共培养大肠杆菌和谷氨酸棒杆菌合成圣草酚研究

微生物共培养技术在生物制造中应用广泛,尤其在天然产物的微生物合成中发挥重要作用.植物天然产物圣草酚具有抗菌、抗氧化等多种药理作用,在医药、食品等领域具有良好应用前景.为利用葡萄糖这一廉价碳源从头合成圣草酚,运用微生物共培养技术,构建了大肠杆菌BAK101菌株与谷氨酸棒杆菌NE1菌株的共培养发酵体系,其中BAK101可将葡萄糖转化为L-酪氨酸,NE1可将L-酪氨酸转化为圣草酚.通过系统优化,采用补料分批发酵结合分段式共培养方式,利用2%的葡萄糖经过100 h发酵,在摇瓶中实现了4.72 mg/L圣草酚的从头合成.本研究为黄酮类化合物的微生物共培养合成奠定了基础,也为复杂天然产物在微生物中的从头合成提供了参考.

大黄素抑制MRSA生物膜活性及其作用机制研究

目的探究大黄素抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物膜作用及其机制。方法微量肉汤稀释法测定大黄素对MRSA标准株及5种不同地区临床分离株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC),绘制抑菌曲线评估其动态抑菌效果;结晶紫染色测定大黄素抑制MRSA生物膜的作用,扫描电镜和激光共聚焦显微镜观察其对MRSA生物膜形态的影响;荧光定量PCR检测ica操纵子基因的表达。结果大黄素对不同MRSA菌株的MIC为2~8μg/mL,MBC为4~16μg/mL;大黄素可显著抑制MRSA生物膜的形成,并呈剂量依赖关系;大黄素对生物膜结构具有破坏作用,且显著增加了生物膜内死细菌的比例;荧光定量PCR结果提示大黄素显著下调了ica操纵子基因的表达。结论大黄素具有抑制MRSA生物膜的作用,并可能通过下调ica操纵子基因的表达抑制细菌生物膜的形成。

虾青素对缺血-再灌注损伤的防治作用进展

目的研究虾青素对缺血-再灌注损伤(IRI)的预防保护作用及可能的作用机制。方法收集虾青素及其预防保护缺血-再灌注损伤作用的相关文献,对虾青素和缺血-再灌注损伤之间的关系进行综述。结果缺血-再灌注损伤是一种氧化损伤,而虾青素具有强大的抗氧化活性。经过虾青素预处理后,缺血-再灌注损伤情况可得到有效改善。结论虾青素作为抗氧化剂,能有效预防及减轻缺血-再灌注损伤,其作用机制可能与其抗氧化、抗细胞凋亡相关。

耐温耐碱木聚糖复合酶处理对桑芯成分和组织形态的影响

通过化学和形态分析手段,研究了碱性木聚糖复合酶处理中酶用量、温度、pH值对桑芯主要化学组分、得率和组织形态的影响。研究表明:自制的酶是耐温耐碱、含有少量果胶酶和纤维素酶的木聚糖复合酶,对温度和pH值的适应范围较广;在优化的温度和pH值条件下,随着酶用量的增加,桑芯中木质素和综纤维素都呈现下降的趋势,但得率均高于95%;优化的酶处理条件是:酶用量2.0 U/g、温度50℃、pH值8.0;酶处理前后组织、细胞形态发生了明显变化,经过酶处理后,细胞得到较充分润胀,纤维表面变粗糙,增加了组织的多孔性和细胞的比表面积,将提高桑枝的物理、化学及生物转化过程化学药品渗透和反应性,有利于提高生物炼制的效率。

青香茅黄酮对大鼠离体胸主动脉舒张作用的研究

目的研究青香茅黄酮提取物(CSF)对大鼠离体胸主动脉的舒张作用。方法采用离体血管环技术制备大鼠胸主动脉环模型,设置内皮完整组和内皮去除组,并放置于灌流槽中,两组同时使用累积加药法,记录CSF对去甲肾上腺素(PE)预收缩大鼠胸主动脉环张力的变化影响。结果 CSF对PE预收缩的胸主动脉环的内皮完整组和内皮去除组均具有浓度(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL)依赖性的舒张作用,内皮完整组和内皮去除组大鼠胸主动脉环的最大舒张效应分别为(70.80%±20.97%)和(65.90%±17.96%),两组作用效果相比较,差异无统计学意义(P>0.05),表明青香茅黄酮提取物对大鼠离体胸主动脉环的最大舒张效应与血管上有无内皮细胞无依赖作用。在低浓度(0.4、0.6mg/mL)时,内皮完整组大鼠胸主动脉环的舒张效果强于内皮去除组,低浓度的CSF对大鼠胸主动脉环血管的舒张作用具有内皮依赖性。结论青香茅黄酮提取物具有良好的舒张血管的作用,其机制可能同时作用于血管内皮细胞和血管平滑肌上。

高纯耐热耐碱木聚糖酶预处理对杨木KP浆漂白特性的影响

研究了耐热耐碱木聚糖酶X对杨木硫酸盐浆预处理的选择性及其对无元素氯(ECF)漂白特性的影响。结果表明:该木聚糖酶预处理具有高的助漂选择性,预处理对纸浆的得率及黏度影响不大;该木聚糖酶对温度及pH的适应范围较广,在温度为75～80℃、pH 8.0～9.5范围内都可以发挥有效的助漂作用,尤其在温度80℃、pH 8.0、酶用量2 IU/g的条件下更能发挥酶效;耐热耐碱木聚糖酶X预处理可减少漂白ClO2用量,当达到对照浆相同白度(90%ISO)时可减少D0段26%～27%的ClO2用量(相当于总用氯量的16%)。

小型化中红外直接吸收CO_(2)光谱仪

二氧化碳(Carbon Dioxide,CO_(2))是一种关键的温室气体,对地球气候和生态系统调节有重要作用,准确检测痕量CO_(2)浓度对评价温室效应意义重大。一般情况下,气体分子在中红外光谱范围存在强吸收,可以实现高灵敏探测,因此,以4.219μm中红外波段的带间级联激光器为光源结合可调谐半导体激光吸收光谱技术(Tunable Diode Laser Absorption Spectroscopy,TDLAS)设计了小型化CO_(2)监测仪器。在不同标气浓度下对仪器进行了标定,并通过分析Allan方差,得出积分时间在8.7 s时对应的最低检测限为16.6×10^(-9),满足温室效应研究对CO_(2)气体的高灵敏测量需求。采用仪器对大气CO_(2)连续监测8天,并与商用仪器LGR进行对比,充分验证了小型化CO_(2)监测仪器的可靠性,以及中红外光源与TDLAS技术相结合的气体浓度检测方法在大气CO_(2)准确测量方面的可行性。该系统具有结构简单、体积小、功耗低和质量轻的特点,为建设空基无人机平台的CO_(2)监测能力提供了技术支持。

土壤盐分对油菜氮素积累、运转及利用效率的影响

【目的】比较不同盐分含量条件下油菜产量、品质等性状差异,初步探讨盐分含量对油菜氮素积累、运转及利用效率的影响机制。【方法】以杂交油菜宁杂1818和盐油杂3号为材料,在盐分含量为2.7 g/kg(低盐)和4.4 g/kg(高盐)的土壤上连续两年进行了田间试验。在初花期和成熟期取样,定期收集田间落叶,测定植株干物质积累量、氮素含量及籽粒品质,计算了不同盐分含量土壤条件下油菜氮素积累、运转及氮素籽粒生产效率。【结果】高盐土壤上油菜的初花期和成熟期时间较低盐土壤的推迟3~4天,产量、总生物量和氮素积累总量显著降低,宁杂1818和盐油杂3号两年产量平均下降幅度分别为23.6%和26.1%。与低盐土壤相比,高盐土壤上油菜籽粒含油量显著降低,蛋白质含量显著增加,宁杂1818和盐油杂3号两年油分含量平均下降幅度均为4.6%,蛋白质含量平均增加幅度分别为6.4%和9.4%。盐分含量对根系和叶片的氮素运转率影响较小。高盐土壤上油菜茎枝中的氮素运转率和氮素籽粒生产效率较低盐土壤的低,宁杂1818和盐油杂3号茎枝氮素运转率两年平均下降幅度均约为14.2%,氮素籽粒生产效率平均下降幅度分别为6.8%和9.3%。【结论】高盐土壤上油菜的产量、总生物量、氮素积累总量以及籽粒含油量较低盐土壤显著降低,籽粒蛋白质含量显著增加。高盐土壤上油菜茎枝中氮素运转率的显著降低是导致油菜氮素籽粒生产效率降低的重要因素之一。

一种改进的小波变换融合方法及其效果评价

针对传统小波变换融合方法易导致空间纹理信息丢失的缺陷,结合局部方差和局部差异加权算法的优点,提出了一种基于局部算法改进的小波变换融合方法。采用该方法对IKONOS多光谱与全色波段图像进行融合实验,分别从基于视觉效果、数理统计以及面向对象分类精度3个方面分析评价该方法的融合效果。结果表明:改进的融合方法综合了小波变换和局部算法的优点,显著地改善了图像的融合效果,是一种高效的图像融合方法。应用该方法融合后图像的方差由原来的98.28提高到164.32,信息熵由5.30增加到7.85,平均梯度从1.972提高到8.807,图像分类精度提高了10.24%。

耐热耐碱木聚糖酶对马尾松KP浆的助漂性能

根据预处理前后纸浆黏度和卡伯值的变化,研究了耐热耐碱木聚糖酶X对马尾松硫酸盐浆预处理的选择性;通过分析酶预处理对各漂段白度和终漂黏度的影响,揭示了该酶对D0E1D1E2D2漂白特性的影响。结果表明:耐热耐碱木聚糖酶X预处理具有较高的助漂选择性,处理后纸浆的卡伯值和黏度变化不大;耐热耐碱木聚糖酶X的适应性较广,在pH8.0～9.5、温度为75～80℃范围内都可以发挥其有效的助漂作用;在相同漂剂用量下,耐热耐碱木聚糖酶X预处理可提高浆的终漂白度,而黏度略有下降,在达到相同白度(90%ISO)时可减少D0段ClO2用量26%～27%。

RP-HPLC法测定山药中薯蓣皂苷的含量

目的建立测定山药中薯蓣皂苷含量的反相高效液相色潽法(RP-HPLC法)。方法山药粉末经70%甲醇浸泡过夜,回流提取1h,采用RP-HPLC法进行测定。色谱柱:大连伊力特SinoChrom ODS-BP色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-水(84∶16),流速:1 mL/min,检测波长:206nm,柱温:30℃。结果回归方程为:Y=7 446 X-22 054,线性范围:17.0~40.8μg/mL(r=0.999 2),分离度>1.5,回收率为102.14%,RSD为1.76%,铁棍山药、面山药、有机山药中薯蓣皂苷含量分别为0.504 7、0.420 5、0.649 6mg/g。结论该方法简便、准确、可靠,可用于山药中薯蓣皂苷的含量测定。

德国洋甘菊对实验性高血脂症大鼠的降脂作用

目的研究德国洋甘菊对实验性高血脂大鼠的降脂作用。方法选取造模成功的高血脂症大鼠70只,随机分为7组,每组10只。分别为正常对照组(蒸馏水1mL/kg),模型对照组(蒸馏水1mL/kg),阳性对照组(辛伐他丁7mg/kg),德国洋甘菊醇提物高、中、低剂量组(971、485、243mg/kg),德国洋甘菊水提物组(1 366mg/kg),连续灌胃4w。正常对照组喂养普通饲料,其余各组均喂养高脂饲料。灌胃结束后取血,采用全自动生化仪测定血液中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)值。结果与模型组大鼠比较,德国洋甘菊醇提物高剂量组大鼠血液TC、TG、LDL-C值降低,差异有统计学意义(P<0.01);德国洋甘菊醇提物中剂量组大鼠血液TC、TG、LDL-C值降低,差异有统计学意义(P<0.05);德国洋甘菊醇提物高剂量组和中剂量组大鼠血液HDL-C值升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论德国洋甘菊醇提物对实验性高血脂大鼠有较好的降脂作用。

维药唇香草乙醇提取物抗氧化活性研究

目的研究维药唇香草乙醇提取物的抗氧化活性。方法以抗坏血酸(Vc)为阳性对照,采用3种(清除DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基)抗氧化实验模型,评价唇香草乙醇提取物的体外抗氧化活性。结果当唇香草乙醇提取物浓度为5mg/mL时,对DPPH自由基清除率为91.14%,IC_(50)为1.4mg/mL,Vc的IC_(50)为0.26mg/mL,唇香草乙醇提取物清除DPPH自由基的能力低于Vc。当唇香草乙醇提取物浓度为5mg/mL时,对羟基自由基清除率为86.32%,IC_(50)为2.6mg/mL,Vc的IC_(50)为0.4 mg/mL,唇香草乙醇提取物清除羟基自由基的能力低于Vc。当唇香草乙醇提取物浓度为2.5 mg/mL时,对超氧阴离子自由基清除率为86.90%,IC_(50)为1.2mg/mL,Vc的IC_(50)为0.5mg/mL,乙醇提取物清除超氧阴离子自由基的能力低于Vc。结论唇香草乙醇提取物具有较好的抗氧化活性,可作为一种天然抗氧化剂来开发利用。

盐分浓度对油菜干物质积累分配、农艺性状及品质的影响

为了研究不同土壤盐分浓度对油菜生长的影响,2015—2016年度以‘扬油9号’和‘苏油211’为供试品种,在低盐浓度(2.978 g/kg)和高盐浓度(4.900 g/kg)试验田进行种植,于成熟期取样测定植株干物质积累量、农艺性状及籽粒品质含量。结果表明,随着盐分浓度增加,全株及不同器官干物质积累量均显著降低。高盐与低盐处理相比,‘扬油9号’和‘苏油211’产量下降幅度分别为24.14%和27.83%,不同器官中根系干物质积累量下降幅度最大,‘扬油9号’和‘苏油211’根系干物质下降幅度分别为34.52%和39.69%,茎枝干物质积累下降幅度最小,两品种下降幅度分别为9.46%和12.93%。随着盐分浓度增加,茎枝干物质分配比例显著增加,其余器官干物质分配比例均显著降低。随着盐分浓度增加,株高和角果数显著降低,而每角粒数和千粒重在不同盐分浓度处理间无显著差异。随着盐分浓度增加,籽粒油份含量显著降低,蛋白质含量显著增加。

有机山药中多糖及其他成分的含量测定

目的测定有机山药中多糖、脂肪、浸出物含量及折干率。方法以硫酸-蒽酮为显色剂,采用分光光度法测定有机山药中多糖的含量;采用索氏抽提法,测定有机山药中脂肪的含量;采用重量法测定机山药中浸出物含量及折干率。结果多糖在203.8~662.4μg/mL浓度范围内线性良好(r=0.999 3),精密度、稳定性、重现性的RSD均<5.00%,加样回收率为100.7%,有机山药中多糖含量为28.32%,脂肪含量为1.30%,折干率为12.80%,水浸出物为23.62%,醇浸出物为9.67%。结论多糖测定方法简单易行,稳定可靠;有机山药的脂肪和浸出物含量符合国家药典规定,为建立有机山药的质量标准提供依据。

唇香草挥发油降压作用机制研究

目的探讨唇香草挥发油抗高血压作用机制。方法采用水蒸气蒸馏法提取唇香草挥发油。将SHR大鼠随机分为6组,每组10只,分别为对照组(给予正常喂养)、唇香草挥发油高剂量组(200mg/kg·d)、唇香草挥发油中剂量组(100mg/kg·d)、唇香草挥发油低剂量组(50 mg/kg·d)、卡托普利组(20 mg/kg·d)、氢氯噻嗪组(20mg/kg·d);WKY大鼠10只为正常血压组。所有实验动物均在SPF级洁净动物饲养室内饲养,自由饮食进水,每天12h光照与黑夜循环。适应性喂养2w后开始给药。按照2mL/100g体质量每天1次,连续灌胃4w。采用ELISA法测定唇香草挥发油对自发性高血压大鼠血浆中肾素(Reinin)活性、心钠肽(ANP)和内皮素(ET)含量的影响,利用利尿实验测定唇香草挥发油对各组大鼠尿量的影响。结果与氢氯噻嗪组大鼠排尿量(23.71±3.14)mL比较,对照组大鼠排尿量(16.29±2.93)mL和正常血压组大鼠排尿量(20.86±1.76)mL排尿量减少,差异有统计学意义(P<0.01);与氢氯噻嗪组比较,唇香草挥发油高剂量组(16.86±4.72)mL排尿量减少,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组大鼠体内肾素活性(18.13±4.58)mmol/mL比较,高剂量组大鼠体内肾素活性(21.48±4.63)mmol/mL升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组大鼠体内肾素活性比较,卡托普利组大鼠体内肾素活性(22.61±3.21)mmol/mL升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组大鼠血浆中内皮素含量(52.46±7.89)pg/mL比较,唇香草挥发油高剂量组大鼠血浆中内皮素含量(43.31±6.48)pg/mL降低,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组大鼠血浆中内皮素含量比较,卡托普利组大鼠血浆中内皮素含量(40.16±4.37)pg/mL降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组大鼠血浆心钠肽浓度(85.52±7.99)/pg/mL比较,正常血压组大鼠血浆心钠肽浓度(70.63±8.29)/pg/mL降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论唇香草挥发油的降压作用与降低体内最强缩血管物质ET-1密切相关。

唇香草挥发油急性毒性实验研究

目的探究唇香草挥发油的急性毒性。方法采用水蒸气蒸馏法提取唇香草挥发油,将90只小鼠随机分为9组,每组10只,给药组小鼠灌胃剂量分别为10 000、8 000、6 400、5 000、3 000、2 000、1 000、500mg/kg体质量唇香草挥发油溶液,空白组小鼠灌胃同等剂量的蒸馏水,按照0.2mL/10g体质量每天1次,连续灌胃7d,第1次给药前禁食不禁水12h,给药后密切观察死亡数1d,第2天以后每天观察2次,连续观察14d,记录各组小鼠灌胃前后体质量。通过小鼠死亡数量来计算LD_(100)、LD_(50)、LD_0。结果给药期结束,给药剂量为8 000mg/kg体质量组小鼠全部死亡,给药剂量1 000mg/kg体质量组小鼠全部存活,与空白组小鼠比较,各组小鼠体质量变化差异无统计学意义(P>0.05);经计算小鼠全数致死量LD_(100)=8 000mg/kg,小鼠0数致死量LD_0=1 000mg/kg,小鼠半数致死量LD_(50)=4 122.33mg/kg,置信系数a=0.05时的置信区间为:3 560.56<LD_(50)<4 772.73mg/kg。结论唇香草挥发油毒性低,临床安全剂量还需进一步探究。

维药小枝玫瑰花中没食子酸含量测定

目的建立测定维药小枝玫瑰花中没食子酸含量的方法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱大连伊力特Sino Chrom ODS-BP（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇-0.3%磷酸（6∶94）为流动相,检测波长272 nm。结果没食子酸质量浓度在5.05～101.00μg/m L范围内峰面积线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为100.15%（RSD=1.39%）,小枝玫瑰花中没食子酸含量为0.491 7 mg/g。结论该方法简便、准确,重复性好,可用测定小枝玫瑰花中没食子酸的含量。

青香茅化学成分的研究

目的研究青香茅[Cym bopogon caesius(Ness)Stapf.]的化学成分。方法采用硅胶柱层析色谱方法对青香茅提取物进行分离纯化,根据化合物理化性质和碳谱、氢谱的化学位移数据鉴定其结构。结果从青香茅的乙酸乙酯萃取部位分离得到3个化合物,经鉴定为β-谷甾醇(Ⅰ)、异荭草素(Ⅱ)和绿原酸(Ⅲ)。结论化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均为首次从青香茅中分离得到。

GC法测定唇香草挥发油中胡薄荷酮的含量

目的采用气相色谱(Gas Chromatography,GC)法测定唇香草挥发油中胡薄荷酮含量。方法色谱柱RTX-5(30cm×0.25mm),程序升温条件:初始温度50℃,保留时间1min;以8℃/min的速率升至210℃,保留时间5min;以20℃/min的速率升至280℃,保留时间3 min,进样量1μL。结果胡薄荷酮浓度在0.57~3.43mg/mL的范围内线性关系良好(r=0.999 8),胡薄荷酮平均回收率为101.7%,RSD=1.7%,唇香草挥发油中胡薄荷酮含量为478.543mg/mL。结论 GC法简便、快速、准确、重现性好,可用于唇香草挥发油中胡薄荷酮的含量测定。