重组人脱氧核糖核酸酶Ⅰ的复性及活性鉴定

建立尿素梯度凝胶过滤复性重组人脱氧核糖核酸酶Ⅰ的方法。将诱导表达的重组人脱氧核糖核酸酶Ⅰ包涵体通过初步纯化后变性,然后在尿素梯度凝胶过滤色谱柱Sephadex G-75中复性,洗脱流速0.4 mL/min,复性完毕后透析除去小分子复性剂,使用琼脂糖电泳法检验其有活性后,再用单向酶扩散法测定其酶活力为655.8 U/mg,复性得率为83.7%。最后通过LC-ESI-MS/MS从氨基酸序列组成上证明复性产物是重组人脱氧核糖核酸酶Ⅰ。结果表明,建立的方法能成功用于复性变性的重组人脱氧核糖核酸酶Ⅰ包涵体蛋白,获得了可用于结构和功能研究的具有生物学活性的重组人脱氧核糖核酸酶Ⅰ。

创新报道方式 做“活”电视时政新闻

时政类新闻,简单的理解就是"时事政治类新闻"。就各级媒体而言,时政新闻是新闻节目的重头戏,但由于时政新闻缺少社会新闻、文化新闻、体育新闻等的"趣味性",在新闻中看不到人的思维、感情,听到的是要么是晦涩的书面语言,要么是四平八稳、没有兴味的讲话材料。画面没有多少信息,不断简单重复,单调乏味的人像罗列,让观众感到与自己关系不大、距离太远,限制了受众接受其传播的信息,直接影响到宣传效果。

危急中更显本色——记宜丰电视台台长许志程

一九九五年六月二十三日凌晨起,一场特大暴雨侵袭宜丰大地,短短十多个小时,降雨量达二百多毫米。顿时,山洪暴发,河水暴涨,稻田、村庄、厂矿、

我看“王朔电影”

抨击“王朔电影”的论者们,大都斥“王朔电影”格调低下,庸俗无聊。或指责其“教唆犯罪”,或指责其腐蚀观众心灵……不一而足,大有置之死地而后快的情势,几部电影,何以引来论者口诉笔伐,兴师问罪?不就是因为“王朔电影”写的都是些社会的“渣滓”——痞子形象? 在“王朔电影”中确实是找不到符合我们道德标准的正面人物。他们都是些没有固定职业、整日赋闲的待业青年,他们与现实社会格格不入,他们摒弃现时的道德规范,有违社会人生的正常秩序,对社会人生抱调侃游戏之态度,是一群被扭曲了的卑琐灵魂。但我们能忽视甚至否认他们的存在吗?丁建、张明、于观、石岜们是一群活着的痛苦郁闷仿徨无依的当代青年人。他们的人生态度固然不足为训,但它令我们看得真切实在,有时甚至觉得那就是自己或身边某些人的影子,只是自己常用道德理念制约看才不至于成为丁建们,这,也许正是“王朔电影”艺术魅力之所在。在这里,王朔相当严肃真切地解剖了他们的卑微灵魂。

分析基于物联网技术的智慧水电云监管平台的设计与应用

水电站在具体服务中,能满足区域供电的基本需求,在具体的服务中,水电站容易受到一些因素的影响,造成安全隐患,不利于水电站的服务。故此,文章对基于物联网技术的智慧水电云监管平台展开研究,再分析具体的设计方案和设计内容,为水电站的运行管理提供帮助,并为相关人员提供参考。

电视新闻:真实性重于娱乐性

在媒体越来越市场化的今天,无论是传统媒体还是新媒体,新闻的娱乐化现象越来越突出,就连一些严肃新闻,也有媒体从新闻娱乐化的角度来报道。电视作为新闻传播的媒介之一,新闻娱乐化的倾向也越来越明显。如何正确认清电视新闻娱乐化与信息真实之间的关系,关系到电视新闻的健康发展和受众影响。

露天矿山采剥生产承包模式的分析与研究

介绍了露天矿山采剥生产的几种承包模式,分析了各种模式下对承发包人的优劣,可为未来大型露天矿山采剥生产总承包提供参考和借鉴。

重组人胰激肽原酶复性工艺的研究

目的:研究重组人胰激肽原酶包涵体变性及复性的工艺。方法:对本实验室构建的重组人胰激肽原酶大肠杆菌进行IPTG诱导表达表达成功后,菌体经超声破碎释放包涵体,包涵体经洗涤、变性、稀释和尿素梯度凝胶过滤色谱这两种方法复性后(Sephadex-G75),通过测定酶活检验复性效果。结果:①重组人胰激肽原酶工程菌经过IPTG诱导后能够表达目的蛋白,目的蛋白以包涵体形式存在,将细胞破碎后,包涵体经过3次洗涤,纯度达到71.93%;②变性包涵体经24小时稀释复性后,蛋白浓度达到72.61μg/m L,酶的比活达到13.84 U/mg;③变性包涵体经过2个小时的尿素梯度凝胶过滤复性后,蛋白浓度可达到830.07μg/mL,酶的比活达到48.61 U/mg。结论:两种复性方法均可以使包涵体达到一定的浓度和比活,比较发现尿素梯度凝胶过滤色谱具有复性时间短和比活力高等优点,可作为重组人胰激肽原酶复性的一种有效的手段。