黄连素对高盐高糖诱发秀丽隐杆线虫形态及寿命改变的干预作用

目的 探讨黄连素对高盐高糖诱发的秀丽隐杆线虫形态和寿命改变的干预作用。方法 取秀丽线虫进行培养,随机分为正常对照组、高盐组、高糖组、高盐高糖组。正常对照组加入线虫NGM培养基;高盐组、高糖组、高盐高糖组下设模型对照组、10 mg/L黄连素干预组、20 mg/L黄连素干预组,先分别加入高盐培养基(含0.7%氯化钠的线虫NGM培养基)、高糖培养基(含1%葡萄糖的线虫NGM培养基)、高盐高糖培养基(含0.7%氯化钠和1%葡萄糖的线虫NGM培养基),然后向黄连素干预组中加入相应浓度的黄连素溶液,培养6 d。于第1、3、6天测定各组线虫体长、体宽及寿命,培养第6天采用RT-qPCR法检测线虫类似人胰岛素代谢相关基因daf-2、daf-16 mRNA。结果与正常对照组相比,高盐、高糖以及高盐高糖组线虫体宽增加、寿命缩短(P均<0.05),体长无明显变化(P均>0.05),daf-2 mRNA表达升高、daf-16 mRNA表达降低(P均<0.05);与高盐、高糖以及高盐高糖组相比,添加黄连素组线虫的体宽降低、寿命延长(P均<0.05),体长无明显变化(P均>0.05),daf-2 mRNA表达降低、daf-16 mRNA表达升高(P均<0.05)。结论 黄连素可抑制高盐高糖诱发的秀丽线虫形态改变以及寿命缩短,其机制可能是通过下调daf-2 mRNA表达、上调daf-16 mRNA表达来发挥作用。

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罗布红麻提取物单次给药及20天亚急性毒性实验研究

目的研究罗布红麻提取物(LBHM)的急性毒性特点。方法选取16~18 g昆明小鼠,雌雄各半,急性毒性采用最大给药量法,分为对照组和LBHM最大给药量组,单次灌胃给药;亚急性毒性分为LBHM低、中、高剂量组,分别为1.2、2.4、4.8 g/(kg·d),相当于临床剂量的40、80、160倍,按照0.4 mL/10 g灌胃给药,1次/d,连续20 d。给药后进行一般观察,检测体重、脏器重量、血液生化学等指标。结果急性毒性小鼠出现活动减少、俯卧、竖毛、萎靡不振等症状,小鼠死亡率为60%;亚急性毒性给药20 d,期间中、高剂量组分别死亡1、2只小鼠;高剂量组心脏及脾脏重量、体重与对照组相比有差异(P<0.05);高剂量组肌酐明显升高(P<0.05),中剂量组尿素明显升高(P<0.05)。结论结论LBHM以最大给药量24 g/(kg·d),为临床人拟用剂量的800倍,表现出一定的急性毒性作用;亚急毒实验显示,LBHM安全剂量介于临床剂量的40~80倍之间,总体来看,LBHM使用的安全窗较高。

罗布麻叶水提物镇静催眠作用研究

目的探讨罗布麻叶水提物(water extract of Apocynum venetum leaves,AVLWE)镇静催眠作用及机制。方法随机将ICR小鼠分为对照组、右佐匹克隆(阳性药,0.40 mg·kg^(−1))组和AVLWE低、中、高剂量(0.58、1.17、2.34 g·kg^(−1))组,每天ig给药1次,连续4周,每周称体质量;于末次给药前1 d给药60 min后,应用旷场视频分析系统检测各组小鼠5 min自主活动;于末次给药45 min后,各组动物ip 1%戊巴比妥钠(35 mg·kg^(−1),阈下催眠剂量),记录30 min内入睡潜伏期、入睡动物数、睡眠时间;结束后麻醉处死动物,取脑称质量并计算脑系数。SD大鼠分为对照组、模型组、右佐匹克隆(阳性药,0.27 mg·kg^(−1))组和AVLWE低、中、高剂量(0.40、0.81、1.62 g·kg^(−1))组,每天ig给药1次,连续4周,每周称体质量;除对照组外,给药第28、29天ip对氯苯丙氨酸(PCPA)制备大鼠失眠模型,给药结束称取脑质量并计算脑系数,取下丘脑,ELISA试剂盒法测定5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量。结果小鼠实验结果表明,与对照组比较,各给药组第1~4周体质量均显著降低(P<0.01);右佐匹克隆片和AVLWE中、高剂量组睡眠发生率均显著增加(P<0.05、0.01);右佐匹克隆片和AVLWE中、高剂量组睡眠时间显著延长(P<0.05);AVLWE低、中、高剂量组脑系数均显著升高(P<0.01)。大鼠实验结果表明,与对照组比较,AVLWE高剂量组第1~4周体质量均显著降低(P<0.05、0.01);与模型组比较,AVLWE高剂量组脑系数显著升高(P<0.05);右佐匹克隆片组、AVLWE高剂量组DA水平显著降低(P<0.05)、5-HIAA水平显著升高(P<0.01),AVLWE低、中、高剂量组5-HT水平显著升高(P<0.05、0.01)。结论AVLWE具有改善睡眠的作用,机制可能与上调下丘脑5-HT水平、下调DA水平有关。

罗布麻叶水提取物对链脲佐菌素致糖尿病小鼠的治疗作用及对肠道GLP-1蛋白表达的影响

目的探讨罗布麻叶水提取物(WEAVL)对链脲佐菌素(STZ)致糖尿病模型小鼠的治疗作用。方法随机将ICR小鼠分为对照组和WEAVL(2.34 g/kg)组,每天ig给药1次,连续30 d,检测空腹血糖和体质量。ICR小鼠按200 mg/kg ip2%STZ溶液制备糖尿病模型,造模成功的小鼠按血糖值随机分为模型组、盐酸二甲双胍(阳性药,130 mg/kg)组和WEAVL低、中、高剂量(0.58、1.17、2.34 g/kg)组,另设对照组,连续给药30 d,测定体质量、空腹血糖、糖耐量及血糖曲线下面积(AUC);称取肝、肾质量,计算脏器系数;取胰腺组织进行HE染色、组织病理学检查;Western blotting检测肠道组织胰高血糖素样肽-1(GLP-1)蛋白的表达水平。结果与对照组比较,单纯给予WEAVL对正常动物空腹血糖无明显影响,可显著降低小鼠体质量(P<0.01)。与对照组比较,模型组小鼠血糖显著升高(P<0.01),各组小鼠体质量均显著降低(P<0.01);与模型组比较,WEAVL高剂量组给药第2~4周体质量显著降低(P<0.05、0.01),3个剂量组2 h血糖、血糖AUC均显著降低(P<0.01),高剂量组肝脏系数显著降低(P<0.05)、肾脏系数显著升高(P<0.05),中、高剂量组动物胰岛细胞空泡变性例数减少,中、高剂量组肠道组织GLP-1蛋白的表达显著上调(P<0.05)。结论WEAVL对STZ致糖尿病小鼠有一定治疗作用,其作用机制可能与上调肠道组织中GLP-1的表达有关。