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制备液相色谱技术
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作者 刘国诠 《生物工程进展》 CSCD 1990年第2期15-18,共4页
液相色谱技术的发明,可以追溯到本世纪初。俄国植物学家茨维特以填装碳酸钙粉末的玻璃柱,分离植物色素的经典实验。自50年代之后,气相色谱、液相色谱等迅速发展,各种型式的色谱方法,成了分离和分析的利器,在科学技术的众多领域中发挥着... 液相色谱技术的发明,可以追溯到本世纪初。俄国植物学家茨维特以填装碳酸钙粉末的玻璃柱,分离植物色素的经典实验。自50年代之后,气相色谱、液相色谱等迅速发展,各种型式的色谱方法,成了分离和分析的利器,在科学技术的众多领域中发挥着重要作用。自70年代以来,高效液相色谱得到了飞速发展。由于它具有高效、高检测灵敏度。 展开更多
关键词 生物技术 制备 液相色谱
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急性力竭运动对大鼠下丘脑氨基酸神经递质的影响 被引量:18
2
作者 张东明 张佳民 +4 位作者 马万云 陈瓞延 韩慧婉 舒鸿钧 刘国诠 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第2期230-233,共4页
用激光诱导荧光检测的高效毛细管电泳结合微透析技术测定急性力竭运动前后的大鼠下丘脑区细胞外液中的氨基酸神经递质的含量 .实验结果表明 ,急性力竭运动后大鼠下丘脑区的细胞外液中的 6种氨基酸 (精氨酸、甘氨酸、赖氨酸、谷氨酸、丙... 用激光诱导荧光检测的高效毛细管电泳结合微透析技术测定急性力竭运动前后的大鼠下丘脑区细胞外液中的氨基酸神经递质的含量 .实验结果表明 ,急性力竭运动后大鼠下丘脑区的细胞外液中的 6种氨基酸 (精氨酸、甘氨酸、赖氨酸、谷氨酸、丙氨酸、γ-氨基丁酸 )有统计意义的增加 。 展开更多
关键词 微透析 氨基酸神经递质 急性力竭运动 下丘脑 分析 激光诱导荧光检测 高效毛细管电泳
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一种分离抗凝血酶Ⅲ的高效亲和色谱填料的制备及表征 被引量:10
3
作者 赵莹歆 上官棣华 +1 位作者 赵睿 刘国诠 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第2期203-206,共4页
以聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球 ( PGMA)为基质 ,利用还原氨化方法将肝素键合在其表面上 ,得到一种以肝素为配基的高效亲和色谱填料 ,该填料对抗凝血酶 的亲和容量为 1 .2 mg/g,对抗凝血酶 和人血清白蛋白的回收率分别为 96.9%和 94 .4 ... 以聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球 ( PGMA)为基质 ,利用还原氨化方法将肝素键合在其表面上 ,得到一种以肝素为配基的高效亲和色谱填料 ,该填料对抗凝血酶 的亲和容量为 1 .2 mg/g,对抗凝血酶 和人血清白蛋白的回收率分别为 96.9%和 94 .4 % .利用前沿色谱法测定了肝素与抗凝血酶 之间的表观解离常数为 1 .96× 1 0 - 5mol/L. 展开更多
关键词 高效亲和色谱 肝素 抗凝血酶Ⅲ 填料 分离 制备 表征 纯化 聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球
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高效毛细管电泳-激光诱导荧光检测生物活性肽的研究 被引量:11
4
作者 熊少祥 韩慧婉 +4 位作者 赵睿 王光辉 马会民 陈义 刘国诠 《分析测试学报》 CAS CSCD 1999年第5期1-4,共4页
使用毛细管电泳 -激光诱导荧光 -增强型电荷耦合器件(CE -LIF -ICCD)系统 ,用异硫氰酸荧光素(FITC)柱前衍生了亮脑啡肽、甲硫脑啡肽、血管紧张肽、P物质4种生物活性肽 ,优化了实验条件 ,在8min内 ,对它们进行了快速分离检测 ,血管紧张... 使用毛细管电泳 -激光诱导荧光 -增强型电荷耦合器件(CE -LIF -ICCD)系统 ,用异硫氰酸荧光素(FITC)柱前衍生了亮脑啡肽、甲硫脑啡肽、血管紧张肽、P物质4种生物活性肽 ,优化了实验条件 ,在8min内 ,对它们进行了快速分离检测 ,血管紧张肽的质量检出限达到2.8×10-18 mol。 展开更多
关键词 生物活性肽 测定 CE LIF ICCD
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三甲氧基苄啶分子印迹整体柱的制备及色谱性能 被引量:15
5
作者 刘祥军 刘吉众 +2 位作者 赵睿 刘国诠 陈义 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1878-1880,共3页
A monolithic molecularly imprinted polymer(monolithic MIP) for trimethoprim(TMP) was prepared by in situ polymerization method as the HPLC stationary phase. Methacrylic acid(MAA) and ethylene glycol dimethacrylate(EDM... A monolithic molecularly imprinted polymer(monolithic MIP) for trimethoprim(TMP) was prepared by in situ polymerization method as the HPLC stationary phase. Methacrylic acid(MAA) and ethylene glycol dimethacrylate(EDMA) were used as functional monomer and cross-linker, respectively. The obtained MIP monoliths were characterized by high performance liquid chromatography and scanning electron microscope. The SEM analysis result clearly shows that many macropores and flow-through pores were embedded in the network skeleton of the TMP-imprinted monolith, which allowed the mobile phase to flow through the monolithic MIPs with a very low flow resistance. When the flow rate was high to 9.0 mL/min, the backpressure was only 11.1 MPa. Moreover, the imprinting factor was up to 10.3, which demonstrates that the obtained monolithic MIP showed a strong affinity and selectivity to the template molecule. 展开更多
关键词 分子印迹聚合物 整体柱 三甲氧基苄啶
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用毛细管电泳-激光诱导荧光-增强型电荷耦合检测器测定痕量氨基酸 被引量:11
6
作者 马明生 吴晓军 +2 位作者 刘利琳 韩慧婉 刘国诠 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1996年第9期1019-1023,共5页
本文对用毛细管电泳-激光诱导荧光-增强型电荷耦合检测器测定氨基酸衍生物进行了研究。考察了荧光黄异疏氰酸酯衍生氨基酸的各种条件。在优化条件下,10-8~10-6mol/L浓度范围内精氨酸与其衍生物的荧光强度呈良好的线性关系,最小... 本文对用毛细管电泳-激光诱导荧光-增强型电荷耦合检测器测定氨基酸衍生物进行了研究。考察了荧光黄异疏氰酸酯衍生氨基酸的各种条件。在优化条件下,10-8~10-6mol/L浓度范围内精氨酸与其衍生物的荧光强度呈良好的线性关系,最小可衍生化的精氨酸浓度为5×10-10mol/L。 展开更多
关键词 氨基酸 毛细管电泳 荧光 电荷耦合检测器
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改进遗传算法用于未知组分数的重叠色谱峰的解析 被引量:5
7
作者 余晓 王磊 +2 位作者 赵睿 上官棣华 刘国诠 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第9期1062-1065,共4页
按照指数修正的Gauss卷积色谱峰模型 ,构造了结合模拟退火及变长染色体的改进遗传算法 ,并结合爬山法 ,可以方便快捷地进行数目未知的重叠色谱峰的精确解析 ;此法成功地应用于大鼠脑微透析液氨基酸定量分析中 。
关键词 遗传算法 组分数 重叠色谱峰 色谱分析 微透析液 变长染色体 模拟退火 氨基酸
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水杨酸钠对大鼠下丘内谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响 被引量:13
8
作者 刘俊秀 马芙蓉 +4 位作者 李学佩 刘砚星 王磊 刘国诠 毛兰群 《中华耳科学杂志》 CSCD 2009年第3期212-215,共4页
目的探讨水杨酸钠诱导产生耳鸣动物模型时神经递质在其中枢发病机制中的作用。方法利用微透析技术,在活体清醒的状态下检测水杨酸钠诱导的耳鸣动物模型,研究水杨酸钠对听觉中枢核团下丘的神经递质谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响。结果腹腔注... 目的探讨水杨酸钠诱导产生耳鸣动物模型时神经递质在其中枢发病机制中的作用。方法利用微透析技术,在活体清醒的状态下检测水杨酸钠诱导的耳鸣动物模型,研究水杨酸钠对听觉中枢核团下丘的神经递质谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响。结果腹腔注射10%水杨酸钠(350mg/kg)引起下丘谷氨酸水平的显著性升高,最高达到基础值的236%±19%;γ-氨基丁酸水平显著性降低,最低达到基线水平的50%±12%。对照组(注射生理盐水)并未引起任何显著改变。结论微透析技术活体检测数据表明,下丘内谷氨酸水平的升高和γ-氨基丁酸水平的降低可能和耳鸣的产生有关。 展开更多
关键词 水杨酸钠 耳鸣 下丘 谷氨酸 Γ-氨基丁酸 微透析
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人血浆转甲状腺素蛋白的提纯及其对肝癌细胞生长的抑制作用 被引量:7
9
作者 李钧敏 田培坤 +4 位作者 蒋惠秋 万大方 顾健人 林启山 刘国诠 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第2期97-101,共5页
目的:在人原发性肝癌中,转甲状腺素蛋白(transthyretin,TFR)基因转录严重受阻遏.在原发性肝癌患者的血浆中,TTR含量明显降低.因此,有必要从人血浆中提取TTR,观察TIR对人肝癌细胞生长的抑制作用.方法:先用40%饱和硫酸铵,再用5%酚预沉淀... 目的:在人原发性肝癌中,转甲状腺素蛋白(transthyretin,TFR)基因转录严重受阻遏.在原发性肝癌患者的血浆中,TTR含量明显降低.因此,有必要从人血浆中提取TTR,观察TIR对人肝癌细胞生长的抑制作用.方法:先用40%饱和硫酸铵,再用5%酚预沉淀人血浆,采用DEAE-Cellulose离子交换层析提取TTR,所提蛋白经蛋白质印迹鉴定并于体外观察TTR对肝癌细胞生长的抑制作用.结果:从血浆中提取的TTR纯度为85%,经蛋白质印迹鉴定正确;体外实验初步证实,TTR对肝癌细胞的生长有明显抑制作用.结论:TTR对肝癌细胞的生长有明显抑制作用,这一性质为生物工程生产TTR,用于临床治疗,提供了可行性依据,从而在蛋白水平进一步证实TTR基因可能是与人肝癌相关的抑癌基因候选者. 展开更多
关键词 血浆 转甲状腺素蛋白 离子交换层析 肝癌
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杯芳烃涂层毛细管的制备与电泳性能考察 被引量:10
10
作者 王志欣 原虎山 +3 位作者 朱英 陈义 黄志镗 刘国诠 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第2期206-210,共5页
通过化学键合的方法制备杯芳烃涂层毛细管,并用几种苯酚取代物对其电泳性能进行了考察。结果表明,该涂层管具有特殊的分离选择性,良好的稳定性和较高的检测灵敏度等特点。
关键词 杯芳烃涂层管 毛细管电泳分离 电泳性能
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱研究(Ⅰ)──杯芳烃化合物 被引量:8
11
作者 熊少祥 辛斌 +1 位作者 王光辉 刘国诠 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期522-526,共5页
采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 ( MALDI-TOF-MS)对杯芳烃化合物进行了分析 .探讨了样品的制备条件、仪器操作参数等因素对测定结果的影响 .2 5种样品的质谱数据表明 ,利用 MALDI-TOF-MS可非常方便地得到灵敏度、分辨率、准确度... 采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 ( MALDI-TOF-MS)对杯芳烃化合物进行了分析 .探讨了样品的制备条件、仪器操作参数等因素对测定结果的影响 .2 5种样品的质谱数据表明 ,利用 MALDI-TOF-MS可非常方便地得到灵敏度、分辨率、准确度均较高 ,且易于识别和解析的质谱图 . 展开更多
关键词 杯芳烃 结构表征 MALDZ-TOF 质谱分析
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利用微透析技术对利多卡因治疗耳鸣作用机制的实验研究 被引量:9
12
作者 刘俊秀 李学佩 +2 位作者 董钰 韩慧婉 刘国诠 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第6期440-444,I005,共6页
目的 探讨利多卡因治疗耳鸣的神经递质学方面的机制。方法 利用微透析技术和微柱高效液相电化学检测方法研究利多卡因对耳鸣动物模型下丘和颞皮层 5 羟色胺 (5 hydroxytryptamine,5 HT)神经递质的影响。结果  2 6只白色Wistar大... 目的 探讨利多卡因治疗耳鸣的神经递质学方面的机制。方法 利用微透析技术和微柱高效液相电化学检测方法研究利多卡因对耳鸣动物模型下丘和颞皮层 5 羟色胺 (5 hydroxytryptamine,5 HT)神经递质的影响。结果  2 6只白色Wistar大鼠水杨酸钠造模耳鸣 ,显示下丘和颞皮层部位 5 HT的水平显著升高 ,分别在水杨酸钠腹腔注射 2h和 3h升高到基础值的 2 6 8%±2 7% ( x±s,以下同 )和 2 77%± 2 4 % ,通过局部脑组织灌流 ,利多卡因能显著性地降低下丘和颞皮层升高了的 5 HT的水平 ,分别降低至基础值的 85 %± 8%和 92 %± 2 6 %。结论 听觉中枢下丘和颞皮层这两个重要部位 5 HT水平的改变可能与利多卡因抑制耳鸣的机制有关。 展开更多
关键词 微透析技术 利多卡因 治疗 耳鸣 作用机制 实验研究 神经递质学
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微柱液相色谱-电化学法检测鼠纹状体单胺类物质的含量 被引量:4
13
作者 王磊 韩慧婉 +2 位作者 余晓 赵睿 刘国诠 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期1050-1052,共3页
Using microbore HPLC and electrochemical detection, A microdialysis HPLC assay system was built. After investigating the linear range, detection limit and reproducibility, this method was used to measure the concentra... Using microbore HPLC and electrochemical detection, A microdialysis HPLC assay system was built. After investigating the linear range, detection limit and reproducibility, this method was used to measure the concentrations of DA and monoamine metabolites in striatal microdialysate with 5 min temporal resolution. The detection limit is less than 5 nmol/L. According to the statistical analysis, the result is stable and accurate. It is very helpful to the physiological, pathological and pharmacological research. 展开更多
关键词 电化学法检测 微柱液相色谱 单胺 微透析 纹状体 神经递质 含量测定
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痕量氨基糖和中性单糖的高效毛细管电泳及液相色谱分析 被引量:11
14
作者 林启山 张任恩 刘国诠 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期12-15,共4页
由于糖缀合物具有较弱的紫外吸收,采用了一种与单糖有高反应活性的新型紫外、荧光衍生试剂芴甲氧羰基肼(FMOC-Hydrazine)和芴甲氧羰基氯(FMOC-cl)对单糖进行衍生。利用高效毛细管电泳(HPcE)和液相色谱... 由于糖缀合物具有较弱的紫外吸收,采用了一种与单糖有高反应活性的新型紫外、荧光衍生试剂芴甲氧羰基肼(FMOC-Hydrazine)和芴甲氧羰基氯(FMOC-cl)对单糖进行衍生。利用高效毛细管电泳(HPcE)和液相色谱技术对衍生产物进行了分析。结果表明:以上衍生试剂可用于fmol级单糖的测定。对单糖的HPCE分离因素进行了详细讨论。 展开更多
关键词 高效液相色谱 氨基糖 单糖 HPCE
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鼠脑微透析液痕量氨基酸的激光诱导荧光检测 被引量:5
15
作者 韩慧婉 马明生 +1 位作者 熊少祥 刘国诠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第5期461-464,共4页
使用自制微透析探针和活动体位生化取样装置以及自行组装的毛细管电泳 增强型电荷耦合器件 激光诱导荧光系统 ,对鼠脑透析液中的痕量氨基酸以异硫氢酸荧光黄 (FITC)进行柱前衍生后进行了分离和检测 .鼠脑海马CA3区微透析液中游离氨基... 使用自制微透析探针和活动体位生化取样装置以及自行组装的毛细管电泳 增强型电荷耦合器件 激光诱导荧光系统 ,对鼠脑透析液中的痕量氨基酸以异硫氢酸荧光黄 (FITC)进行柱前衍生后进行了分离和检测 .鼠脑海马CA3区微透析液中游离氨基酸的浓度为 1 0 - 8~ 1 0 - 6mol/L ,并将其用于学习与记忆的研究 ,为无损伤研究活体脑内神经递质和其他痕量生化物质的动态变化提供了一种新方法 . 展开更多
关键词 氨基酸 微透析 激光诱导荧光 检测
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单分散非多孔交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球作为亲和色谱载体的研究 被引量:4
16
作者 余晓 赵睿 +4 位作者 方梅 熊少祥 郭予含 苏天升 刘国诠 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第5期544-548,共5页
单分散、非多孔聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球机械强度高,表面的环氧基易于修饰与键合,非常适宜于生物大分子的快速分离、纯化。对其表面环氧基浓度、非特异性吸附性能等进行了表征;并以胰蛋白酶抑制剂为配基,制备了胰蛋白酶抑制剂.交... 单分散、非多孔聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球机械强度高,表面的环氧基易于修饰与键合,非常适宜于生物大分子的快速分离、纯化。对其表面环氧基浓度、非特异性吸附性能等进行了表征;并以胰蛋白酶抑制剂为配基,制备了胰蛋白酶抑制剂.交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯亲和色谱柱,考察了胰蛋白酶等蛋白质的亲和色谱行为,表明该基质适宜用作亲和色谱载体。提出以添加1%乙腈的方法,可有效地消除此类载体的弱非特异性吸附,使人血清白蛋白的回收率>99%。 展开更多
关键词 亲和色谱 CL-PGMA 色谱填料 胰蛋白酶抑制
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高效液相色谱-激光诱导荧光-增强型电荷耦合器件检测氨基酸的研究 被引量:4
17
作者 熊少祥 韩慧婉 +4 位作者 赵睿 王光辉 马会民 陈义 刘国诠 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第8期1191-1195,共5页
以 3 -对羟基苯甲酰喹啉 -2 -甲醛 ( CBQCA)为检测痕量氨基酸的柱前衍生试剂 ,利用高效液相色谱 -激光诱导荧光 -增强型电荷耦合器件检测器 ( HPLC-LIF-ICCD)系统 ,考察了氨基酸衍生和 HPLC分离过程中多种因素的影响 ,建立了 HPLC-LIF-I... 以 3 -对羟基苯甲酰喹啉 -2 -甲醛 ( CBQCA)为检测痕量氨基酸的柱前衍生试剂 ,利用高效液相色谱 -激光诱导荧光 -增强型电荷耦合器件检测器 ( HPLC-LIF-ICCD)系统 ,考察了氨基酸衍生和 HPLC分离过程中多种因素的影响 ,建立了 HPLC-LIF-ICCD分离检测痕量氨基酸的新方法 ,并应用于鼠脑微透析液的氨基酸检测 .当信噪比为 3时 ,对甘氨酸的质量检出限为 展开更多
关键词 分离 氨基酸 检测 HPLC-LIF-ICCD
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操作式条件反射训练对大鼠脑海马区游离氨基酸的影响 被引量:3
18
作者 舒鸿钧 韩慧婉 +2 位作者 赵睿 陈义 刘国诠 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第11期1703-1707,共5页
利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生-反相高效液相色谱(HPLC)分离-荧光检测的分析方法测定了海马区细胞外液中游离氨基酸的含量, 对少至5 μL的微透析液中的18 种氨基酸进行了定性和定量分析. 当信噪比为3 时, 各氨基酸... 利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生-反相高效液相色谱(HPLC)分离-荧光检测的分析方法测定了海马区细胞外液中游离氨基酸的含量, 对少至5 μL的微透析液中的18 种氨基酸进行了定性和定量分析. 当信噪比为3 时, 各氨基酸的最小检出量在0.5~6.0 pm ol之间. 实验结果表明, 操作式条件反射学习训练和与之形成的巩固记忆可使海马区递质氨基酸及其它游离氨基酸的释放和/或代谢量增强. 这一结果支持海马是与学习记忆有密切关系的脑神经核团的看法. 展开更多
关键词 条件反射 学习 氨基酸 记忆 大脑 海马区 大鼠
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利用后凝胶化反应制备低吸附性反相填料 被引量:4
19
作者 喻昕 赵睿 +3 位作者 乔霞 何秀娟 王允富 刘国诠 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第3期383-385,共3页
A C\-\{18\} RP packing with low adsorption was prepared by use of gelation reaction. Benzene, phthlene, phenanthrene, aniline and pyridine were selected as test solutes to evaluate the column with a mobile phase of 65... A C\-\{18\} RP packing with low adsorption was prepared by use of gelation reaction. Benzene, phthlene, phenanthrene, aniline and pyridine were selected as test solutes to evaluate the column with a mobile phase of 65% ACN aqueous solution. The performance and the stability were showed well after 1 000 column volume of 65% ACN aqueous solution(containing 0 1% TFA) .The strong polar alkine molecular can be separated well. 展开更多
关键词 后凝胶化反应 高效液相色谱 反相填料 硅胶
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一种研究生物大分子与其小分子配基相互作用的毛细管电泳新方法 被引量:3
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作者 方梅 赵睿 +4 位作者 韩慧婉 余晓 盛力 藏冰 刘国诠 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第8期925-929,共5页
建立了一种定量研究大分子与小分子间相互作用的毛细管电泳新方法,即在线微透析三电要和毛细管电泳法。本法可测定小分子的自由浓度而不受蛋白质大分子的干扰。详细介绍了实验装置的制作,探讨了进样机制。作为实例,了生理条件下pH... 建立了一种定量研究大分子与小分子间相互作用的毛细管电泳新方法,即在线微透析三电要和毛细管电泳法。本法可测定小分子的自由浓度而不受蛋白质大分子的干扰。详细介绍了实验装置的制作,探讨了进样机制。作为实例,了生理条件下pH7.4,50mmol/L磷酸介质中,牛血清中蛋白与磺胺甲基异恶唑、L-色氨酸的亲和常数的测定,其值分别为5.8×10^-4L/mol,2.3×10^4L/mol,1.77×10^3L/ 展开更多
关键词 亲和毛细管电泳 亲和常数 牛血清白蛋白 氨基酸
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