中国遗传性胰腺炎患者胰蛋白酶原基因多位点杂合突变及其临床特征(英文)

用基因产物直接测序法对2个遗传性胰腺炎家系中胰腺炎患者(共有4例成员)的胰蛋白酶原基因(cationic trypsinogen,PRSS1)5个外显子进行测序,并分析其各自的临床特征.在4例胰腺炎患者中均出现了PRSS1基因杂合突变,但两家系PRSS1基因突变的位点不同,且临床表现差异较大,其中家系1出现6例糖尿病患者且发病年龄较家系2明显延迟,平均发病年龄为29岁,分析其PRSS1基因发现3号外显子336位碱基存在G→A杂合性突变,为中性突变,表达的氨基酸从赖氨酸(Lys)→赖氨酸(Lys),同时在同一外显子的361位碱基还存在另一个G→A杂合性突变,造成121位的丙氨酸(Ala)被苏氨酸(Thr)所取代,胰蛋白酶原的空间结构发生改变,其与抑制因子的结合位点消失,"保护失败"而产生有活性的胰蛋白酶,造成胰腺自身的消化.而家系2未发现糖尿病患者,其胰腺炎患者的血清肿瘤标志物不增高,先证者(Ⅲ8)在胰腺炎发病过程中表现为CD4+T/CD8+Tcell和乙肝表面抗体(anti-HBs)随病程进展逐渐降低,而Ⅲ7不表现出此现象,分析其PRSS1基因发现3号外显子361位碱基同样存在G→A(c.361G→A)突变,而且在415位还存在一个杂合性突变点T→A(c.415T→A),其中c.415T→A不存在于Ⅲ7.胰蛋白酶原基因存在多种形式的突变,而且与临床表型相关.

一个遗传性胰腺炎家系中新发现的胰蛋白酶原基因突变

对1个遗传性胰腺炎(hereditary pancreatitis,HP)家系中6例成员和120例无亲缘关系健康人的胰蛋白酶原基因(protease serine 1,PRSS1)进行PCR扩增,产物纯化后测序,结合受检者的血清肿瘤标志物、糖尿病相关生化指标以及近亲属的一般临床资料进行分析。结果发现4例家系成员PRSS1基因3号外显子区136位碱基存在C→T杂合性突变,他们的基因型表现为野生型与突变型杂合现象,另外在先证者PRSS1基因的3号外显子区171位碱基还存在着一个同义突变点(C→T),而对照组和家系其他成员中未发现此两种突变,突变阳性患者表现为乳酸、糖基化血红蛋白和糖类肿瘤标志物(CA19-9、CA125)增高。因此,PRSS1基因3号外显子区136位碱基C→T杂合性突变与该家系遗传性胰腺炎有关,是该家系中遗传性胰腺炎的遗传易感因素。

遗传性胰腺炎胰蛋白酶原基因突变分析

目的:分析胰蛋白酶原基因(cationic tryp- sinogen,PRSS1)在遗传性胰腺炎(hereditary pancreatitis,HP)患者中突变的性质.方法:用基因产物直接测序法对1个遗传性胰腺炎家系中的胰腺炎患者(共有2例成员)的PRSS1基因5个外显子进行测序,并分析其临床特征.结果:在2例胰腺炎患者中均出现了PRSS1基因3号外显子纯合子突变(c.415 T>A),表达的氨基酸从胱氨酸(Cys)→丝氨酸(Ser),平均发病年龄为16岁,家系中胰腺炎患者的血清肿瘤标志物均正常.结论:PRSS1基因3号外显子c.415 T>A突变与遗传性胰腺炎有关.

4个非综合征耳聋家系中检出线粒体COI和COII基因的新变异

目的报道4个疑有母系遗传特征的中国非综合征耳聋家系的线粒体分子遗传学特征。方法应用限制性内切酶酶切和直接测序技术对先证者的线粒体基因序列进行分析,同时收集患者的相关临床资料。结果在2个非综合征耳聋家系的先证者中发现线粒体COⅠ和COⅡ基因上两个新变异形式(7250A>G和7774G>A)均为沉默突变(Thr→Thr和Thr→Thr),而位于COⅠ基因上的7196C>A(Leu→Leu)、7319T>C(Ile→Ile)和COⅡ基因上的7660A>G(Asp→Asp)为国外及汉族群体中已报道的3个多态性位点,其中COⅠ基因两个多态性位点为首次在畲族耳聋遗传家系中报道。这些突变或多态没有产生错义氨基酸,可能通过基因调控机制使tRNA代谢或线粒体功能产生缺陷,或者对氨基糖甙类药物易感而致聋。同时,在家系中未发现GJB2、MTO1基因及其他线粒体基因突变。结论 mtDNA7250A>G和7774G>A为汉族耳聋家系中新发现的线粒体基因突变形式,而mtDNA7196C>A和7319T>C是首次在畲族耳聋遗传家系中报道。

肝功能检验建议性报告软件临床分析管理的优势

介绍一种方便于临床分析、鉴别诊断和分析管理的临床检验专家系统。利用人工神经网络(Artificial Neural.Networks,ANN)挖掘患者基本信息和实验室数据,进行综合统计分析,对已确诊的患者(肝炎、肝癌、肝硬化和胆囊结石)的生化检验项目进行梳理,得出相应疾病生化指标的临床阳性预测值,然后以各项生化指标为多因素变量、诊断为输出变量建立ANN预测模型。另外抽取肝功异常并已明确诊断的患者60例进行生化指标测定,利用ANN系统,综合分析预测临床符合率,同时构建对初诊病人的树状筛查程序和直观判读报告软件的开发。利用专家诊断系统对肝脏疾病预测的准确率分别为:肝炎80.0%、肝硬化86.7%、肝癌66.7%和胆囊结石73.3%,优化后的报告格式直观反映患者的病情变化。借助于建议性报告软件可快速简易地作出对肝胆系统疾病鉴别诊断,达到医疗资源优化利用的目的。

人工神经网络在糖尿病并发症预测中的应用

目的通过人工神经网络的科学计算方法来预测糖尿病患者并发症的发展趋势。方法分析100例糖尿病患者的临床资料及其空腹血糖（Glu）、餐后2h血糖（P2hBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）4个指标，然后根据LDL—C正常、异常以及有无并发症将糖尿病患者分为两组（各50例），并将每一组归纳为一个集合，应用MATLAB6．5软件建立糖尿病并发症预测模型，同时随机抽取18例临床确诊的糖尿病患者，将其Glu、P2hBG、HbA1c、LDL-C数据作为输入值进行模型验证，以检测网络的拟合效果。结果人工神经网络预测与随访情况比较，预测糖尿病并发症的灵敏度为66．7％，特异度为100．0％，准确度为83．3％。结论利用人工神经网络进行糖尿病并发症预测，能取得良好的预测效果。

戊型肝炎病毒感染与胰腺癌发生的关系

目的探讨戊型肝炎病毒(HEV)感染与胰腺癌发生的关系。方法以住院患者为研究对象,包括2900例病毒感染者(9例甲型肝炎、2129例乙型肝炎、81例丙型肝炎、146例戊型肝炎和535例EB病毒感染)和5569例对照,检测患者血清甲、乙、丙、戊型肝炎病毒标志物和EB病毒EB-VCA-IgA,收集相关临床资料包括CD4/CD8比值、总胆红素、糖类抗原(CA19-9)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)和脂肪酶等,比较HEV和其他病毒感染与胰腺癌的关系。结果在HAV、HBV、HCV、HEV、EBV感染组中胰腺癌病例分别为0、5、1、12、1例,与对照组相比,HEV感染组罹患胰腺癌的风险增加约48倍(OR49.16,CI1.31～41.23),而其他病毒感染组和对照组之间差异无统计学意义(P>0.05),而且HEV感染的胰腺癌患者血清CA19-9、总胆红素和γ-GT均增高,而CD4/CD8降低。结论戊型肝炎病毒感染可能与胰腺癌的发生有一定的关系,HAV、HBV、HCV、EBV病毒感染与胰腺癌发生无关。

脱落细胞线粒体基因A1555G突变在诊断线粒体耳聋中的应用

目的用PCR-RFLP技术检测脱落细胞(尿液沉渣细胞和颊黏膜细胞)线粒体基因A1555G突变,探讨脱落细胞用于诊断线粒体基因突变相关耳聋的可行性。方法收集福建省某特殊教育学校126名聋哑学生和1个线粒体基因A1555G突变的遗传性耳聋家系6例患者外周血及尿液沉渣细胞和颊黏膜细胞,用PCR-RFLP技术筛查患者是否携带线粒体DNA A1555G突变,并与测序法进行比较。结果尿液沉渣细胞检测线粒体DNA A1555G突变的检出率最高(9/132),颊黏膜细胞和外周血细胞均为7/132。PCR-RFLP筛查结果与直接测序法基本相符。结论脱落细胞适用于耳聋相关线粒体DNA A1555G突变检测。

基于转化医学理念的医学检验专业实习带教模式探索

转化医学是一个新兴的多学科融合的研究领域,是医学科研和教育发展的趋势。基于转化医学理念,科室对医学检验专业实习带教模式进行探索,构建了"自主学习-岗位技能-分析能力-创新思维"四位一体的医学检验专业实习带教模式,提高了实习质量。

毛囊COL4A5基因扩增的方法学研究

目的探讨毛囊基因组在COL4A5基因扩增中的应用。方法对32例慢性肾病患者和12例健康体检者进行毛囊和全血COL4A5基因扩增,产物测序,比较两者扩增产物,并将测序结果与NCBI公布的标准序列进行比对。结果毛囊与全血COL4A5基因扩增产物长短一致,测序结果与NCBI公布的COL4A5基因标准序列完全相符,且扩增效率无显著性差异(P>0.05)。结论毛囊COL4A5基因扩增效果与全血等同。

锁定钢板内固定与外固定架治疗桡骨远端骨折的疗效对比

目的比较分析应用锁定钢板内固定与应用外固定架治疗桡骨远端骨折的临床疗效。方法选择我院收治的80例桡骨远端C型骨折的患者作为研究对象。将其随机分为两组。内固定组采用掌侧切开复位锁定钢板内固定术,外固定组采用闭合手法复位外固定术,比较两组患者术后桡骨高度恢复情况、掌倾角及尺偏角纠正情况,应用Gartland-Werley(GW)评分对腕关节功能测定。结果术后两组患者的桡骨高度、尺偏角对比,差异不具有统计学意义(P>0.05);内固定组掌倾角情况优于外固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);术后6个月内固定组的GW评分低于外固定架组,差异具有统计学意义(P<0.05);术后12个月两组患者的GW评分对比,差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论对于桡骨远端C型骨折患者,两种方式均可取得满意效果,锁定钢板内固定术后短期内具有一定优势,外固定架固定具有创伤小、操作简单的优点,临床应用需根据具体情况选择。

人工神经网络在高血压并发症预测中的应用

目的通过分析高血压患者的实验室数据并建立人工神经网络（ANN）模型来预测高血压并发症的发展趋势。方法分析568例高血压患者的临床资料,按有无并发症分为两组,结合主要的实验室指标建立高血压并发症预测模型,同时进行模型验证,以检测网络的稳定性。结果人工神经网络预测与临床比较,网络预测高血压并发症的准确度为79.86%（226/283）。结论利用人工神经网络进行高血压并发症预测,能获得良好的预测效果。

一个2型糖尿病家系中新发现的线粒体DNA G7444A突变分析

应用PCR-RFLP和测序对一个2型糖尿病家系的线粒体DNA G7444A的突变进行检测,并分析其临床资料的特点。结果发现,27例家系成员中,11例母系亲属均存在线粒体DNA G7444A突变,而配偶及父系亲属中未发现该突变。11例突变者中确诊为2型糖尿病患者5例,糖耐量受损1例,均表现为乳酸和血糖增高。因此,线粒体DNAG7444A突变是该家系中糖尿病的遗传易感因素,是导致2型糖尿病的一个新的突变位点。

福建省486例耳聋患者致聋原因及线粒体DNA突变分析

目的分析486例耳聋患者的致聋原因,探讨线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变与耳聋的关系。方法对486例耳聋患者进行病因学调查,并同时进行线粒体DNA1 555、3 243、7 445突变位点的检测。结果486例中发现家族遗传性聋126例(25.9%),药物性聋221例(45.5%),近亲结婚致聋39例(8.02%),高热或耳部疾病致聋76例(15.6%),不明原因致聋24例(4.9%);在486例耳聋患者中,mtDNA A1 555G突变阳性44例,突变阳性率为9.05%,其中32例为同质性突变,12例为异质性突变;检出1例mtDNA G7 444A突变;所有样本均未检出mtDNA A3 243G、mtDNA A7 445G突变。结论遗传因素和使用耳毒性药物是导致耳聋的重要原因,mtDNA A1 555G突变是常见的突变形式,是氨基糖苷抗生素致聋的重要原因。

新化学法检测血清K^+、Na^+的评价

目的对新化学法测定血清钾、钠进行对比评价。方法在Olympus AU2700全自动生化分析仪(带ISE模块)上,用新化学法钾、钠检测试剂盒进行重复性试验、线性试验、回收试验和抗干扰试验,同时与酶法、电极法对30份血清样本进行比较试验。结果新化学法测定血清钾、钠的CV分别为0.90%、0.47%;线性范围分别为:K试剂在1.4～7.0 mmol/L范围内的线性相关系数r=0.9996;Na试剂在90～170 mmol/L范围内的线性相关系数r=0.9996;回收率分别为:99.2%、100.5%。在胆红素600μmol/L、TG 20 mmol/L浓度范围内无干扰。3种方法对30份血清样本的测定结果无显著差异(P<0.05),均具有良好线性相关性,新化学法与酶法的回归方程(n=30),钾为Y=0.972X+0.421,相关系数r=0.985,钠为Y=0.961X-0.019,相关系数r=0.987;新化学法与电极法的回归方程(n=30),钾为Y=0.990X+0.110,相关系数r=0.991,钠为Y=0.989X+0.9,相关系数r=0.997。结论新化学法测定血清钾、钠有较好的重复性和准确度,线性良好,抗干扰能力较强,能满足临床使用要求。

EB病毒BZLF1N基因的克隆与序列分析

目的:克隆EB病毒BZLF1N基因编码区的cDNA并对其序列进行分析。方法:采用RT-PCR方法,从B95-8细胞获得BZLF1N基因的cDNA,克隆至pGEM-TEasy载体,选择阳性克隆并进行序列测定。结果:构建的重组载体中含有EB病毒BZLF1N基因的全长序列,与Genebank公布的序列完全一致。结论:获得EB病毒BZLF1N基因的克隆,为进一步的研究奠定了基础。

血清胱抑素C在肿瘤及其化疗早期肾损害中的意义

目的:评价血清胱抑素C(cystatinC,CysC)在肿瘤化疗期间肾损害中的意义。方法:收集36例恶性肿瘤接受化疗患者和35例正常对照者血清,以颗粒增强散射比浊法测定CysC,并和患者同期的血肌酐加以比较。结果:肿瘤化疗前后(1个疗程) CysC水平存在着显著性差异,而且肿瘤患者的血清CysC水平[(1.42±0.39)mg/L]明显高于对照组[(0.86±0.25)mg/L],肿瘤化疗期间血清CysC水平与血肌酐呈正相关。结论:血清CysC是评价肿瘤及其化疗期间肾功能损害的一项敏感、可靠的指标。

脑型肌酸激酶同工酶测定在非心源性疾病的应用

目的探讨脑型肌酸激酶同工酶(CK-BB)在肿瘤、自身免疫性疾病的筛查以及器官损伤定位中的意义。方法免疫抑制法检测血清标本心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)活性,计算二者比值。随机选取CK-MB/CK>50%的非心源性疾病的血清标本90份及30份对照血清,用CK同工酶琼脂糖凝胶电泳进行分离、鉴定。结果血清CK-MB假性增高的标本多见于肿瘤、自身免疫病,经电泳分离及可见光扫描后,肿瘤和自身免疫性疾病组的CK-BB含量明显高于对照组,差别具有统计学意义(P<0.01),血清CK-BB增高情况与其在组织器官中的分布相符。结论血清CK-BB的检测在肿瘤、自身免疫性疾病的辅助诊断以及器官损伤定位中具有重要意义。

闽东南地区特教学校听力障碍学生线粒体基因变异调查

目的调查福建省闽东南地区特教学校遗传性或者药物性耳聋患者的分子遗传学病因。方法调查对象为福建省闽东和闽南3所特教学校276例听力障碍患者,对照组为按照疾病组进行年龄、性别匹配的健康体检者120例,所有的受试者均采集外周血并抽提DNA,应用基因芯片筛查国人常见的线粒体DNA(mtDNA)中的两个位点的突变,对可疑的母系遗传或药物性听力障碍患者应用限制性内切酶酶切结合直接测序技术对mtDNA进行全长分析,同时收集患者的相关临床资料。结果在37位可疑遗传性耳聋的先证患者中有7个存在明显的母系遗传特征,另外52人有氨基糖甙类药物接触史。共发现8例患者(2.91%)携带12SrRNA基因A1555G突变,12SrRNA基因C832T、T874C、G1125A和A1128G的变异位点;mtDNA存在着多种频率不等的变异形式,而且倾向于单体型的连锁出现,畲族患者以COⅠ和ATP6基因上的变异较为集中,包括C7196A、T7319C、G8997C、C8995T和C8994T等。结论线粒体DNA在非综合征耳聋患者中可以呈现多种形式的变异,其中12SrRNA基因A1555G突变在闽东南耳聋患者中具有一定的比例,而COⅠ和ATP6基因变异可能和种族遗传相关。