miR⁃455⁃3p调控Keap1/Nrf2信号对气道平滑肌细胞凋亡的机制研究

目的探讨miR⁃455⁃3p调控Keap1/Nrf2信号对气道平滑肌细胞凋亡的影响。方法收集2021年1月至2023年1月我院普胸外科收治的60例COPD患者,作为COPD组;另选取60例无COPD病史的肺部良性肿瘤患者正常肺组织作为健康对照组(Control组)。分离气道平滑肌细胞(ASMCs),将COPD患者气道平滑肌细胞随机分为miR⁃455⁃3p组、miR⁃NC组、miR⁃455⁃3p+si⁃Nrf2组。RT⁃PCR检测Control组和COPD组患者中miR⁃455⁃3p的表达,并检测转染过不同质粒的各组COPD患者气道平滑肌细胞中miR⁃455⁃3p的表达。分别采用CCK⁃8、Transwell小室法及流式细胞仪检测COPD患者气道平滑肌细胞增殖、侵袭和凋亡能力;采用ELISA检测COPD患者气道平滑肌细胞培养上清液中IL⁃6、TNF⁃α水平;蛋白质印迹检测细胞中Keap1和Nrf2蛋白表达。结果与Control组相比,COPD组患者ASMCs中miR⁃455⁃3p表达降低(P<0.05);与NC组相比,miR⁃455⁃3p组ASMCs中miR⁃455⁃3p表达增加(P<0.05);与miR⁃455⁃3p组相比,miR⁃455⁃3p+si⁃Nrf2组ASMCs中miR⁃455⁃3p表达明显降低(P<0.05)。NC组和miR⁃NC组ASMCs增殖、侵袭、凋亡能力及IL⁃6和TNF⁃α水平相比差异无统计学意义(P>0.05);与miR⁃NC组相比,miR⁃455⁃3p组ASMCs增殖、侵袭能力及细胞上清液中IL⁃6、TNF⁃α水平明显降低,凋亡能力明显增加(P<0.05);与miR⁃455⁃3p组相比,miR⁃455⁃3p+si⁃Nrf2组ASMCs增殖、侵袭能力及细胞上清液中IL⁃6、TNF⁃α水平明显增加,凋亡能力明显降低(P<0.05)。NC组和miR⁃NC组细胞中Keap⁃1、Nrf2蛋白表达相比差异无统计学意义(P>0.05);与miR⁃NC组相比,miR⁃455⁃3p组细胞中Keap⁃1蛋白表达明显降低,Nrf2蛋白表达明显升高(P<0.05);与miR⁃455⁃3p组相比,miR⁃455⁃3p+si⁃Nrf2组细胞中Keap⁃1蛋白表达明显增加,Nrf2蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论过表达miR⁃455⁃3p可抑制COPD患者气道平滑肌细胞增殖和侵袭,诱导凋亡,其作用机制和激活Keap1/Nrf2信号通路有关。