解淀粉芽胞杆菌TF28产抗菌脂肽培养基优化

采用响应面方法对解淀粉芽胞杆菌TF28产抗菌脂肽培养基进行优化,以提高其产量。利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响抗菌脂肽产量的3个主要因素:葡萄糖、硫酸镁和磷酸氢二钠。通过最陡爬坡试验逼近最大响应值区域,利用响应面分析方法确定显著组份的最佳水平。结果表明,优化后的培养基组份为葡萄糖42.37 g/L,酵母膏2 g/L,牛肉膏2 g/L,硫酸铵2 g/L,硫酸镁2.11 g/L,氯化钙0.1 g/L,硫酸锰0.1 g/L,磷酸二氢钾1.5 g/L,磷酸氢二钠3 g/L,经3次平行试验验证,抗菌脂肽产量为1.75 g/L,比优化前提高了5.25倍。该研究优化了解淀粉芽胞杆菌TF28提高抗菌脂肽产量的培养基,为抗菌脂肽的生产奠定基础。

不同变质程度煤自燃特性实验研究

利用程序升温实验装置对不同变质程度的煤进行氧化升温实验,对实验过程中的临界温度变化,CO、CO_2、CH4浓度变化等的关系进行分析。分析结果表明:煤的临界温度随煤的变质程度增加而升高64.79℃(长焰煤)、69.86℃(不黏煤)、71.23℃(气煤);CO、CO_2、CH43种气体升温过程中的浓度变化随变质程度的增加而减小;煤的氧化自燃倾向性在一定程度上随煤的变质程度的增加而降低。

马铃薯丝核菌病生防菌株筛选及其拮抗作用研究

[目的]筛选对马铃薯丝核菌病害具有较好防治作用的生防菌株,并研究其拮抗作用。[方法]采用平板抑菌对峙培养法筛选生防菌,并利用梯度稀释法及共培养法对拮抗作用机制进行初步研究。[结果]筛选出2株对马铃薯丝核菌具有抑制作用的生防菌株PB12、CZS;抑菌试验结果表明,在液体培养时,菌株PB12的抑菌率为98.67%,CZS的抑菌率为98.36%,生防菌液稀释度的变化对抑菌效果无明显影响;在固体培养时,随着生防菌液稀释度的增加,抑菌能力稍有下降。菌株PB12和CZS均可抑制丝核菌菌核的形成。[结论]筛选出2株对马铃薯丝核病菌具有较强拮抗作用的生防菌株PB12和CZS,并通过抑制病原菌菌丝生长和菌核的形成达到抑菌效果。

烟草野火病与角斑病生防菌株的筛选

本研究通过室内平板拮抗作用实验,筛选对烟草细菌病害具有较好防治作用的生防菌株,并对其拮抗作用及复合菌剂进行研究。筛选到一株对烟草野火病菌具有拮抗作用的生防菌株CZS,抑菌圈平均直径为25.92mm;一株对烟草角斑病菌具有拮抗作用的生防菌株18,抑菌圈平均直径为28.76mm。此外,通过不同配比复合菌剂的抑菌实验表明,无论是针对野火病菌还是角斑病菌,生防细菌CZS、18以2:1配比而得的复合菌剂抑菌效果最明显。

PCR-DGGE技术研究大豆内生细菌多样性

本研究采用了巢氏PCR法,先以799F-1492R引物,以大豆基因组DNA为模板进行扩增,将目的条带切胶回收并进行第二步PCR,其中以GC-968F-1378R为引物,最终得到了V6、V7、V8三个高变区的目的片段(470bp)。采用分子生物学技术PCR-DGGE分析大豆内生细菌多样性发现,大豆叶片中的内生细菌多样性要小于根部和茎部;大豆不同的品种间存在很多共有条带,而每个不同品种又存在各自的特有条带;在大豆的各个不同生长时期内生细菌多样性逐渐增加,只有在结荚期内生细菌多样性最小。

Jhdm1d在小鼠胚胎发育中后期的表达及表观调控研究

本研究通过实时定量PCR(q RT-PCR)和免疫组织化学等技术,分析了Jhdm1d基因在小鼠胚胎发育中后期的表达模式。q RT-PCR结果显示,在胚胎发育中后期,Jhdm1d基因在各组织中的表达量明显不同,Jhdm1d在E12.5时期的脑和肝组织中表达最高,而在舌和肺组织中表达最低;在E15.5时期的肝脏组织中该基因的表达量最高,在肺和肾组织中的表达最低;在E18.5时期各组织中的表达均普遍较低。同时利用免疫组织化学的方法分析其在E15.5时期的表达,结果显示Jhdm1d在蛋白水平上的表达与定量结果基本相符。同时,亚硫酸氢盐测序的结果说明Jhdm1d的表达不受甲基化的影响。

Jhdm1d 在小鼠胚胎发育中后期的表达及表观调控研究

本研究通过实时定量 PCR （qRT-PCR）和免疫组织化学等技术，分析了 Jhdm1d 基因在小鼠胚胎发育中后期的表达模式。qRT-PCR 结果显示，在胚胎发育中后期，Jhdm1d 基因在各组织中的表达量明显不同，Jhdm1d 在 E12.5时期的脑和肝组织中表达最高，而在舌和肺组织中表达最低；在 E15.5时期的肝脏组织中该基因的表达量最高，在肺和肾组织中的表达最低；在 E18.5时期各组织中的表达均普遍较低。同时利用免疫组织化学的方法分析其在 E15.5时期的表达，结果显示 Jhdm1d 在蛋白水平上的表达与定量结果基本相符。同时，亚硫酸氢盐测序的结果说明 Jhdm1d 的表达不受甲基化的影响。

寒地耐冷生防菌株筛选鉴定及特性研究

试验分离鉴定黑龙江省鹤岗地区玉米根围冻土中生防菌株wswshg^(-1)0,并检测其低温生长特性、分泌活性物质能力、拮抗病原菌活性及催芽促生特性。综合形态和理化特性、16S r DNA和gyr B基因序列分析将其鉴定为甲基营养型芽孢杆菌Bacillus me thylotrophicus。该菌株在4~15℃低温及20~30℃常温范围内可正常生长,是一株耐冷生防菌株,分泌几丁质酶、纤维素酶、蛋白酶、嗜铁素、吲哚乙酸、抗菌蛋白等多种活性物质,抑制烟草角斑病菌、玉米茎基腐病菌、黄瓜枯萎病菌、大豆菌核病菌、水稻恶苗和稻曲病菌、番茄灰霉病菌以及刺五加根腐病菌生长,抑制率74.3%~89.2%。菌液处理玉米种子能促进种子萌发及幼苗生长,根长和茎长显著增加。该菌株具有低温生长、抗菌促生特性,为低温菌剂研发提供菌株资源。

解淀粉芽孢杆菌TF28对设施连作黄瓜根际土壤酶活性和微生物的调节

为研究解淀粉芽孢杆菌TF28对设施连作黄瓜根际土壤环境影响,以液体(L)、颗粒(P)和复合(LP)3种处理与没有施用TF28的空白对照进行对比试验,测定设施黄瓜生育指标、土壤酶活性及微生物种群数量。结果表明,移栽后2~3周后L、P和LP 3种处理株高分别提高18.78%、17.27%、11.88%;L和LP 2种处理对黄瓜根须数量与空白对照相比分别提高35.20%和48.66%。移栽2~8周,与空白对照相比,P处理对碱性磷酸酶活性、酸性磷酸酶活性高69.43%、77.43%,L处理脲酶活性提高40.99%,LP处理过氧化氢酶活性提高163.24%。与空白对照相比,3种处理都能显著增加土壤细菌和放线菌数量,降低真菌数量。这说明TF28的添加对连作黄瓜中的酶活性、微生物数量及群落结构有明显的调节作用。

高产几丁质酶的粘质沙雷氏菌株的诱变选育

以黑龙江省科学院微生物研究所实验室保存的1株粘质沙雷氏菌S68为出发菌株,进行原生质体紫外线、Na NO2和复合诱变,通过透明圈对比和酶活测定,最终获得1株产酶量高于原始菌株4.3倍的粘质沙雷氏菌诱变菌株,产酶量达到4.98μg·h-1。确定该菌株最佳诱变方法为复合诱变,首先进行紫外诱变(高度为30 cm,诱变时间为12 s),再用化学诱变(0.4 mol·L-1Na NO2诱变5 min),经验证该诱变菌株遗传稳定。

低温生防菌株的诱变选育及生防效果

为了提高生防菌株wswshg-10低温生长速度和抑菌活性,采用常压室温等离子体诱变技术(ARTP)对其进行诱变选育。结果表明,最佳照射时间为120 s,此时菌株致死率为95.4%,单菌落变大的突变率为24.5%。经低温平板培养和抑菌活性测定,从19个大菌落的菌株中筛选出2株低温生长速度和抑菌活性明显高于出发菌株的突变菌株WM4和WM7,其低温(15℃)生长速度分别是出发菌株的1.94倍和2.09倍,平板抑菌活性分别较出发菌株高26.2%和29.8%。传代培养10代,2株突变菌株在低温生长速度和抑菌活性方面均表现出良好的遗传稳定性。突变菌株WM7对玉米茎基腐病的温室防效为70.8%,比出发菌株高15.1%。本研究结果为适于低温地区生物农药的研发提供了菌株资源。

榆紫叶甲病原菌分离及生防菌的筛选与鉴定

[目的]探寻防治榆紫叶甲病的生防菌株。[方法]从榆紫叶甲虫体上分离菌株后进行培养,并对室内饲养的榆紫叶甲各龄幼虫进行致病性试验。[结果]从感病榆紫叶甲成虫虫体上分离到18个菌株,其中12个菌株具有几丁质和蛋白质降解活性。5个菌株对1~2龄幼虫表现出不同程度的致病力,在接种后1~3 d幼虫开始死亡,处理后7 d幼虫的累积死亡率为21.2%~46.8%,其中YJA-03和YJA-10菌株的累积死亡率>30.0%。YJA-03菌株为革兰氏阳性菌,经过形态学、生理生化特性和PCR扩增鉴定确定它属于短杆菌属(Exiguobacterium)。YJA-10菌株为革兰氏阴性菌,经鉴定其属于Glutamicibacter属。[结论]YJA-03和YJA-10菌株可用作防治榆紫叶甲病的生防菌。

昆虫感受气味物质的分子机制

在昆虫触角中,位于嗅觉感器神经树突膜上的气味受体蛋白与同源配位体相互作用将化学信号转换为神经活动。在与气味受体相互作用前,这些疏水性的配位体必须进入和穿过含有高度聚集气味降解酶的水环境,气味分子和气味结合蛋白OBP相互作用,在水腔和感器的表皮毛壁的交界面上与气味分子结合,通过扩散穿过水腔,将气味运送到神经细胞膜受体。接收后传入中枢神经系统。中枢神经系统对所有感官器官接收信号进行整合,最后使效应器官产生行为反应。对昆虫感受气味物质的分子机制进行了探讨。

产几丁质酶菌株S68-CM5产酶条件优化研究

为提高黏质沙雷氏菌株S68-CM5产几丁质酶能力,对产酶发酵条件进行优化研究。利用Plackett-Burman设计和响应面法对培养基和发酵条件进行摸索。结果显示,获得最佳发酵产酶培养基:胶体几丁质1.5%,牛肉膏7 g/L,酵母膏2 g/L,葡萄糖8 g/L,氯化钠3.5 g/L,蛋白胨2 g/L,磷酸氢二钾3.5 g/L;最佳产酶培养条件为:p H6.88,温度27.32℃,摇床转数155.82r/min,培养时间60 h,接种量1%,装液量50 m L/250 m L。优化后产酶量达到7.131 U/m L,比优化前产酶量提高了1.43倍。

基于相似性判断的广告片段检索

本文针对广告视频检索,提出了一种基于相似性判断的检索方法,该方法建立并维护一个广告视频片段的数据库。该库将不同的广告产品进行分类,每一类都有其对应的产品名称以及图标。对于一个新的视频广告片段,运用SIFT特征提取算法和PE匹配算法,对该片段进行匹配。而当用户需要检索时,可直接输入广告中产品的名字或者与该产品相关的产品logo或图像,通过与系统中预先建立的广告片段数据库进行匹配,从而给用户提供其所需要的视频片段。

马铃薯微生物菌剂的应用效果及对根际土壤微生物的影响

将离体条件下对马铃薯晚疫病菌和丝核病菌具有较强抑菌活性的枯草芽孢杆菌PB12菌株以拌种和颗粒底肥方式施用,结果对马铃薯出苗和幼苗生长均具一定促进作用,可降低马铃薯晚疫病病情指数,且增产效果明显,并可提高马铃薯根际土壤细菌数量,降低真菌数量,促进马铃薯根际土壤的微生态平衡。

马铃薯晚疫病生防菌株的筛选及其拮抗作用的研究

目的:筛选获得对马铃薯晚疫病具有较好防治作用的生防菌株,并对其拮抗作用进行研究。方法:利用平板抑菌对峙培养法筛选生防菌,并采用梯度稀释法及共培养的方法对拮抗作用机制进行初步探索。结果:筛选出2株对马铃薯晚疫病菌具有抑制作用的生防菌株PB12、CZS;通过抑菌试验表明,菌株PB12和CZS的抑菌率可达98%,在液体培养时生防菌液稀释度的变化对抑菌效果没有明显影响,在固体培养时随着生防菌液稀释度的增加抑菌能力稍有下降。结论:筛选出2株对马铃薯晚疫病菌具有较强拮抗作用的生防菌株PB12和CZS,并通过抑制病原菌菌丝的生长达到抑菌效果。

薄皮甜瓜采后病害生防菌株的安全性研究

目的:研究对薄皮甜瓜采后病害具有防治作用的生防菌株浅黄假单胞菌的安全性,为微生物农药的开发提供安全的微生物资源。方法:将浅黄假单胞菌(Pseudomonas luteola)以3 ×109 cfu/mL的最大浓度、0.4 mL/10 g的最大体积,对小鼠二次灌胃给药,测定半数致死量和最大耐受量。结果:观察21 d,20只小鼠均状态良好,未出现任何不适现象,皮毛光亮、活动正常、摄食正常、无腹泻发生,无死亡病例。结论:该受试样品作为微生物农药使用是安全的。

中间类型害虫发生特点及防治对策

中间类型害虫因其生活习性,每隔几年就要大发生一次,对林业生产造成严重损失,本文通过对害虫发生特点进行分析,从生物防治、物理防治和化学防治几种方面,对防治该类型害虫进行了讨论,力求能找到一种好的方法来达到无公害防治目的。

甲基营养型芽胞杆菌WM7低温响应转录谱分析

为从分子水平揭示甲基营养型芽胞杆菌WM7低温响应机制,采用高通量测序技术对低温和常温培养的菌体进行转录组测序分析,对部分差异表达显著基因进行RT-qPCR验证。结果表明,共检测到2 029个差异表达基因,其中1 519个低温上调,510个低温下调。GO和KEGG分析显示,1 199个差异表达基因归属细胞组分、分子功能和生物过程3个部分,683个基因参与到225个代谢途径中,其中涉及基因最多的是磷酸戊糖途径、嘌呤和氨基酸合成途径。菌株低温响应主要与脂肪酸代谢、ABC转运体、转录调控、信号转导、碳氮代谢等途径相关。此外,检测到大量差异表达的未知功能基因,多个基因差异表达倍数均大于50倍。本研究从基因表达方面阐述了甲基营养型芽胞杆菌WM7低温响应机制,为全面揭示其低温生长机制奠定了理论基础,提供了基因信息。