沉默GLUT-1表达对食管鳞癌细胞株TE-13增殖和迁移的影响

目的研究沉默葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter protein-1,GLUT-1)的表达对食管鳞癌TE-13细胞增殖、周期及迁移的影响及可能的作用机制。方法采用慢病毒感染的方法将特异性针对GLUT-1基因的GLUT-1-sh RNA转入TE-13细胞,建立稳定干扰GLUT-1表达的TE-13细胞株,分成GLUT-1-sh RNA组和阴性对照组进行对比研究。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测GLUT-1-sh RNA对TE-13细胞GLUT-1 m RNA及其蛋白表达的影响。CCK-8法、FCM法和Transwell小室迁移实验分别检测沉默GLUT-1表达后对TE-13细胞增殖、细胞周期和迁移的影响;同时采用蛋白质印迹法检测细胞迁移以及乏氧相关蛋白的表达情况。结果采用慢病毒将GLUT-1-sh RNA转入TE-13细胞后,可明显下调GLUT-1蛋白(t=6.713,P<0.01)和m RNA的表达水平(t=4.181,P<0.05)。与阴性对照组相比,GLUT-1干扰后细胞的增殖至72 h(t=3.097,P<0.05)和96 h(t=3.497,P<0.05)明显被抑制,同时细胞的迁移能力可见下降,但是细胞周期至24 h未见影响;基质金属蛋白酶的MMP-9(t=6.895,P<0.01)和缺氧诱导因子HIF-1α(t=13.74,P<0.001)的表达明显下调,但是MMP-2的表达没有变化(t=2.582,P>0.05)。结论沉默GLUT-1的表达可抑制食管磷癌细胞株TE-13细胞的增殖和迁移,并明显下调细胞内MMP-9和HIF-1α蛋白的表达,为寻找靶向治疗食管癌新靶点提供了初步的实验基础。

X射线对胰腺癌细胞株SW1990和Capan-2细胞增殖及凋亡的影响

目的探究不同剂量的X射线对胰腺癌细胞株SW1990和Capan-2增殖和凋亡的影响。方法取处于对数生长期的SW1990和Capan-2细胞,经不同剂量的X射线(2、4、6、8和10 Gy)照射后分别培养24、48和72 h。CCK-8法检测细胞增殖;采用Annexin V/PI双染的方法检测SW1990和Capan-2细胞的凋亡;Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白的表达变化;RT-PCR检测细胞凋亡相关蛋白的mRNA表达。结果相比正常对照组,X射线能明显抑制SW1990和Capan-2细胞的增殖,并且这种抑制作用呈剂量依赖性。细胞凋亡率在X射线的作用下也明显增加,并呈现剂量依赖性。Western blotting结果显示X射线能增加两种细胞中促凋亡蛋白Bax的表达。RT-PCR结果显示X射线能降低抗凋亡蛋白Bcl-2 mRNA表达,上凋抗凋亡蛋白Bax mRNA表达。结论 X射线能抑制胰腺癌细胞株SW1990和Capan-2的增殖并提高其凋亡率,呈现一定的剂量依赖性,其机制可能与诱导胰腺癌细胞凋亡有关。

生物信息学在药物开发中的应用

由计算机、数学、生物学等学科组成的生物信息学在药物开发中起着重要的作用,本文从药物开发模式的改变、先导化合物的发现和优化几个方面进行了综述。

浅谈建设工程监理中存在的问题及对策

在现代工程建设中,工程监理是其管理过程的重要构成部分。工程监理对维护社会公共利益做出了重要贡献,同时为保护业主合法权益不受侵害提供了充分保障。随着近年来经济的快速发展,我国建筑行业发展迅猛,但与之相对应的工程监理行业发展尚不够完善,存在诸多不合理之处。笔者结合工程监理实际,从其中的缺陷入手,对工程监理中出现的问题展开分析,并提出相应的解决策略,希望有所指导和帮助。

无形资产评估知识讲座

第三讲:技术商品无形资产可分为技术型和非技术型无形资产,凡含有技术内容的无形资产譬如知识产权中的专利权、工业版权、专有技术中的设计图纸、加工工艺、材料配方和技术管理经验等均可泛指为技术型无形资产。

无形资产评估知识讲座

第七讲商标的评估商品经济的发展,必然带来商品的丰富、种类的繁多,也带来市场的激烈竞争。商标制度也随之而逐步发展和完善。商标也就成为一种特殊的商品和无形资产,是当代社会的世界性现象。完善的商标制度不仅包括商标立法和司法保护制度,也包括对商标价值和价格的评估制度。这是当代社会经济发展的一种标志。

无形资产评估知识讲座

第九讲土地使用权的评估土地是一种自然资源,具有自然属性和经济社会属性。作为资产评估主要是针对它的经济社会属性而言的。一、土地价格的特点及其构成。 1、土地价格的特点:①土地价格不是土地价值的货币表现。因为土地不是劳动产品。

无形资产评估知识讲座

近年来,无形资产已被人们关注。无形资产作为资产的重要组成部份,其开发和利用,对于促进科技进步、树立企业形象、提高企业经济效益具有重要意义。为了适应企业制度改革和经济技术合作与发展的需要,促进无形资产的开发、转让、利用和研究,客观反映无形资产的价值量,对无形资产进行科学的评估已成为社会主义市场经济发展的迫切需要。为此,本刊从本期起将连续刊登无形资产的基础知识讲座。以飨读者。

无形资产评估知识讲座

第五讲专有技术的评估专有技术型无形资产在无形资产评估实践中占有重要份量,它既有别于专利技术的评估,又有较多的复杂性,本讲专门简述。

在(水源地)水库水质保护中渔业生产的利与弊

在水库水体生态系统中鱼类作为消费者和最活跃的生物因子,在维持水库生态系统健康和水质保护中发挥着重要作用,特别是在水源地水库中更加重要。水库渔业生产则直接影响着水源地水库生态系统的健康和水质保护成果。本文就水库水质保护中渔业生产的利弊进行分析,并提出如何在水源地水库中兴利除弊,发展“保水渔业”,真正做到“以渔养水”。

基于CFD技术小型水电站提质增效关键技术的研究与应用

《水电发展“十三五”规划》强调“转变以扩机增容为主的小水电改造传统思路,根据流域生态和工程安全需要,因地制宜实施以安全、环保为目标的小水电技术改造工作,提高电站安全水平,提升机组运行效率,增加下泄生态流量,加强运行监测监管。”本文主要以南城子水库电站为例,通过坝后式小型水电站在增效扩容改造中CFD等关键技术的研究和应用,选择适合如何在增加发电量同时满足下游河道生态流量,达到增效、安全、环保的技改目标。

应用噬菌体展示技术筛选氯胺酮模拟表位的研究

目的应用噬菌体展示技术筛选氯胺酮模拟表位,为建立无毒ELISA检测体系提供基础。方法以抗氯胺酮单克隆抗体为配体,在噬菌体七肽库中淘选氯胺酮的模拟表位。经4轮淘选后,选择可与氯胺酮单克隆抗体有不同程度结合的噬菌体,并进一步以间接竞争ELISA确定与盐酸氯胺酮存在竞争抑制的阳性克隆。结果发现10个噬菌体均可与氯胺酮单克隆抗体不同程度的结合;以间接竞争ELISA确定其中5个阳性克隆与盐酸氯胺酮存在竞争抑制现象;5个阳性克隆测序结果表明,获得了4种不同的氨基酸序列。结论初步判断这4个噬菌体展示了氯胺酮模拟抗原表位。