,共4页
目的:检测胸腺嘧啶激酶基因转染C6胶质瘤细胞后用丙氧鸟苷处理时细胞凋亡的发生。方法:用脂质体介导的基因转染将单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶基因转入C6胶质瘤细胞中,用G418筛选,建立稳定表达胸腺嘧啶激酶的C6细胞株;加入丙氧鸟苷作用不... 目的:检测胸腺嘧啶激酶基因转染C6胶质瘤细胞后用丙氧鸟苷处理时细胞凋亡的发生。方法:用脂质体介导的基因转染将单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶基因转入C6胶质瘤细胞中,用G418筛选,建立稳定表达胸腺嘧啶激酶的C6细胞株;加入丙氧鸟苷作用不同时间,用原位末端标记、透射电镜和DNA凝胶电泳法检测。结果:用丙氧鸟苷作用72h发现有大量原位末端标记阳性的细胞,阳性信号呈块状或半月形位于核膜内侧;透射电镜发现肿瘤细胞核内染色质呈块状或帽状位于核膜内侧,非染色质部分呈空泡状,细胞质有的固缩,细胞器基本保持完整;有的则高度肿胀,细胞内亚单位遭到破坏;DNA凝胶电泳发现用丙氧鸟苷作用72h细胞基因组DNA呈梯状带。结论:实验结果提示胸腺嘧啶激酶/丙氧鸟苷系统作用于表达胸腺嘧啶激酶的C6细胞时该细胞主要是以凋亡的方式死亡的。 展开更多
关键词 胶质瘤 胸腺嘧啶激酶 细胞凋亡
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人胚胎多能干细胞研究中的几个问题
13
作者 刘善荣 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期933-936,共4页
目前在人胚胎多能干细胞的研究中存在材料来源不足、培养体系复杂和自发性分化的问题。这 3个基本问题限制了人胚胎多能干细胞的基础和临床应用研究。要建立新的胚胎多能干细胞系应利用细胞核移植和细胞质重新编程功能建立新的途径 ,并... 目前在人胚胎多能干细胞的研究中存在材料来源不足、培养体系复杂和自发性分化的问题。这 3个基本问题限制了人胚胎多能干细胞的基础和临床应用研究。要建立新的胚胎多能干细胞系应利用细胞核移植和细胞质重新编程功能建立新的途径 ,并探讨其中的机制和可能的关键因子 ;干细胞培养时主要进行简化培养体系和抑制细胞分化的研究 ;对干细胞分化进行临床应用研究时 。 展开更多
关键词 胚胎 多能干细胞 研究 基础研究 临床应用
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大鼠脊髓压迫性损伤后神经细胞的死亡方式 被引量:16
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作者 傅强 侯铁胜 +3 位作者 刘善荣 肖建如 方健 鲁凯伍 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期557-559,共3页
目的:观察实验性脊髓损伤后神经细胞死亡方式。方法:应用凋亡细胞原位末端标记法、HE染色,对脊髓组织进行定量形态学分析。结果:在脊髓损伤区及相邻区域中发现少量神经元以及大量胶质细胞凋亡。结论:脊髓损伤后神经细胞的凋亡是... 目的:观察实验性脊髓损伤后神经细胞死亡方式。方法:应用凋亡细胞原位末端标记法、HE染色,对脊髓组织进行定量形态学分析。结果:在脊髓损伤区及相邻区域中发现少量神经元以及大量胶质细胞凋亡。结论:脊髓损伤后神经细胞的凋亡是继发损伤期的重要病理变化。 展开更多
关键词 神经元 脊髓损伤 细胞凋亡 实验模型
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真空采血管采血量对常用临床生化检验项目结果的影响 被引量:28
15
作者 汪怀周 方雯 +1 位作者 陈明坤 刘善荣 《检验医学》 CAS 2017年第2期94-98,共5页
目的研究采样量不达真空度要求的标本在进行19项生化项目检测时结果的可靠性。方法使用BD Vacutainer玻璃管和BD Vacutainer SSTⅡ分离胶管分别采集23位健康志愿者的血液标本,采血量达真空度要求为完全充满(5 m L),未达真空度要求为部... 目的研究采样量不达真空度要求的标本在进行19项生化项目检测时结果的可靠性。方法使用BD Vacutainer玻璃管和BD Vacutainer SSTⅡ分离胶管分别采集23位健康志愿者的血液标本,采血量达真空度要求为完全充满(5 m L),未达真空度要求为部分充满(2 m L),在采集2 h内离心获得血清用于检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、淀粉酶(AMY)、总胆红素(TB)、钙离子(Ca2+)、钾离子(K+)、肌酸激酶(CK)、肌酐(Cr)、葡萄糖(Glu)、乳酸脱氢酶(LDH)、白蛋白(Alb)、总蛋白(TP)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、无机磷(P)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)。以《临床生物化学检测常规项目分析质量指标》(WS/T403-2012)中允许总误差(TEa)的1/2评价采血量部分充满对检测结果的影响。结果使用玻璃管时,2种采样量之间ALT、ALP、AST、TB、CK、Cr和LDH的检测值差异有统计学意义(P<0.01);使用分离胶管时,2种采样量之间ALT、AST、TB、CK、Cr、Glu和LDH的检测值差异有统计学意义(P<0.01)。当以1/2TEa作为可接受的偏移时,只有LDH的检测结果偏移超出了范围。完全充满和部分充满的玻璃管LDH水平分别为(143.09±22.50)和(156.00±24.90)U/L,部分充满玻璃管LDH水平平均升高9.12%;完全充满和部分充满的分离胶管LDH水平分别为(153.74±25.94)和(173.22±26.58)U/L,部分充满分离胶管LDH平均升高13.05%,均大于允许的偏移(±5.5%)。结论应用真空采血管前应对其适用的采血量进行评估。采血量较少(≤2 m L)的玻璃管或分离胶管标本不适合做LDH检测。 展开更多
关键词 采血管 采血量 生化检验 分析前误差
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长链非编码RNA的研究进展 被引量:17
16
作者 高原 惠宁 刘善荣 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期790-794,共5页
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度超过200 nt(核苷酸单位)的功能性RNA分子,可在表观遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达,广泛参与机体的生理和病理过程。目前发现的参与哺乳动物基因活动的lncRNA... 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度超过200 nt(核苷酸单位)的功能性RNA分子,可在表观遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达,广泛参与机体的生理和病理过程。目前发现的参与哺乳动物基因活动的lncRNA已有上千个,但有关lncRNA的功能机制及其与疾病的关系尚不完全明了。本文就lncRNA的功能研究进展及lncRNA在临床疾病发生发展中的作用作一综述。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 表观遗传学 转录调控 转录后调控 基因组印记 X染色体失活
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电穿孔法转染人原代成纤维细胞条件的优化 被引量:7
17
作者 张放 周载鑫 +2 位作者 张丹丹 房贺 刘善荣 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1311-1314,共4页
目的通过优化电穿孔转染条件,探讨影响人原代成纤维细胞电转染效率和转染后细胞存活率的因素,筛选出人原代成纤维细胞的最佳电转染条件。方法通过改变脉冲电压、脉冲次数和质粒浓度等条件,将含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的质粒pEGF... 目的通过优化电穿孔转染条件,探讨影响人原代成纤维细胞电转染效率和转染后细胞存活率的因素,筛选出人原代成纤维细胞的最佳电转染条件。方法通过改变脉冲电压、脉冲次数和质粒浓度等条件,将含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的质粒pEGFP-N1电穿孔转染入人原代成纤维细胞。利用锥虫蓝染色检测细胞存活情况,采用流式细胞术检测转染24h后的转染效率。结果在低电压模式下,脉冲电压320V、质粒浓度为20μg/mL、脉冲1次时,人原代成纤维细胞的电转染效果最理想,转染效率达到(42.53±0.63)%,细胞存活率为(74.30±3.01)%。结论优化了人原代成纤维细胞的电转染条件,在保证细胞较高存活率的前提下提高了人原代成纤维细胞的电转染效率,为后续基因功能的研究打下基础。 展开更多
关键词 电穿孔 成纤维细胞 细胞存活 转染效率 脉冲
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白血病抑制因子受体中gp130细胞内区诱导白血病细胞Meg-01内c-myc的表达 被引量:5
18
作者 刘厚奇 汤淑萍 +2 位作者 刘善荣 胡世杰 傅继梁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期522-525,共4页
目的 :观察人白血病细胞系 Meg- 0 1白血病抑制因子 (L IF)受体α亚基 (gp190 )和另一亚基 gp130细胞内区与 c- m yc的关系 ,以探明白血病细胞过度增殖和晚期分化异常的机制。 方法 :用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体... 目的 :观察人白血病细胞系 Meg- 0 1白血病抑制因子 (L IF)受体α亚基 (gp190 )和另一亚基 gp130细胞内区与 c- m yc的关系 ,以探明白血病细胞过度增殖和晚期分化异常的机制。 方法 :用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体受体 (190 /130 ,130 /190 ) ,并分别在 Meg- 0 1表达 ,其与野生型受体竞争性结合 L IF,用免疫组化和蛋白质印迹法分析受体细胞内区形成同源性二聚体 (190 cyt- 190 cyt,130 cyt- 130 cyt)后的细胞状况和细胞内 c- m yc的表达。结果 :转染 p ED 190 /130后用 L IF作用 6 h,Meg- 0 1细胞 c- myc表达量增加 ,细胞增殖明显 ;而另一嵌合体受体对 Meg- 0 1细胞 c- myc的表达无影响。 结论 :L IF受体中 gp130亚基的细胞内区参与白血病 Meg- 0 1细胞内增殖信号的传递。 展开更多
关键词 白血病 抑制因子 免疫 受体 信号传导
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小鼠睾丸支持细胞的分离培养与鉴定 被引量:4
19
作者 杨君杰 刘善荣 +4 位作者 杨玲 王凤玫 任传路 胡凯猛 刘厚奇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期741-744,共4页
目的:分离培养小鼠睾丸支持细胞并进行鉴定。方法:取18~20d雄性小鼠的睾丸,酶消化法原代培养。用RT—PCR的方法克隆带有锌指结构域的支持细胞基因SERZ,与pcDNA3.0连接后构建重组质粒pcDNA3.0-SERZ。用KpnI和Xba1分别酶切质粒pcD... 目的:分离培养小鼠睾丸支持细胞并进行鉴定。方法:取18~20d雄性小鼠的睾丸,酶消化法原代培养。用RT—PCR的方法克隆带有锌指结构域的支持细胞基因SERZ,与pcDNA3.0连接后构建重组质粒pcDNA3.0-SERZ。用KpnI和Xba1分别酶切质粒pcDNA3.0-SERZ,获得线性化模板进而合成探针。原位杂交检测SERZ mRNA在培养细胞中的表达;用RT—PCR的方法检测雄激素结合蛋白(ABP)在支持细胞中的表达。结果:支持细胞多为多边形,核呈三角形或不规则形,染色浅,核仁明显,细胞完全铺开,成膜状,相邻细胞之间交织连接,细胞纯度为(85.1±2.5)%。SERZ mRNA在培养细胞的胞质中高水平表达。RT—PCR结果表明我们分离的支持细胞能够表达ABP mRNA。结论:我们成功分离和鉴定了小鼠睾丸支持细胞,纯度为(85.1±2.5)%。 展开更多
关键词 睾丸 支持细胞 细胞分离 SERZ 雄激素结合蛋白
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组织芯片检测肝癌组织中GATA4及甲胎蛋白的表达及二者相关性 被引量:5
20
作者 任传路 王一 +4 位作者 刘善荣 杨玲 王凤玫 仵敏娟 刘厚奇 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期497-499,共3页
目的:探讨转录因子GATA4和甲胎蛋白(AFP)在肝癌中的表达、意义及二者相关性。方法:应用免疫组化ABC法检测29个肝癌和37个癌旁组织组织芯片中GATA4和AFP的表达。结果:肝癌组织中GATA4和AFP的阳性率分别为96.5%和82.7%,GATA4主要在核表达... 目的:探讨转录因子GATA4和甲胎蛋白(AFP)在肝癌中的表达、意义及二者相关性。方法:应用免疫组化ABC法检测29个肝癌和37个癌旁组织组织芯片中GATA4和AFP的表达。结果:肝癌组织中GATA4和AFP的阳性率分别为96.5%和82.7%,GATA4主要在核表达,胞质也有表达;癌旁组织中GATA4和AFP的阳性率为分别为94.5%和78.3%,GATA4主要在胞质表达,胞核也有表达。而癌和癌旁组织中AFP均在胞质表达。癌和癌旁组织中GATA4和AFP表达既有相关性又有统计学差异。GATA4的表达,癌组织较癌旁组织高,低分化癌较高分化癌高。结论:GATA4和AFP均在肝癌和癌旁组织表达,二者相关性较好,但GATA4比较敏感。GATA4的转录活性与肝癌细胞的分化程度密切相关。 展开更多
关键词 组织芯片 肝肿瘤 GATA4 甲胎蛋白
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