高度近视者眼球结构与视力的关系

目的探讨高度近视者眼球结构和视力的关系。方法对不同近视程度的志愿者共152人(283眼),依次检查视力、眼轴长度、眼底,然后分别根据屈光度、眼轴长度及眼底进行分级,探讨屈光度、眼轴长度及眼底近视改变与视力的关系,拟出视力与眼球结构指标的相关性数学模型。结果眼底分级、弧盘比值、眼轴长度、屈光度与视力呈中度相关(|r|>0.4,P<0.0001);当眼轴长度≥30.00mm、屈光度-20.00 D及以上、眼底分级为4级者,其视力多在0.5以下。建立了高度近视者眼球结构和视力的数学模型。结论高度近视眼视力随眼轴延长、屈光度加深、眼底病变程度加重而降低。综合、客观的眼球结构检查可以帮助判断和评估高度近视者的视力状况。

高度近视者眼球结构及其功能变化的法医学意义

高度近视者眼球可发生一系列不可逆的组织形态学改变。其中,眼轴、角膜曲率、前房深度、眼底形态、黄斑神经上皮厚度等改变与眼球的屈光状态及视觉功能有着密切的关系,玻璃体混浊、玻璃体脱离、白内障、青光眼、后巩膜葡萄肿、视网膜脱离等并发症的发生率也随着近视屈光度数的加深而增高。越来越多的研究表明高度近视者视觉功能改变是上述多种结构变化共同作用的结果。因此有望通过应用多项检查方法观察高度近视者眼球的结构变化,并根据这些变化分析评估高度近视者视觉功能的损害程度,为法医学评价眼部外伤与疾病的关系以及眼外伤的司法鉴定提供支持和依据。

外伤性视神经萎缩光相干断层成像表现及视功能损害

目的分析单侧外伤性视神经萎缩的光相干断层成像(optical coherence tomography,OCT)表现并探求其与视力、视野损害的关系。方法对15例外伤性视神经萎缩的法医学鉴定案例进行研究,所有案例均进行眼科常规检查、视觉电生理检查及视盘OCT检查,视力大于0.1者进行视野检查。结果15例视神经损伤者均有不同程度的视力、视野等视功能损害及视盘视网膜神经纤维层萎缩。结论外伤性视神经萎缩多始自视盘颞侧,鼻侧萎缩发生最晚且最轻;视神经萎缩程度越重,相应的视功能损害也越重;OCT技术对评价视神经萎缩有重要的意义,与视功能损害也有较好的吻合性。

高度近视眼黄斑视网膜厚度及中心视野的研究

目的探讨高度近视眼黄斑结构的变化及其与中心视野改变的关系。方法将高度近视组79例(104只眼)按等效球镜度数(spherical equivalent,SE)分为试验组1(6.00D≤SE<9.00D)40例(53只眼)、试验组2(9.00D≤SE<12.00D)26例(35只眼)及试验组3(12.00D≤SE≤15.25D)13例(16只眼);中、低度近视对照组18例(26只眼)。采用光学相干断层成像测量黄斑中心6mm直径范围视网膜平均厚度及容积,比较各组间的差异;采用Octopus101电脑自动视野计检测中心视野,分析高度近视中心视网膜平均厚度与中心视野平均缺失敏感度(mean defect,MD)的关系。结果高度近视各组黄斑区视网膜平均厚度及容积,试验组1为(272.60±12.35)μm,(9.73±0.51)mm3;试验组2为(273.34±12.99)μm,(9.64±0.46)mm3;试验组3为(271.38±12.71)μm,(9.62±0.64)mm3,均明显低于对照组的(282.08±10.62)μm,(9.99±0.53)mm3(P<0.001)。高度近视组中心视野MD与黄斑区视网膜平均厚度呈低度相关(r=-0.36,P<0.001)。结论高度近视者黄斑区视网膜整体厚度及容积均较低;高度近视视野缺损与视网膜萎缩存在相关性。

基于提高法医学教学效果的问卷调查结果分析

目的:通过问卷调查了解南通大学医学专业学生对法医学课程的需求和认知、认可程度。方法:对南通大学在校医学本科生2009级、2010级、2011级和2012级进行整群随机抽样,其中2009级96例,2010级115例,2011级131例,2012级55例。采用不记名方式填写问卷,调查问卷主要涵盖医学生认为学习法医学的必要性、学习法医学的原因和帮助、对法医学的背景和分支学科的了解程度及了解法医学的渠道等若干问题。结果:认为学习法医学非常必要58例(14.61%),必要274例(69.02%)。学习法医学原因:为拿学分54例(68.35%),对法医学感兴趣38例(48.10%),对于临床实践有重大意义36例(45.57%),为多掌握一门知识32例(40.51%),就业需要6例(7.59%)。结论:应当积极通过教学和实践加强对医学本科专业学生的法医学知识教育。

颅脑损伤后口服氧乐果中毒死亡1例

目的:分析1例复杂的交通事故损伤、疾病、中毒共存的死因鉴定。方法:对交通事故致重度颅脑损伤后,于家中死亡的案例临床资料及法医病理和毒物检测资料进行回顾性分析。结果:(1)法医病理学诊断结果:颅骨线性骨折,蛛网膜下腔出血、左颞部硬脑膜下出血、大脑多发性挫伤、挫伤性血肿形成。肺水肿、肺气肿;弥漫性肝细胞水样变;弥漫性肾近曲小管上皮水样变,蛋白管型。(2)毒物检验结果:胃、胃内容物和部分肝组织中均检出农药氧乐果成分。结论:对于道路交通事故后病情好转又突发死亡患者,为查明死因,不仅应行全面系统的解剖检验,还要送检材做毒物分析,避免得到错误的鉴定结论。

内质网应激参与介导脂多糖诱导的大鼠肝细胞凋亡

目的探讨内质网应激在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肝细胞凋亡中的作用。方法肝细胞系BRL细胞培养,用LPS、内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)、内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)分别或组合处理肝细胞。用MTT比色法检测细胞活力的变化,Heochst 33258荧光染色检测细胞凋亡形态的变化,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,Western印迹法检测内质网应激标志蛋白GRP78和内质网应激相关的凋亡蛋白CHOP、caspase-12和激活型caspase-3的表达。结果 LPS引起肝细胞活力降低、细胞凋亡率明显增加,并具有量效和时效关系,LPS诱导GRP78、CHOP、caspase-12和激活型caspase-3的表达上调;TG可引起肝细胞活力降低和细胞凋亡增加,并能加重LPS引起的肝细胞损伤;4-PBA明显抑制LPS引起的肝细胞凋亡增加。结论内质网应激参与介导了LPS引起的肝细胞凋亡,提示内质网应激是LPS诱导肝细胞损伤的重要发病途径。

HO-1对脂多糖诱导大鼠肝细胞内质网应激的作用

目的探讨抗氧化蛋白血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠肝细胞内质网应激的影响。方法大鼠正常肝细胞系BRL细胞培养,筛选有效HO-1 si RNA。用LPS、LPS+HO-1 si RNA、HO-1 si RNA和PBS溶剂分别处理大鼠肝细胞。用台盼蓝拒染实验检测细胞活力,Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡,Western印迹法检测GRP78、CHOP、caspase-12以及HO-1蛋白表达。结果 LPS能剂量依赖和时间依赖性诱导大鼠肝细胞HO-1蛋白表达上调,引起GRP78、CHOP和caspase-12蛋白表达增高,细胞活力降低和细胞凋亡率增高;HO-1 si RNA预处理明显抑制LPS对HO-1蛋白表达上调的诱导作用,并加剧LPS引起的内质网应激和细胞损伤。结论 HO-1抑制LPS诱导大鼠肝细胞内质网应激介导的细胞损伤。

猝死148例法医病理学检验分析

目的:分析猝死的死亡原因、年龄、性别和诱因等特点。方法:对南通大学医学院法医学教研室2000年1月-2009年10月间的148例猝死尸体解剖资料进行分析。结果:(1)猝死者男性明显多于女性,年龄高峰为30～59岁;(2)猝死的原因以心血管系统疾病占首位,以肺动脉栓塞多见,其次为呼吸系统、中枢神经系统、泌尿生殖系统和其它疾病(如过敏、青壮年猝死综合征等);(3)引起医疗纠纷猝死的诱因主要有因轻微感冒、疼痛等症状入院治疗或各种手术治疗后。结论:在医疗过程中发生的猝死引起医疗纠纷的主要原因往往是医方未能对致死疾病作出准确的诊断或未及时察觉严重的并发症并延误了抢救时机。尸体解剖对于明确死亡原因及鉴定医疗纠纷具有重要意义。

医疗纠纷170例法医病理检验分析

目的：阐明法医病理学尸检在医疗纠纷处理中的作用及地位。方法：对南通大学医学院法医学系2000年1月-2011年5月间涉及死亡的170例医疗纠纷尸检资料进行分析。结果：（1）死者男女之比为1.3∶1,年龄新生儿~94岁;（2）死亡原因以心血管系统疾病占首位,其余依次为呼吸系统、中枢神经系统、泌尿生殖系统和其它疾病（如感染、过敏等）;（3）地市级医院占15.3%,区县级医院占22.4%,而基层乡镇卫生院和个体诊所占62.3%;（4）涉及的科室以外科居多;（5）临床诊断与尸检诊断相符占47.6%,未明确诊断或误诊占52.4%。结论：法医尸检为正确处理医疗纠纷提供了科学依据,可维护医患双方的合法权益,对防范医疗事故的发生有非常重要的意义。

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖诱导大鼠肝细胞内质网应激的抑制作用

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠肝细胞内质网应激的影响。方法:培养大鼠肝细胞系BRL细胞,用NAC或LPS分别或共同处理BRL细胞,其中共同处理时把NAC加入培养液中预处理1 h再给予LPS处理肝细胞。用锥虫蓝拒染法检测细胞存活率;Hoechst33258染色荧光显微技术检测肝细胞凋亡的形态学变化;免疫印迹法检测内质网应激标志蛋白GRP78及凋亡相关蛋白CHOP、Caspase-12和Caspase-3的表达。结果:与溶剂对照组比较,LPS能时间依赖性地引起肝细胞细胞活力显著降低和细胞凋亡增多,诱导内质网应激标志蛋白GRP78表达明显上调;NAC预处理抑制LPS引起细胞存活率降低和细胞凋亡增多,并且能显著抑制LPS诱导的GRP78及凋亡相关蛋白CHOP、Caspase-12和Caspase-3表达上调。结论:NAC通过阻断LPS诱导的肝细胞内质网应激而减轻肝细胞损伤。

16例肺血栓栓塞猝死的法医学分析和临床研究

目的分析肺动脉血栓栓塞(pulmonary thromboembolism,PTE)猝死的法医病理学特点,探讨医疗过程中发生PTE的危险因素,为临床预防、治疗提供帮助。方法对本市2002年至2009年16例PTE猝死案件进行回顾性分析。结果每例均至少存在1项已知的高危因素,其中外伤12例,慢性疾病长期卧床1例,手术3例;发病到死亡的时间平均为1.2h,6例≤1h,3例≤12h。结论对于高龄(≥40岁)外伤或手术患者,预防、早期诊断和治疗PTE对于患者的生命至关重要,发现深静脉血栓形成者应采取紧急手段处理栓塞,谨防发生PTE致猝死。

延迟给予外源性硫化氢加剧脂多糖引起的大鼠肝细胞损伤

目的:探讨延迟给予外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠肝细胞损伤的影响。方法:培养大鼠肝细胞系BRL细胞,用10μg/mL LPS或不同剂量的H2S供体NaHS(50、100、200μmol/L)单独或共同处理BRL细胞12 h,共同处理时LPS作用细胞1 h后再给予NaHS。锥虫蓝拒染法检测细胞存活率的变化;Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡的变化;蛋白免疫印迹法检测内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)标志蛋白GRP78及其凋亡相关蛋白CHOP和caspase-12蛋白表达变化。结果:与溶剂对照组相比,LPS引起BRL细胞存活率明显下降(P<0.01),细胞凋亡明显增加(P<0.01),GRP78、CHOP和caspase-12表达上调(P<0.01);与LPS组相比,延迟给予NaHS导致LPS引起的BRL细胞存活率降低(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.01),GRP78、CHOP和caspase-12蛋白表达上调(P<0.05或P<0.01),NaHS的效应具有量效关系;NaHS单独作用对BRL细胞无明显影响。结论:延迟给予外源性H2S可加重LPS诱导的大鼠肝细胞损伤,机制与上调ERS有关。

小鼠脑外伤后内源性硫化氢体系的变化

目的 :探讨小鼠脑外伤(traumatic brain injury,TBI)后内源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)体系的变化。方法:利用改良的自由落体装置建立小鼠TBI模型,使用亚甲基蓝法检测血浆及脑组织中内源性H2S浓度。Western Blot技术观察内源性H2S合成酶胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-beta-synthase,CBS)在小鼠TBI后不同时间(1 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、7 d)的表达变化。结果 :脑组织内源性H2S浓度在小鼠TBI血清、脑皮质及海马组织中变化趋势一致,呈先降低后升高。TBI后大脑皮质和海马组织CBS表达随着外伤时程的延长逐渐降低。结论:内源性H2S在TBI的病理生理过程中起着重要的作用。

近视眼底改变与功能相关性的研究及其法医学意义

目的研究近视眼底改变与视觉功能的关系;研究近视者轻度眼部钝挫伤后眼底改变与视觉功能的关系。对象与方法选取不同程度的近视志愿者104人/170眼及眼部轻度钝挫伤的近视者56人/112眼分别作为实验组和眼外伤组,按眼底变化分为0至4级,并测定弧盘比值,分别检测其屈光度、矫正视力及静态视野。结果在实验组和眼外伤组中,眼底改变、包括弧盘比值均与近视屈光程度、矫正视力、静态视野平均缺失敏感度相关。结论运用眼底分级可以估计受检眼的视觉功能,弧盘比值可以作为有效的补充手段;轻度眼部钝挫伤的近视者若仅见视觉功能降低,而未检见明显的眼球结构损伤性改变,则不能简单地按照伤后检见的视觉功能水平作为法医学鉴定的依据。

硫化氢引起大鼠肝细胞非内质网应激依赖性细胞凋亡

目的 ：探讨内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）在外源性硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）引起大鼠肝细胞凋亡中的作用。方法：培养的大鼠肝细胞株BRL用50～2 000μmol/L H2S供体硫氢化钠（sodium hydrosulfide,Na HS）分别处理细胞1、12 h,用等体积的Na HS溶剂为对照。采用CCK8方法检测细胞活力,蛋白印迹技术检测细胞凋亡蛋白caspase-3、PARP-1、Bax和Bcl-2,ERS相关蛋白GRP78、CHOP和caspase-12,转录因子Nrf 2及其调控抗氧化蛋白Trx-1和HO-1的表达变化。结果：与对照组比较,50～100μmol/L Na HS无细胞毒效应,200～2 000μmol/L Na HS引起细胞活力明显降低;200～2 000μmol/L Na HS引起细胞激活型caspase-3及其底物PARP-1、Bax明显上调,Bcl-2表达下调,对ERS相关蛋白GRP78、CHOP和caspase-12蛋白表达无明显影响;50～2 000μmol/L Na HS能剂量依赖性引起转录因子Nrf 2及其调控抗氧化蛋白Trx-1和HO-1明显上调。结论：高浓度H2S可引起大鼠肝细胞非内质网应激依赖性细胞凋亡。

大鼠视神经挫伤致视网膜硫化氢合成酶表达变化

目的探讨大鼠视神经挫伤后视网膜硫化氢合成酶胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)、胱硫醚β-合成酶(cystathionine β-synthase,CBS)和3-巯基丙酮酸硫基转移酶(3-mercaptopyruvate sulfur-transferase,3-MST)的表达变化。方法建立大鼠视神经挫伤模型。将大鼠分为正常对照组、视神经挫伤组和假手术组。观察大鼠视网膜的组织病理学变化,检测视网膜神经节细胞数量和视网膜内侧部分厚度。用实时荧光定量PCR技术检测CBS、CSE和3-MST的mRNA表达变化。结果正常对照组大鼠视网膜组织结构正常,假手术组仅有轻微变化。与假手术组比较,视神经挫伤后各组大鼠视网膜出现明显损伤,视网膜神经节细胞数量呈时间依赖性减少且视网膜内侧部分厚度呈进行性变薄。正常对照组大鼠视网膜存在CSE、CBS和3-MST mRNA的基础表达。与正常对照组比较,假手术组CSE、CBS和3-MST的mRNA表达无明显变化。与假手术组比较,CBS mRNA表达在视神经挫伤后3 d、7 d和14 d呈时间依赖性上调;CSEmRNA表达在伤后7 d达到峰值,14 d时有所下降;3-MST mRNA表达在视神经挫伤后3 d和7 d有上调的趋势,14 d时有明显上调。结论大鼠视神经挫伤后视网膜硫化氢合成酶CBS、CSE和3-MST表达上调,这可能引起视网膜局部内源性硫化氢生成增多并产生代偿性保护效应。

HMGB1在创伤引起大鼠肺组织内质网应激中的作用

目的探讨高迁移率族B1(high mobility group B1,HMGB1)蛋白在创伤引起大鼠肺组织内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)变化中的作用。方法用标准重物挤压大鼠双后肢建立创伤应激致大鼠急性肺损伤模型。第一部分实验将大鼠随机分为体位对照组和挤压后6 h、18 h和30 h组,第二部分实验分为体位对照组、挤压后18 h组、HMGB1抑制剂正丁酸钠组和挤压后18 h+抑制剂组。用蛋白质印迹法检测肺组织HMGB1以及ERS相关蛋白(GRP78、caspase-12、CHOP和IRE1α)的表达变化。同时,常规HE染色观察肺组织病理学改变。结果与体位对照组比较,挤压大鼠后肢可引起肺组织中ERS相关蛋白(GRP78、caspase-12、CHOP和IRE1α)以及HMGB1蛋白表达明显增高,挤压后30 h时上述蛋白表达降低但仍高于体位对照组,同时大鼠出现明显肺损伤病理变化。与挤压后18 h组比较,挤压后18 h+抑制剂组大鼠肺组织中上述ERS相关蛋白及HMGB1蛋白表达降低,大鼠肺损伤病理变化减轻。结论创伤应激能启动HMGB1-ERS通路导致大鼠急性肺损伤。

抑制内质网相关降解途径引起大鼠肝细胞内质网应激和自噬增强

目的:探讨内质网相关降解途径(endoplasmic reticulum-associated degradation,ERAD)抑制对静息大鼠肝细胞自噬变化和内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的影响。方法:培养的大鼠肝细胞株BRL用ERAD抑制剂EeyarestatinⅠ(EerⅠ)或b-AP15处理细胞12 h,用等体积的溶剂PBS作对照。用蛋白印迹技术检测ERS及其下游信号系统非折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)、细胞凋亡及自噬相关蛋白的表达变化,用CCK-8方法检测细胞活力。结果:与对照组比较,EerⅠ或b-AP15能剂量依赖性引起大鼠肝细胞自噬标志性蛋白beclin1、LC3-Ⅱ表达显著上调和LC3-Ⅱ/Ⅰ明显增高,ERS标志性蛋白GRP78、caspase-12和CHOP表达明显上调以及UPR相关蛋白p-IRE1α和XBP-1S表达上调,细胞凋亡激活型caspase-3及其底物PARP-1裂解片段89 ku表达明显增加及细胞活力明显降低。结论:抑制ERAD通路可引起静息的大鼠肝细胞ERS和自噬增强。

脂多糖诱导大鼠肝细胞PARP-1依赖性细胞死亡的初步研究

目的:观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对大鼠肝细胞聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]依赖性细胞死亡的影响。方法 :大鼠肝细胞株BRL细胞常规培养,用0.1~10 mg/L LPS处理大鼠肝细胞12 h或24 h,部分实验中大鼠肝细胞LPS处理前1 h先用PARP-1抑制剂PJ-34或3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenzamide,3-AB)预处理。用CCK-8试剂盒检测细胞活力。用蛋白免疫印迹技术检测蛋白表达。结果 :与溶剂对照组比较,LPS能剂量和时间依赖性引起大鼠肝细胞PARP-1蛋白表达上调和PARP-1活性产物多聚二磷酸核糖[poly-(ADP-ribose),PAR]修饰蛋白数量增多,大鼠肝细胞活力降低以及反映细胞凋亡的PARP-1裂解片段增多,3-AB或PJ-34部分翻转LPS诱导的大鼠肝细胞的活力降低。结论:LPS能诱导大鼠肝细胞PARP-1依赖性细胞死亡。